Раздел 15. Мега-проект «ДОЛИНА ЖИЗНИ» (концепция создания и функционирования)

После просмотра материала учебника у автора возникло ощущение, его переполнения разнообразными проектами. Поэтому ряд проектов относящихся к рассматриваемым проблемам пришлось перенести в самый конец книги (см ПРИЛОЖЕНИЕ 18). Но вот один самый значимый и объёмный по затратам проект из-за его важности и  сложности реализации всё-таки следует рассмотреть. Есть надежды на то, что когда-нибудь найдутся частные компании, которые возьмутся за его реализацию. По аналогии с известной «Силиконовой долиной» название проекта «Долина жизни» отражает направление стоящих перед возможными  учредителями и организаторами реализации проекта задач. Автор также полагает, что, несмотря на многолетний период существования новосибирского Академгородка и недавно возникшего проекта «Сколково», предлагаемая частным инвесторам «инновационная деревня» должна быть построена иначе.  Им не предлагается принимать участия в  «играх» с современной государственной вертикалью власти. В современных условиях, такой проект заведомо может быть  обречён — «накатят, откатят — заиграют» и т. д..  Ниже приводится описание предлагаемого проекта.Надеюсь, читатели догадываются, что, судя по заголовку,  далее будет представлен  очередной, но наиболее фантастический проект автора.  Следует заметить, что фантазии возникают всегда, когда мы наблюдаем за удивительной способностью, установленной в стране «вертикали власти» решать  стоящие перед населением насущные проблемы, практически не думая или, возможно, думая только о весьма отдалённых перспективах развития страны. Дожить бы — возможно, я ошибаюсь.В СМИ довольно часто мелькают сведения о том, что в стране практически нет проектов. Правда, сообщают также, что в «Сколково» уже накоплено 1200 проектов. Кто бы организовал определение рейтинга каждого из них по степени значимости для страны и целесообразности реализации, чтобы не браться за всё сразу с известным финалом или, тем более, с использованием различных «тёмных» схем. Мои предложения на этот счёт содержатся в разделе 1. Вот  ещё одно в значительной мере фантастическое предложение.Основная цель проекта:Создание условий для развития творческой активности специалистов в области биотехнологии и в смежных научных дисциплинах. Это необходимо для  усиления инновационного потенциала Территории (региона) на основе конкурентного подхода к выбору перспективных инновационных проектов с целью обеспечения на договорной основе существенных преференций победителям инновационных конкурсов с одновременным ограничением продолжительности действия преференций.Основные понятия:Территория – Наукоград Кольцово (Новосибирская область, Новосибирский район, р.п. Кольцово) или иная территория, на которой планируется реализация мега-проекта «Долина жизни».Инновация (нововведение) — результат инновационной деятельности, получивший воплощение в виде нового или усовершенствованного продукта, внедренного на рынке, нового или усовершенствованного технологического процесса, используемого в практической деятельности,.Инновационная деятельность — это совокупность научной, технологической, организационной, финансовой и коммерческой деятельности, направленной на создание и внедрение на рынке нового или усовершенствованного продукта, создание нового или усовершенствованного технологического процесса, использованного в практической деятельности.Виды и типы  инноваций:Технологические —  деятельность, связанная как с разработкой, так и с внедрением инноваций. В частности, в промышленности — технологически новых продуктов и процессов, а также значительных технологических усовершенствований в продуктах и процессах. Технологически новый продукт — продукт, чьи технологические характеристики (функциональные признаки, конструктивное выполнение, дополнительные операции, а также состав применяемых материалов и компонентов) или предполагаемое использование принципиально новые либо существенно отличаются от аналогичных, ранее производимых продуктов.Технологически усовершенствованный продукт — это существующий продукт, для которого улучшаются качественные характеристики, повышается экономическая эффективность производства путем использования более высокоэффективных компонентов или материалов, частичного изменения одной или более технических подсистем (для комплексной продукции).Продуктовые инновации — разработка и внедрение технологически новых и технологически усовершенствованных продуктов.Процессные инновации — разработка и внедрение технологически новых или технологически значительно усовершенствованных производственных методов, включая методы передачи продуктов. Инновации такого рода могут быть основаны на использовании нового производственного оборудования, новых методов организации производственного процесса или их совокупности, а также на использовании результатов исследований и разработок. Они нацелены, как правило, на повышение эффективности производства или передачи уже существующей на предприятии продукции, но могут предназначаться также и для производства и поставки технологически новых или усовершенствованных продуктов, которые не могут быть произведены или поставлены с использованием обычных производственных методов.Инновационный потенциал разработок, предприятий и территории — измерение инновационной активностиИнновационная активность Территории  оценивается посредством суммирования следующими основными характеристиками:1) наличие инновационных организации — фирмы, имевшие в последние три года внедренные (завершенные) инновации;2) присутствие инновационно — активных организаций, осуществлявших в отчетном периоде (от одного года до трёх лет) инновационную деятельность вне зависимости от степени ее завершенности (критерий отнесения к этому типу организаций — наличие в отчетном периоде затрат на инновационную деятельность);3) любая организация или физическое лицо (индивидуальный предприниматель), планирующие принять участие в инновационной деятельности.К инновационно – активным относятся организации, которые в течение последних трех лет имели завершенные инновации, т. е. новые или значительно усовершенствованные продукты, внедренные на рынке или методы их производства, также уже внедренные на рынке, новые или значительно усовершенствованные производственные процессы, внедренные в практику.Все предполагаемые участники инновационной деятельности, желающие принять участие в осуществления мегапроекта, по запросу Управляющей компании (УК) предоставляют обоснование собственных разработок (без раскрытия конфиденциальных сведений, которые относятся к интеллектуальной собственности – см. таблицу). Дополнительно приводятся копии документов, подтверждающих  наличие заявок на изобретения  и патентов РФ, международных заявок и патентов, дипломы ярмарок, выставок, количество и финансовую значимость реализации  проданных лицензий на разработки, договоры об организации производств в других регионах РФ и за рубежом и т.д. Всем перечисленным выше характеристикам и дополнительным  параметрам коллегиально присваиваются повышающие коэффициенты. Сумма рассчитанных для каждой разработки цифровых значений определяет величину «инновационного потенциала разработки» (ИПР).  Эти величины, наряду с другими параметрами, могут служить основой для проведения конкурса на получение рабочих площадей и оборудования для завершения научных исследований и создания  опытно-промышленного регламента производства инновационной продукции.Сумма значений ИПР для всех разработок предприятия, отнесённая к среднесписочному числу сотрудников за учётный период (от одного года до трёх лет) соответствует значению «инновационного потенциала  предприятия» (ИПП). Эти величины, наряду с другими параметрами, следует использовать при распределении государственной поддержки инновационных малых и средних предприятий и при предоставлении других преференций, относящихся к инновационной деятельности..Сумма значений ИПП всех малых, средних и крупных производственных предприятий, зарегистрированных на рассматриваемой территории, включённых в инновационную деятельность, отнесённая к количеству населения, проживающего на данной территории, соответствует «инновационному потенциалу территории» (ИПТ).  Эти величины могут позволить проводить оценку динамического развития инновационной активности территории на местном и региональном уровне.  После отработки методики оценки региональных значений ИПТ, предлагаемый параметр можно пытаться использовать на федеральном уровне.Основные фрагменты создания Системы функционирования «Научного центра Долина жизни»1. Создание Управляющей компании (УК) в качестве юридического лица (ОАО. ЗАО или ООО).1.1.  Первоначальный вариант распределения долей в Уставном фонде  нового предприятия должен включать значительную резервную долю (~70%) для потенциальных инвесторов.2.  УК совместно с Администрацией Наукограда Кольцово организует сбор информации для оценки относительных значений инновационных потенциалов конкретных разработок (ИПР) и  инновационных потенциалов предприятий (ИПП), а также суммарного инновационного потенциала  территории Наукограда (ИПТ) – учитываются результаты, достигнутые предприятиями в течение определённого периода (от 1 до 3 лет).2.1. Полученные данные по величинам ИПП используются для определения относительных объёмов государственных субсидий отдельным предприятиям.2.2.  Предприятия, представившие проекты с максимальными значениями ИПР, являются потенциально первоочередными претендентами (лидеры) на размещение в опытно-промышленных (лабораторных) площадях.  Срок размещения не может превышать 3-х лет.2.3. Каждое предприятие – лидер обсуждает с УК индивидуальные условия Договора о взаимодействии, включающие перечень бесплатных услуг со стороны УК и степень её участия в использовании достигнутых результатов с официальной регистрацией совместного патентовладения, лицензионного договора и т.п. . 3.  Совместное обладание результатами предполагает, что после завершения установленного срока работы предприятия-лидера над проектом и освобождения занимаемых рабочих площадей УК в течении действия патента продолжает  поиск инвесторов для создания крупномасштабного производства и/или содействует реализации лицензий на использование разработок.3.1. Предприятие – лидер в процессе работы над одним проектом может участвовать в реализации нескольких разработок последовательно или одновременно, если новые проекты попадают в лидирующую группу  по значениям ИПР.3.2.  УК начинает свою деятельность с подготовки участия в Российской венчурной ярмарке с выдвижением коллективного проекта на основе  добровольного участия предприятий, обладающих инновационным потенциалом, с одновременной разработкой бизнес-плана  и других мероприятий, направленных на привлечение инвестиций. Возможные варианты поступления финансовых средств1. Продажа инновационной продукции, производимой предприятиями, заключившими Договор о взаимодействии:1.1. Организация новых и подключение ранее созданных региональных представительств в РФ и за рубежом.1.2. Выход на организацию продаж неисключительных лицензий и содействие в организации региональных производств инновационной продукции.2.  Технология создания Современного Отдела маркетинга (СОМ) в составе УК2.1.  Объявление набора соискателей на создание маркетинговых ячеек  (Мяч) с привлечением выпускников ВУЗов и лиц с высшим образованием (без работы или в длительном отпуске или инвалиды), закреплёния образованных ячеек за одной или несколькими фирмами — участниками мега-проекта, близких по тематике инновационной деятельности, и организация специализированного обучения участников ячеек. 2.2.  Участие в конкурсах на получение грантов.3.  Функционирование лечебно-профилактического комплекса (Здание 6) – гостиничный фрагмент с бесплатными социальными (по квотам) и платными услугами.4. Обучение и консультации потенциальных потребителей услуг.5. Создание специализированных фондов для финансирования социально значимых проектов. Пояснения: В предложенных фрагментах проекта, была сделана попытка разработать концепцию взаимоотношений участников проекта — Управляющей компании и юридических или физических лиц, обладающих инновационным потенциалом.  Из предложенной схемы взаимодействия естественным образом вытекает возможный перечень поступления средств в процессе деятельности Управляющей компании. И только после этого можно привлекать калькулятор для подсчёта млрд-ов! Таким образом, в моём послании изложена только концепция взаимоотношений основных участников проекта. Для привлечения инвесторов в такой крупный проект необходимо показать инновационный потенциал территории (ИПТ), затем в результате конкурса выявить разработки с максимальными инновационными потенциалами (ИПР). Только после этого появится  возможность приступить к реальному бизнес — проектированию (продукты, цены, затраты и т.п.) При этом предполагаем, что для инвесторов будет иметь значение  наличие обширного списка инновационных разработок, подпирающих группу с максимальными значениями ИПР. Можно предусмотреть участие инвесторов в корректировке перечня лидирующих разработок. Рассмотрим технологию оценки инновационных потенциалов более подробно. В посёлке Кольцово зарегистрировано более 400 малых и средних предприятий. Некоторые из них имеют инновационные разработки или готовы сформулировать инновационные идеи, но не могут приступить к их реализации из-за отсутствия средств. Первая задача УК  должна  сводиться к установлению их количества и составлению общего списка инновационных предприятий. Процесс должен быть открытым и всеобъемлющим. Необходимо исключить кулуарный характер составления списка  — обязательна публикация всего списка в СМИ. Для решения этой задачи требуется определение, что такое инновация? Варианты определений, применительно к направлению деятельности Биотехнопарка, были приведены выше — необходимо широкое обсуждение.  Процесс формирования списка должен иметь добровольный характер.  Движущей силой проявления инновационной активности, кроме очевидного повышения имиджа предприятия и рекламы, должны служить отчетливо сформулированные преференции со стороны УК,  местной Администрации и региональных министерств. Судя по «официальным слухам» можно ожидать налоговых послаблений со стороны Государства.Вторая задача сводится к составлению общего списка предлагаемых участниками инновационного процесса разработок и идей с кратким их описанием без раскрытия «секретных ноу-хау» и авторской оценкой значимости и ожидаемой эффективности от их реализации – «внутренний аудит».Третья задача включает проведение основного «внешнего аудита» инновационного потенциала разработки (ИПР), схему оценки которого можно представить в виде стандартного многопараметрового уравнения, типа:ИПРi = ах1 + вх2 + сх3  + …… мхn %Перечень параметров (хi) и значений соответствующих повышающих коэффициентов (а,…..м) определяется коллегиально – методику можно обсуждать. Результирующие значения  ИПРi являются основой для составления рейтинга инновационных  потенциалов  разработок. УК оказывает лидерам рейтинга ИПР содействие в разработке официальных, необходимых для инвесторов бизнес-планов.  Рассмотрим также ситуацию, когда Администрация посёлка получила субсидии, предназначенные для развития и стимулирования инновационной деятельности. Глава Администрации выходит на соответствующую депутатскую комиссию и затем на сессии предлагает скорректировать финансовый план. Легко «догадаться» о чём спросят депутаты – кому помогать, сколько и за что?Кроме рейтинга ИПР, Вы им представите результаты сопоставительных оценок инновационных потенциалов предприятий, полученных по следующей простой формуле:ИППn = (SИПРi)/N; где N – среднесписочное число сотрудников/Фирмы с наибольшими значениями ИПП должны иметь более значимые административные преференции. Если Главе администрации потребуется оценить эффективность деятельности УК или динамику развития инновационного потенциала на вверенной территории можно обойтись простым суммированием значений ИППn  для всех  зарегистрированных предприятий. Обоснование технического задания на проектирование – фрагментыОбоснование представляет собой краткое описание  проекта, составленное с учётом перечня потенциальных разработок, приведенных в таблице. По мере дальнейшего заполнения данной таблицы («портфеля» инновационных разработок), а также после обсуждения с участниками мегапроекта, предлагаемое Техническое задание может быть изменено существенным образом.Фрагменты технического задания на предварительную проектную разработку проекта «Долина жизни».Здание 1 – Главный корпус (5-этажей), состав помещений: конференц-зал, гостиница на 40 номеров, учебные классы, кабинеты, Множительная техника, кафе.Решаемые задачи:Общее управление  проектом администрация проекта, бухгалтерия, отдел маркетинга (организация реализации производимой в рамках проекта продукции, лицензий и разработанных технологий), курсы повышения квалификации и подготовки специалистов в области косметологии, бальнеологии, лечебного питания и т.д. Размещение курсантов, проведение конференций, совещаний, семинаров, праздников, банкетов.ЗАТРАТЫ НА СТРОИТЕЛЬСТВО (с учётом подготовительных работ) 526 млн. руб.Здание 2 – Лабораториямазевых форм (2 этажа по 150 м2): 1 этаж – склады сырья и готовой продукции по 36 м2; 2 этаж – производство + офисы + кабинеты + санитарно-бытовые помещения. Предусмотреть лёгкие грузовые лифты.Решаемые задачи: Производство и наработка опытных партий косметических и лечебно-профилактических средств, разработка новых составов и технологических процессов.ЗАТРАТЫ НА СТРОИТЕЛЬСТВО (с учётом подготовительных работ) 21.6 млн. руб.Здание 3 – Лаборатория порошковых композиций (2 этажа по 150 м2):  1 этаж – 5 мельниц ( 5 комнат по 18 м2, стол + сушильный шкаф + стеллаж в каждой комнате)2 этаж – склад сырья и готовой продукции по 36 м2. Предусмотреть лёгкие грузовые лифты.Решаемые задачи:Производство и наработка опытных партий бальнеологическиж и сухих косметических и лечебно-профилактических средств, разработка новых составов и технологических процессов.ЗАТРАТЫ НА СТРОИТЕЛЬСТВО (с учётом подготовительных работ) 21.6 млн. руб.Данный фрагмент Технического задания представлен на XII Российской ярмарке в виде отдельного проекта «Осмос в бальнеологии и косметологии. Эффективные профилактические средства». Реализация проекта представляет  первый шаг в создании мега-проекта «Долина жизни».Здание 4 – Лаборатория продуктов для функционального питания – 1 эт. 400 м2Склад ЛВЖ 50-60 м2Решаемые задачи:Производство и наработка опытных партий лечебно-профилактических нативных продуктов для функционального питания, разработка новых составов и технологических процессов.ЗАТРАТЫ НА СТРОИТЕЛЬСТВО (с учётом подготовительных работ) 24.0 млн. руб.Здание 5 – Цех по производству кормовых добавок – 1 этаж 400 м2.Решаемые задачи:Производство и наработка опытных партий лечебно-профилактических кормовых добавок для животных, разработка составов и технологических процессов.ЗАТРАТЫ НА СТРОИТЕЛЬСТВО (с учётом подготовительных работ) 28.5 млн. руб.Здание 6 – Корпус для физиотерапии и бальнеологии -2 этажа.1 этаж- помещение для приема ванн – 10 комнат по 18 м2 (3х6)2 этаж – физиотерапевтическая исследовательская лаборатория + 20 номеров для приезжающих. Предусмотреть соединение с главным корпусом теплым переходом.Решаемые задачи:Проведение лечебно- профилактических процедур (бальнекология, СПА — обёртываний,  косметических процедур), направленных на повышение жизненных функций человека. Проведение предварительных испытаний новой продукции.ЗАТРАТЫ НА СТРОИТЕЛЬСТВО (с учётом подготовительных работ) 108.5 млн. руб.Здание 7 – Исследовательский лабораторный корпус –Чистые и грязные зоны.2 комнаты по 36 м2 – лаборатории для физических исследований.Склады- 2 по 36 м2 + склад ЛВЖ.Решаемые задачи:Проведение лабораторных исследований, разработка новой продукции, лабораторных методик контроля качества и производства продукции.ЗАТРАТЫ НА СТРОИТЕЛЬСТВО (с учётом подготовительных работ) 70.2 млн. руб.Здание 8 – Здание для электронного ускорителя – 3 этажа по 150 м2Решаемые задачи:Производство геля полиэтиленоксида по технологии НЗХК, обеспечение медицинских учреждений и участников Биотехнопарка «Кольцово» в стерилизации инструментов и материалов, а также для осуществления некоторых технологических процессов.  Возможно использование ускорителя для увеличения сроков хранения сельскохозяйственной продукции (овощи, фрукты и т.д.)ЗАТРАТЫ НА СТРОИТЕЛЬСТВО (с учётом подготовительных работ) 60.0 млн. руб.При наличии договорённости с фирмой СВМ Фарм. о совместном использовании электронных ускорителей  затраты на строительство этого объекта не потребуются.Общие затраты на строительство опытно-промышленных корпусов составляет ~1.0 -1.065 млрд. руб.ПОЛНАЯ ОРИЕНТИРОВОЧНАЯ СТОИМОСТЬ ПРОЕКТА  составляет ~ 3 млрд. руб. (~$100 млн.)ВОЗМОЖНЫЕ ВАРИАНТЫ РЕАЛИЗАЦИИ МЕГА-ПРОЕКТАНа наш взгляд, существуют три основных варианта реализации сотрудничества:1. Вариант «Шаг за шагом»- Инвестор делает выбор наиболее перспективных направлений предлагаемых разработок. — По каждому направлению стороны подписывают договор о неразглашении конфиденциальной информации. — Инвестор и Разработчик подписывают Протокол о намерениях с включением пункта о составлении заявки на международное патентование.- Разработчик организует подготовку заявки на международное патентование.- Разработчик организует разработку бизнес-плана и проводит оценку инвестиций, требуемых для осуществления проекта.- Инвестор и Разработчик создают совместное предприятие и приступают к реализации проекта.Аналогичная последовательность действий осуществляется по каждому из выбранных перспективных направлений.2. Вариант  «Повышение статуса разработок»- Инвестор финансирует создание специализированной научной опытно-промышленной лаборатории для развития исследований по проектам, предлагаемым разработчиком. Данный вариант может предшествовать реализации следующего варианта.3. Вариант «Долина жизни — центр и веерное развитие»- Инвестор и Разработчик договариваются о создании «Центра повышения жизненных функций человека» в качестве основы глобального проекта с условным названием «Долина жизни» (аналог «Силиконовой долины» в США). На начальном этапе в основу деятельности Центра могут быть положены представленные выше направления исследований и разработок.- Разработчик представляет, обсуждает и согласовывает с Инвестором поэтапный план создания и развития проекта.Основные стартовые проблемы инновационных фирм.1- отсутствие опыта ведения переговоров по продаже лицензий на инновационные разработки;2- отсутствие возможности привлечения специалистов, способных освоить и реализовать принятый маркетинговый план;3- отсутствие оборотных средств;4- отсутствие каких-либо преференций в СМИ (как на региональном, так и на областном уровне), позволяющих ослабить финансовую «удавку» рекламистов.Возможные пути их решения:1. создание реестра инновационных проектов и (при необходимости) организация персональные консультации с профессионалами;2. при отсутствии профессионалов, объявить конкурс на создание 2 или 3 маркетинговых мини-групп (2-3 молодых специалиста), обеспечить их рабочими местами, оборудованием, провести специальное обучение по выбранным инновационным проектам (всё бесплатно!) и обеспечить минимальной зарплатой; окончательная оплата может иметь премиальный характер по результатам деятельности группы;3. нужны активно работающие фонды для продвижения инноваций;4. местные, районные, областные и федеральные  органы власти могут создать систему, когда каждое СМИ в обязательном порядке будет освещать инновационную деятельность предприятий на соответствующих территориальных образованиях.Аналогичные или иные соображения могут быть представлены другими участниками инновационного процесса  – потенциальными резидентами Биотехнопарка и/или Биофармкластера и/или «Научного центра Долина жизни» (НЦ «Долина жизни»).Вопросы к разделу 15 по аналогии с явно фантастическим разделом 7 (Мэй Хуа Лу) отсутствуют и не потому, что в силу фантазийности текста у автора нет ответа на возможные вопросы. Есть смысл обсуждать детали создания проекта «Инновационной деревни» только с потенциальными инвесторами  создания подобной «деревни».Однако, недавно СМИ познакомили нас с эффективной работой Агентства стратегических исследований. Если, удастся выяснить, что эти сообщения не являются примитивной рекламой, то я запланирую передать Агентству экземпляр книги. Аналогичным образом, для сведений об имеющихся в р.п. Кольцово возможностях реализации десятка проектов, экземпляры книги будут переданы руководителям Администраций Кольцово и Новосибирской области. Молитва пожилого человека — и не только…(вместо послесловия)Моя хорошая знакомая Наташа Мензорова — соратник в путешествиях по нашей таёжно-горной стране, прислала этот документ в день моего рождения.  Молитва так «легла мне на душу», что, являясь человеком абсолютно не религиозным, я решил опубликовать её в  качестве Послесловия.           Запись от священника Константина Пархоменко. «От своего старшего друга, петербургского фотографа Владимира Меклера, получил интересное письмо. Думаю, что импровизированная молитва будет интересна и кому-то из наших читателей. Сам Владимир Михайлович, которому почти 70, добавляет ее к своему молитвенному правилу.МОЛИТВА ПОЖИЛОГО ЧЕЛОВЕКАЭта молитва висит на стене в квартире Алексея Германа. Ему она досталась в наследство от отца. Юрию Герману, в свою очередь, её прислал писатель и учёный Даниил Данин, который нашёл эту молитву в одном из английских журналов. Теперь она висит и у меня на стене. Это моё настроение, мои чувства в данный момент жизни. Я думаю, что она не только для пожилых людей…«Господи, Ты знаешь лучше меня, что я скоро состарюсь.
Удержи меня от рокового обыкновения думать, что я обязан по любому поводу что-то сказать…
Спаси меня от стремления вмешиваться в дела каждого, чтобы что-то улучшить.Пусть я буду размышляющим, но не занудой. Полезным, но не деспотом.Охрани меня от соблазна детально излагать бесконечные подробности.Дай мне крылья, чтобы я в немощи достигал цели.Опечатай мои уста, если я хочу повести речь о болезнях.
Их становится все больше, а удовольствие без конца рассказывать о них – все слаще.
Не осмеливаюсь просить Тебя,  улучшить мою память, но приумножь мое человеколюбие, усмири мою самоуверенность, когда случится моей памятливости столкнуться с памятью других. Об одном прошу, Господи, не щади меня, когда у Тебя будет случай преподать мне блистательный урок, доказав, что и я могу ошибаться…Если я умел бывать радушным, сбереги во мне эту способность.
Право, я не собираюсь превращаться в святого: иные из них не выносимы в близком общении. Однако и люди кислого нрава – вершинные творения самого дьявола.
 Научи меня открывать хорошее там, где его не ждут, и распознавать неожиданные таланты в других людях».Вот такие Божьи постулаты я примерил и понял, что все они написаны точно для меня.  Как говорится,  будто что-то приоткрылось, и многое стало ясным и определённым. Мне необходимо извиниться  и в какой-то мере оправдаться перед читателями, так как учебник, не смотря на обилие материала, не следует рассматривать в качестве иллюстрации первого положения молитвы «по любому поводу что-то сказать». Повод один, но с множеством вопросов и оттенков. Надеюсь, вы понимаете, что я не вмешиваюсь «в дела каждого, чтобы что-то улучшить», а рассматриваете предлагаемые проекты и правила как возможные направления исследований и советы для поддержания естественной красоты и здоровья. Но человек свободен и вправе поступать, так как ему хочется. Тешу себя надеждой, что материал учебника достаточно трудный (как всё новое и непривычное), излагается не занудливо, и в нём,  не проглядывают элементы деспотизма. Только советы, подтверждаемые соответствующими экспериментами. И так далее можно продолжать по всем положениям замечательной молитвы. Даже в семье не нагружаю родных и друзей этими проблемами. Первоначально собираюсь издать учебное пособие самостоятельно микро — тиражом  для моих внуков и окружающих друзей, как памятку (правда, очень объёмную). Любому из заинтересованных читателей будет представлена возможность получить электронный вариант книги (ищу исполнителей с одновременным созданием специального сайта) или заказать её непосредственно в издательстве.  ПРИЛОЖЕНИЯПРИЛОЖЕНИЕ 1. Список научных трудов

№ п/п Название научного сообщения Издательство, журнал (номер, год) или номер авторского свидетельства Фамилии соавторов
1 Реакции полиалкилзамещённых ароматических соединений. II.Взаимодействие декаметил-и-2,3,4,5,6-пентаметилбифенилов с комплексом хлорангидрида карбаминовой кислоты и хлористого алюминия. ЖорХ, 1968, т.4, с.1639-1643 Мокроусов Б.И., Коптюг В.А.
2 III.Сопоставление относительной реакционной способности ацилирующих агентов при реакциях замещения водорода и метильной группы в ароматическом ядре. Изв. СО АН СССР, 1969, т.14, № 6, с.88-92 Коптюг В.А.
3 Получение галоидпентаметилциклогексадиен-2,5-онов и генерация 1-галоид-4-окси-1,2,3,5,6-пентаметилбензолониевых ионов. ЖорХ, 1971, т.7, с.2575-2582 Коптюг В.А.
4 Взаимодействие гексаметилбензола с SO3 в HSO3F. Модель промежуточного соединения реакции сульфирования ароматических соединений. ЖорХ, 1972, т.8, с.2158-2162 Коптюг В.А.
5 Взаимодействие пентаметилфенола и гексаметилбензола с азотной кислотой во фторсульфоновой кислоте. ЖорХ, 1972, т.8, с.2215-2219 Коптюг В.А.
6 О строении иона, образующегося при взаимодействии гексаметилбензола с нитрующими агентами в сильнокислых средах. Изв. АН СССР, серия Химия, 1973, № 10, с.2337 Маматюк В.И.
7 Взаимодействие полиалкилбензолов с нитрующими агентами в HSO3F. Изв. АН СССР, серия Химия, 1973, № 9, с.2163-2164 Маматюк В.И., Коптюг В.А.
8 Спектры ЯМР-13С I-X-гексаметил-и I-X-4-оксипентаметилбензолониевых ионов. ЖорХ, 1973, т.9, с.2429-2430 Маматюк В.И., Резвухин А.И., Бураев В.И.,

Исаев И.С.,

Коптюг В.А.

9 Способ получения пентаметилнитробензола. №425903

Бюллетень изобретений и открытий, 1974, № 6

Коптюг В.А.
10 Нитрование пентаметилбензола в HSO3F. Тезисы Всесоюзного совещания по проблеме «Механизмы гетеролитических реакций». Ленинград, 1974. Коптюг В.А.
11 О механизме миграции нитро- и сульфогрупп в перегруппировках с участием аренониевых ионов. ЖорХ, 1974, т.10, с.2487-2493 Маматюк В.И.,

Дерендяев Б.Г.,

Коптюг В.А.

12 Взаимодействие нитрующих агентов с полиметилбензолами. Тезисы V Всесоюзного совещания по химии нитросоединений. Москва, 1974, с.37. Малыхин Е.В.
13 Реакция пентаметиланизола и пентаметилфенола с электрофильными агентами в HSO3F. ЖорХ, 1974, т.10, с.2374-2381. Осташевская Л.А., Маматюк В.И., Исаев И.С.,

Коптюг В.А.

14 Дипротонирование метилированных бифенилов в системе HSO3F-SbF5. ЖорХ, 1974, т.10. Маматюк В.И.,

Коптюг В.А.

15 Анализ спектров углеродного и протонного магнитного резонанса метилбензолониевых ионов. ЖорХ, 1976, т.12, с.739-748. Маматюк В.И.,

Коптюг В.А.

16 Механизм и кинетические характеристики вырожденной перегруппировки 1-бром-1,2,3,4,5,6-гексаметилбензолониевого иона. ЖорХ, 1976, т.12, с.610-615 Маматюк В.И.,

Дерендяев Б.Г.,

Коптюг В.А.

17 Взаимодействие полиметилированных ароматических соединений с электрофильными реагентами. Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук, Новосибирск, 1976.
18 Установление строения полиметилированных циклогексадиенов методом ПМР с применением реагента сдвига. Изв. СО АН СССР, 1977, вып.1, с.94-98. Шакиров М.М.,

Коптюг В.А.

19 Превращения пентаметилбензола при действии нитрующих агентов в HSO3F. ЖОрХ, 1977, т.13, с.130-144. Маматюк В.И., Коптюг В.А.
20 Аренониевые ионы, соответствующие присоединению катиона нитрония к полиметилированным ароматическим соединениям. Тезисы VI Всесоюзного совещания по химии нитросоединений. Москва, 1977, с.147-148. Панова Е.Б., Малыхин Е.В.
21 Превращение пентаметилфенола в 2,3,4,6,7-пентаметилтропон. Изв. АН СССР, серия Химия, 1978, № 9, с.2188-2189. Салахутдинов Н.Ф., Коробейничева И.К., Коптюг В.А.
22 Взаимодействие фенолов с кислотами Льюиса. XIII.Превращение полиметилированных фенолов в 2,3,4,6,7-пентаметилтропон. ЖорХ, 1979, т.15, с.1468-1472. Салахутдинов Н.Ф., Коробейничева И.К., Коптюг В.А.
23 Появление кислородной функции у кольцевого атома углерода при взаимодействии полиметилароматических соединений с нитрующими агентами. ЖорХ, 1979, т.15, с.1887-1894. Сидорова Н.В., Панова Е.Б., Малыхин Е.В., Шакиров М.М.
24 Ориентация в реакциях электрофильного замещения ароматических соединений. Гидрооксилирование толуола. Тезисы Всесоюзной конференции «Развитие органического синтеза на основе изучения общих закономерностей и механизмов реакций органической химии». Ленинград, 1980. Рогожникова О.Ю.,

Коптюг В.А.

25 Новый путь синтетического использования полиметилированных фенолов. Тезисы Всесоюзной конференции «Развитие органического синтеза на основе изучения общих закономерностей и механизмов реакций органической химии». Ленинград, 1980. Салахутдинов Н.Ф., Коптюг В.А.
26 Количественное описание реакций ароматических соединений с электрофильными агентами. I.Электрофильное гидроксилирование метилбензолов. ЖорХ, 1981, т.17, с.1345-1357. Коптюг В.А., Рогожникова О.Ю.
27 Об ориетации в реакции метилирования ароматических соединений. Тезисы докладов III Всесоюзного семинара по органическому синтезу «Теоретические и прикладные аспекты химии ароматических соединений». Москва, 1981. Ким Э.Б.
28 Генерирование, электронное строение и превращение катион-радикала пентаметилнитробензола. Тезисы докладов III Всесоюзного семинара по органическому синтезу «Теоретические и прикладные аспекты химии ароматических соединений». Москва, 1981. Ефремова Н.В., Стариченко В.Ф.
29 Количественное описание распределения изомеров, образующихся в реакциях замещенных бензолов с электрофильными реагентами. Изв. АН СССР, серия Химия, 1981, № 6, с.1297-1300. Коптюг В.А., Рогожникова О.Ю.
30 Пример перегруппировки иона бензильного типа в соединение тропонового ряда. ЖОрХ, 1981, т.17,

№ 7, с.1474.

Салахутдинов Н.Ф.,

Коптюг В.А.

31 Катион-радикалы метилзамещенных нитробензолов. ЖорХ, 1982, т.18, №1, с.105-114. Руденко А.П., Черемисин А.А., Стариченко В.Ф., Зарубин М.Я.
32 Новый тип превращений ароматических нитросоединений в HSO3F. ЖорХ, 1982, т.18, №5, с.1120-1121. Ефремова Н.В., Стариченко В.Ф.
33 Количественное описание реакций ароматических соединений с электрофильными реагентами. II.Аддитивная схема расчета потенциалов ионизации замещенных бензолов. ЖорХ, 1982, т.18, №10, с.2017-2020. Коптюг В.А., Рогожникова О.Ю.
34 Количественное описание реакций ароматических соединений с электрофильными реагентами. III.Нитрование производных бензола. ЖОрХ, 1983, т.19,

№ 6, 1129-1141.

Коптюг В.А., Рогожникова О.Ю.
35 Катион-радикалы метилзамещенных бензонитрилов. ЖОрХ, 1983, т.19,

№ 9, с.1910-1919

РуденкоА.П., Черемисин А.А., Щеголева Л.Н., Зарубин М.Я.
36 Количественное описание реакций ароматических соединений с электрофильными реагентами. IV.Гиперболический характер зависимости логарифмов относительных констант скорости бромирования производных бензола от сигма+-констант заместителей. ЖОрХ, 1983, т.19. Коптюг В.А., Салахутдинов Н.Ф.
37 Зависимость электронных эффектов заместителей при электрохимическом окислении бензолониевых ионов от характера высшей занятой молекулярной орбитали. ЖОрХ, 1983, т.19,

№ 9, с.1924-1930

Сидорова Н.В., Майнагашев И.Я., Зелинский А.Г., Коптюг В.А.
38 Количественные соотношения между жирными кислотами, входящими в состав липидов вирусов и клеток. Вопросы вирусологии, 1989, № 5, с.614-617 Кондрахин Ю.В.
39 Белковые гидролизаты в качестве основы питательных сред. Москва, ВНИИСЭНТИ Минмедпрома СССР, 1985. Бачинский А.Г., Байбаков В.И.
40 Способ определения ростовой характеристики питательных сред  для клеточных культур. Авторское свидетельство № 1425542, 1986 Распопина Г.И., Бачинский А.Г.,

Кондрахин Ю.В.

41 Способ оценки качества питательной среды, используемой для культивирования клеток млекопитающих. Авторское свидетельство № 1566723, 1988. Богрянцева М.П., Кондрахин Ю.В., Мартынец Л.Д., Бураев В.И.
42 Перспективы применения антиоксидантов в биотехнологии тканевых культур. ВНИИСЭНТИ. Производство и применение продуктов микробиологических производств. Москва, 1988. Богрянцева М.П.
43 Оценка склонности липидов к перекисному окислению при неблагоприятных воздействиях на организм. Вопросы мед. химии, 1990, № 3, с.18-20. Бачинский А.Г.
44 Концентрационные зависимости влияния микроэлементов на клеточную пролиферацию. Тезисы докладов Всесоюзной конференции «Питательные среды и сыворотки для культивирования клеток». Кольцово, Новосибирская область, 1991. Трошкова Г.П., Мартынец Л.Д., Кондрахин Ю.В.
45 Использование спектрофотометрического метода для оценки качества питательных сред при их стерилизации и хранении. Тезисы докладов Всесоюзной конференции «Питательные среды и сыворотки для культивирования клеток». Кольцово, Новосибирская область, 1991. Богрянцева М.П.
46. Уровень карбонильных соединений в питательной среде при культивировании клеток животных. Биотехнология, 1991, № 1, с.75-79. Распопина Г.И., Мартынец Л.Д., Колокольцова Т.Д.,

Кондрахин Ю.В., Бачинский А.Г.

47 Определение ростовой активности суспензионных питательных сред в микроферментерах. Биотехнология, 1991, № 2, с.91-92. Мартынец Л.Д., Гайнуллина М.Н., Шкера А.М.
48 Природные консервирующие добавки. Тезисы докладов II Международной конференции «Биологически активные вещества и новые продукты в косметике». Москва, 1997, с.16. Бачинский А.Г., Вязовая Е.А., Селиванов Б.А.
49 Обоснование подходов к конструированию косметических препаратов. Косметика и Медицина, 1997,

№ 1, с.5-6

50 Подходы к расчету питательной ценности косметических средств. Тезисы докладов III Международной конференции «Биологически активные вещества и новые продукты в косметике». Москва, 1998, с.38. Бондаренко К.В.
51 Регенерирующие композиции, содержащие сперму животных. Косметика и Медицина, 1998,

№ 5, с.43-49.

52 Подходы к расчету питательной ценности косметических композиций. Косметика и Медицина, 1998,

№ 6, с.46-53

Бондаренко К.В.
53 Опасность, связанная с передозировкой питательных компонентов косметических средств. Тезисы докладов IV Международной конференции «Косметические средства и сырьё: безопасность и эффективность». Москва, 1999, с.37. Трошкова Г.П., Мартынец Л.Д.
54 The nutrient Value of cosmetic compositions. SÖFW Journal, 2000, №1-2, s.25-28. Bondarenko K., Troshkova G., Martinets L.,

Kirova E.

55 Теория мягких косметологических воздействий. Современная косметология. Новосибирск , ГУП РПО СО РАСХН, 2001.
56. Способ получения пеномоющего средства. Патент РФ №2044539, 30.09.92, Б.И. №27, 1995.
57 Способ получения косметического средства для ухода за кожей на основе полиэтиленоксида. Патент РФ №2072834, 24.03.93.
58 Средство ухода за кожей. Патент РФ №2089177, 03.02.94, Б.И. №25, 1997. Зиновьев В.В., Попова С.Р.,

Малыгин Э.Г.,

Сандахчиев Л.С.

59 Способ получения косметического средства для ухода за кожей. Патент РФ №2088211, 28.05.96. Кислых В.И.
60 Косметическое средство для ухода за кожей. Патент РФ №2085185, 17.04.96.
61 Способ ухода за кожей. Патент РФ №2082393, 12.03.96. Шорина Г.Н.,

Архипов С.А.

62 Способ получения косметического средства в виде эмульсии. Патент РФ №2126247, 26.06.98.
63 Косметическая очистительная маска для ухода за кожей лица. Патент РФ №2110985, 26.08.97.
64 Лечебно-косметическое средство. Патент РФ №2135153, 28.01.99.
65 Способ получения косметического крема для защиты кожи. Патент РФ №2106858, 13.05.97. Родионов В.И., Мистюрин Ю.Н., Симонова Л.Г., Криворучко О.П., Михайленко Е.Л.
66 Косметический марикрем для ухода за кожей. Патент РФ №2110984, 28.08.97. Родионов В.И., Селиванов Б.А., Мензорова Н.И., Рассказов В.А.
67 Бальзам для ухода за волосами и кожей головы. Патент РФ №2120276, 17.02.98. Родионов В.И.
68 Зимний косметический крем для  защиты кожи. Патент РФ №2120272, 18.02.98.

Б.И. №14, 1998.

Селиванов Б.А.
69 Крем для защиты кожи «Осенний». Патент РФ №2110251, 21.08.97. Селиванов Б.А.,

Попова С.Р.

70 Молодёжное косметическое средство для кожи лица. Патент РФ №2124350, 14.05.98. Селиванов Б.А.
71 Биоцидное средство для косметических изделий. Патент РФ №2135155, 25.12.98. Селиванов Б.А.
72 Способ обработки глицерина. Патент РФ №2133730, 27.10.98. Попова С.Р., Зиновьев В.В., Маматюк В.И., Нужилов Е., Поляков В.А., Селиванов Б.А.
73 Детский масляный бальзам «Кладовая солнца». Патент РФ №2136264, 16.12.98.
74 Биологически активная добавка для получения косметических средств и косметический крем на её основе «Медовая роса». Патент РФ №2129858, 08.09.98. Бачинский А.Г.
75 Косметическая очистительная маска

«Леда-плюс».

Патент РФ №2120273, 18.02.98.
76 Косметический марикрем на основе ДНК «Афродита». Патент РФ №2120274, 24.02.98. Татьков С.И., Сиволобова Г.Ф., Серпинский О.И.,

Бачинский А.Г.

77 Косметичесикй крем для профилактики грибковых поражений кожи «Рада-плюс» Патент РФ №2118152, 11.02.98. Музыченко Л.М., Казаринова Н.В., Бачинский А.Г., Родионов В.И., Селиванов Б.А., Шургая А.М.,

Кузнецова И.Ю.

78 Косметический суперкрем для ухода за кожей. Патент РФ №2139039, 10.03.99.
79 Средство для ухода за внутренней поверхностью обуви. Патент РФ №2125892, 27.05.98. Казаринова Н.В., Селиванов Б.А.
80 Косметическое средство для ухода за кожей «Дидилия». Патент РФ №2140256, 23.02.99. Калупахин А.П.
81 Косметическая очистительная маска для ухода за кожей «Беловодье». Патент РФ №2141311, 13.04.99. Захарова О.Е.
82 Способ получения регенерирующего косметического крема для ухода за кожей «Утренняя заря». Патент РФ №2144815, 15.09.99. Вязовая Е.А., Бачинский А.Г.
83 Регенерирующее косметическое средство для ухода за кожей на основе развивающихся эмбрионов животных. Патент РФ №2142783, 16.07.99. Бачинский А.Г., Голубев В.В.
84 Способ ухода за кожей лица. Патент РФ №2142786, 20.07.99. Шорина Г.Н.,

Архипов С.А.,

Мистюрин Ю.Н.

85 Сухая косметическая маска для ухода за кожей. Патент РФ №2142787, 20.07.99. Бачинский А.Г.
86. Способ проведения бальнеологических процедур. Патент РФ №2145836, 30.09.99. Шорина Г.Н.,

Архипов С.А.

87 Косметическое средство для губ. Патент РФ №2159608 Колокольцов А.А., Гурьев В.П., Селиванов Б.А., Мистюрин Ю.Н.
88 Способ получения набора для косметического массажа «тепло-холод». Заявка на патент от 23.07.98. Селиванов Б.А., Трошкова Г.П., Богрянцева М.П., Мазуркова Н.А.
89 Способ получения и применения композиции в косметике и бальнеологии. Заявка на патент от 21.06.99.
90 Способ получения и применения пищевой, или фармацевтической, или бальнеологической, или косметической рецептуры. Заявка на патент от 11.05.2000 г. Сироткина Т.Б.
91 Косметическое марисредство для ухода за кожей. Заявка на патент от 2.11.2000 г. Кравченко В.В.,

Ковалев Н.Н.

92 Regenerating cream compositions: Gonads of hydrobionts as bioactive additives to cosmetic preparations SÖFW Journal, 2001, №1-2, (127), s.23-26. Кравченко В.В.,

Ковалев Н.Н.

93 Способ получения пеномоющего средства Патент РФ №2163799, 10.03.01.
94 Живая косметика для умных –основные принципы выбора косметических срелдств Новосибирск, 1997 г.
94 Путеводитель по косметике Первое издание,  ГУП РПО СО РАСХН, Новосибирск 2003 г. Коллектив составителей
95 Путеводитель по косметике Второе издание, ГУП РПО СО РАСХН, Новосибирск 2004 г. Коллектив составителей
96 Синдром пигмеев – научно-фантастический детектив глазами косметолога Новосибирск, 1999 г.
97 Путеводитель по косметике Третье издание,  ООО «Диамант»,

Новосибирск , 2005 г

Коллектив составителей
98 Путеводитель по косметике Четвёртое издание,  ООО «Диамант»,

Новосибирск , 2008 г

Коллектив составителей

 

ПРИЛОЖЕНИЕ 2. Перечень наград продукции  (1994-2003 г.г.)Несколько лет назад уважаемый мной представитель Администрации Новосибирской области Ивлев Борис Иванович, оценивая моё многолетнее «кувыркание» в малом инновационном бизнесе, на одном из многочисленных совещаний произнёс следующую фразу: «Децина может делать хорошие разработки, но абсолютно не умеет продавать!». Эта ёмкая характеристика моих «способностей» была абсолютно точной. Мы были лидерами в разработках. Неоднократное участие в выставках, ярмарках разного уровня подтвердило высокую конкурентоспособность и качество наших косметических препаратов. Привожу выдержку из информационного листка нынешнего директора ООО «Живая косметика Сибири» Ерковой Инны Николаевны:1994 г. — Международная выставка-ярмарка «Малый бизнес-94». Золотая медаль за лучшую организацию экспозиционного места, высокое качество представленного товара, выставочный профессионализм. Кремовые композиции «Ариадна», «Энния», «Даная «, «Волна золотистая» отмечены Большой золотой медалью.1995 г. — Конкурс «Сибпарфюм-95» в рамках Сибирской ярмарки. Вручена Большая золотая медаль за биокосметические наборы «Рябинушка», «Синильга», «Клеопатра».1996 г. — Конкурс «Сибпарфюм-96» . Большая золотая медаль за научный подход к разработке состава косметической продукции, обновление ассортимента и современный дизайн первичной упаковки. Отмечен крем после бритья «Арго», кремовый набор «Рябинушка» и вся серия препаратов для профилактики молодежной угревой сыпи.1996 г. — Малая золотая медаль Кемеровской ярмарки — за разработку уникальных косметических средств на основе природных натуральных компонентов, за заботу о потребителе. Отмечены кремы «Ариадна», «Энния», «Даная», «Волна золотистая», «Золотое Руно», «Клеопатра».1997 г. — Конкурс «Сибпарфюм-97». Золотая медаль за научно-обоснованный подход и разработку новых косметических средств для женщин после 40 лет. Отмечены кремы: набор «Златогорушка», крем для век «Лучистый», очистительная крем-маска «Беловодье» и десять элитных кремовых композиций усиленного действия.В 1997 г. в рамках конкурса «За лучшее развитие бизнеса в Сибири» предприятие получило официальный статус «Надежный партнер».1998 г. — За высокое качество выпускаемой продукции предприятие награждено медалью Международной выставки-ярмарки «Жемчужина-98» (Сочи).1999 г. — I конкурс «Парфюмерно-косметические препараты ХХI века». По результатам конкурса НПЦ «Сибирская природная косметика» была вручена Большая золотая медаль «Сибирской ярмарки» (кремы «Мерцание», «Сияние», «Лучистый»). Малую золотую медаль получили сотрудники НПО «Вектор» и НПЦ «Сибирская природная косметика» за создание кремов, включающих коллагеназу дальневосточных крабов («Ариадна» и «Веснянка»).2000 г. — II конкурс «Парфюмерно-косметические препараты ХХI века» — за оригинальность, научную обоснованность присуждена Большая золотая медаль «Сибирской ярмарки» очистительной маске «Беловодье».2003 г. – Фирма  награждена  Дипломом лауреата Конкурса продукции, услуг и технологий “НОВОСИБИРСКАЯ МАРКА” в номинации “Лучшая продукция для женщин”.Должен отметить, что представленный выше «иконостас» не является «благоприобретённым», то есть — купленным. Это могут подтвердить те, кто меня хотя бы немного знает. Да и средств у нас на такую «куплю-продажу» как не было, так и нет. Большая часть перечисленных препаратов — медалистов небольшими партиями сегодня производится указанным малым предприятием. Что же касается продаж, то, судя по имеющейся у меня достаточно надёжной информации, необходимо признать, что, к сожалению, наши «орденоносные» разработки не шагают по России «семимильными шагами». С момента разработок и получения наград прошли годы. Сколько же нужно времени, чтобы качественная продукция составила реальную конкуренцию косметологическим пустышкам и откровенно токсичным поделкам? В чем же дело – неужели и здесь мы имеем дело с «неумением продавать»? Следует отметить, что к приведенной выше характеристике моих «способностей» друзья и близкие знакомые могут добавить ещё один штрих – настойчивость и упорство, возможно, иногда перерастающие (прошу простить меня!) в настырность. Спустя некоторое время (решение проблем личного характера) создано новое предприятие ООО «Лаборатория НКО», сформулированы подходы к решению некоторых проблем косметологии, бальнеологии и профилактической медицины. Некоторые из разработок (описание проектов «Персональная косметика» и Естественная гормональная заместительная терапия») опубликованы в сборнике «Научный и промышленный потенциал Сибири», Новосибирск, 2004, с 295. Они легли в основу двух весьма перспективных направлений деятельности:1. Организация производства высокоэффективных косметических средств серии «Активаторы клеточных систем (стволовых) клеток кожи».  Мы выиграли  грант (1 млн. руб.) в конкурсе программы «СТАРТ-09» Фонда поддержки малых предприятий в научно-технической сфере – номинация «биотехнология для медицины». Исследования завершены,  разработана и реализована технология производства препаратов серии НКО-АКС с максимальным объёмом производства около 1 млн. наборов в год. Получен Золотой диплом III Сибирской венчурной ярмарки в номинации «Перспективный бизнес» (Новосибирск, 2009 г). Осуществлена сертификация продукции, выстраивается система продаж.2. Организация производства концентратов бальнеологических ванн, обладающих противовирусным, детоксикационным и антистрессовым действием . По результатам разработок получен патент РФ 32416416 от 19 января 2010 г и зарегистрирована международная заявка; приоритет от 17 января 2011 г. Проект с общим названием «Новая бальнеология – настоящее и будущее профилактической медицины» получил специальный диплом  V Сибирской венчурной ярмарки в номинации «Симпатия Российской ассоциации прямого и венчурного инвестирования» (Новосибирск, 2011 г). В процессе испытаний выяснилось, что препараты могут быть использованы  для снятия бытовых и производственных интоксикаций, похмельного синдрома. Врачу — наркологу удалось однажды вывести пациента из состояния алкогольного психоза. При психологической установке на полный отказ от наркотиков опиатной группы наблюдалось облегчение состояния абстиненции. Ванны способствуют   снятию стрессовых состояний и улучшению сна. Осуществлена сертификация продукции в качестве косметических средств. Испытания нужно продолжать.

 

ПРИЛОЖЕНИЕ 3. Перечень интересов автора — направлений исследований, требующих своего продолжения.

п/п

Направления и краткая характеристика разработок Примечания
1 Косметология
1.1 Организация производства высокоэффективных косметических средств серии «Активаторы стволовых клеток кожи». Имеется подробное обоснование проекта с целью создания современного производства косметических средств, не имеющих аналогов в мире. Выпускаются опытные партии, осуществлена сертификация, выстраивается система продаж.

ООО «Лаборатория НКО»

 

Выигран грант (1 млн. руб.) в конкурсе программы «СТАРТ-09» Фонда поддержки малых предприятий в научно-технической сфере – номинация «биотехнология для медицины». Исследования завершены,  разработана и реализована технология производства препаратов серии НКО-АКС с максимальным объёмом производства около 1 млн. наборов в год.

Получен Золотой диплом III Сибирской венчурной ярмарки в номинации «Перспективный бизнес»

1.2 Организация производства косметических сывороток. Краткое описание проекта «Персональная косметика».ООО «Лаборатория НКО» Опубликовано в сборнике «Научный и промышленный потенциал Сибири», Новосибирск, 2004, с 295.Готовятся документы для сертификации.
1.3 Организация производства антицеллюлитных наборов.

ООО «Лаборатория НКО»

Получено экспериментальное подтверждение эффективности методики.
1.4.1 Организация производства косметических средств для ухода за кожей головы (предотвращение различных видов аллопеции).

ООО «Лаборатория НКО»

Получены экспериментальные подтверждения
1.4.2 Организация производства лосьонов для защиты кожи головы от повреждающего действия поверхностно активных веществ и других токсичных ингредиентов средств ухода за волосами. ООО «Лаборатория НКО» Проведены исследования, свидетельствующие о возможности модификации проницаемости кожи. Нужны средства для проведения ключевого эксперимента на животных.
1.5 Разработка составов и организация производства препаратов для коррекции фигуры (уменьшение и увеличение женских молочных желез, локальное увеличение мышечной массы отдельных частей тела). ООО «Лаборатория НКО» Необходимы испытания.
1.6 Разработка составов и организация производства бытовых освежителей воздуха с использованием растительного сырья, обладающих бактерицидным и вирулицидным действием.

ООО «Лаборатория НКО»

Проведены исследования на модельных вирусных системах. Нужны камерные испытания на базе ГНЦ ВБ «Вектор». С применением патогенных вирусов.
2 Бальнеология и медицина
2.1 Организация производства концентратов  ванн, обладающих противовирусным, детоксикационным и антистрессовым действием.  В процессе испытаний выяснилось, что препараты могут быть использованы  для снятия бытовых и производственных интоксикаций. Они могут  выводить  из состояния алкогольного психоза, а при психологической установке на полный отказ от наркотиков опиатной группы наблюдается облегчение состояние абстиненции, снятия стрессовых состояний и улучшения сна. По результатам разработок получен патент РФ 32416416 от 19 января 2010 г и зарегистрирована международная заявка; приоритет от 17 января 2011г. Действие патента  остановлено.

Проект с общим названием «Новая бальнеология – настоящее и будущее профилактической медицины» получил специальный диплом V Сибирской венчурной ярмарки в номинации «Симпатия Российской ассоциации прямого и венчурного инвестирования».

2.2 Разработка составов и организация производства бальнеологических концентратов, предназначенных для использования в длительных космических рейсах (снятие стрессов, подпитка организма, защита от радиационного воздействия и пр.)». Необходимы эксперименты с оценкой максимальной длительности бальнеологических процедур.
2.3 Разработка составов и организация производства концентратов, предназначенных для повышения (подкачки) гормонального уровня организма человека. Проект «Естественная гормональная заместительная терапия» для  повышения работоспособности, мужской и женской потенции, снятия состояния перетренированности  спортсменов, неконтролируемый допинг и пр. Краткое описание проекта «Естественная заместительная гормональная терапия» опубликовано в сборнике «Научный и промышленный потенциал Сибири», Новосибирск, 2004, с 295. Имеются отдельные наблюдения. Начинаются расширенные испытания на добровольцах с детальной оценкой состояния организма до начала испытаний, в процессе и после проведения испытаний.

Формируются группы испытателей (по 10 человек):
1. Женщины (40 лет и старше).
2. Мужчины (40 лет и старше).
3. Спортсмены (без ограничений по возрасту).

3 Пищевая промышленность и медицина
3.1 Разработка составов и организация производства пищевых продуктов, обладающих  противовирусным действием. Проект «Нативные продукты для функционального питания» — начинается осуществление совместно с Бурятским государственным технологическим университетом (кафедра пищевых продуктов) и кондитерской фабрикой  (г. Улан-Удэ). Научный руководитель – Децина А.Н. Проведены исследования на модельных вирусных системах.

Получен патент РФ на технологию производства специальных пищевых продуктов.

Необходимы испытания с участием ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор».

 

3.2 Разработка составов и организация производства пищевых добавок, повышающих работоспособность, а также мужскую и женскую потенцию. Проект «Гертруда».

 

Начинаются испытания: формируются группы испытателей.

Получены первые подтверждения эффективности.

3.3 Разработка составов и организация производства пищевых добавок на основе сырья животного и растительного происхождения, обладающих цитостатическим действием.

Проект «Антиканцер».

 

Получены результаты исследований на клеточном уровне для более 200 экстрактов растительного и животного происхождения (Новосибирская область, Алтай, Дальний Восток, Китай). Составлен список потенциальных цитостатиков.
4 Ветеринария и сельское хозяйство
4.1 Разработка составов и организация производства кормовых добавок, обладающих противовирусным действием. Проект «Кормовые противовирусные добавки» — совместно с Красноярским Торгово-экономическим университетом (кафедра непищевых продуктов) и ООО «Живая косметика Сибири».

Научный руководитель – Децина А.Н.

Выявлены растения — потенциальные кормовые добавки, блокирующие развитие вирусов в клеточной тест- системе. Необходимо проведение испытаний на животных – совместно с ГНЦ ВБ «Вектор».
4.2 Регулировка пола новорожденных

 

Приступаем к реализации первого пробного эксперимента на одной из птицефабрик (Новосибирская область). Приглашаем инвесторов.
4.3 Разработка составов и организация производства для борьбы с листо — грызущими насекомыми (колорадский жук, саранча и пр.). Проект «Специфическая и неспецифическая защита растений». Совместно с сотрудниками СО РАСХН.

Децина А.Н., сотрудники СО РАСХН

Подобран ряд потенциальных защитных средств растительного происхождения. Необходимо проведение полевых испытаний с подбором эффективных концентраций биологически активных веществ.
5 Медицина чрезвычайных ситуаций и катастроф
5.1 Разработка и организация производства ранозаживляющих порошковых композиций. Проект «Порошки серии РАН».

 

Проведены исследования (проф. Колосов Н.Г.), подтверждающие эффективность состава РАН. Нужна разработка технологии производства – совместно с Институтом катализа СО РАН
5.2 Разработка и организация производства аэрозольных препаратов, обладающих бактерицидным и вирулицидным действием, предназначенных для биологической дезактивации бытовых и промышленных помещений, вентиляционных систем и оборудования. Получены данные по бактерицидной и вирулицидной активности растительных экстрактов. Необходима оптимизация составов и технологии производства – совместно с ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор».

 

ПРИЛОЖЕНИЕ 4. Примерный комплекс физических упражнений для пицц с ограничениями в передвижении.Привожу некоторое подобие комплекса упражнений для инвалида — колясочника. Понятно, что специалисты могут составить более полный и эффективный комплекс. Однако, что имею, то имею. Работаю за компьютером весь день — делаю регулярные перерывы (по совету врача) — 45 минут работы и 15 минут активного отдыха. Если увлекаюсь работой, то родные подсказывают.Варьирую количество повторов, амплитуду и интенсивность выполнения упражнений. Иногда на это определяется состоянием организма (например, продолжительностью сна). Последовательность выполнения упражнений — всегда однотипна. Это позволяет не задумываться — что идёт зачем. Начинаю лёжа —  всегда с остатков ног (культи). Имитирую езду на велосипеде, делаю перекрёстные (ножничные) движения и напрягаю остатки мышечной массы ног (словно встаю на цыпочки), а затем имитирую движения ног при глубоком приседании и подъёме.Перехожу к кистям рук. Делаю расслабленные взмахи кистями, опираясь на локти, вдоль тела (к ногам), меняю направление взмахов (к голове), затем вращаю расслабленными кулаками в двух направлениях (к голове и ногам). Затем, соединив пальцы рук в «замок», сначала поочерёдно сдвигаю руки над собой (вверх-вниз) напрягая запястья,  потом скручиваю кисти рук в замке поочерёдно (как бы потирая ладони одну о другую). Остаётся сделать нужное количество движений, стараясь с напряжением превратить «замок» в подобие плоской структуры.Плечевой пояс. Поднимаю руки, и делаю ножничные движения — сначала перпендикулярно над телом, а затем под углом.Тазо — бедренный сустав и позвоночник. Поднимаю ноги вверх, соединив коленные суставы,  переваливаю колени вправо и влево (до упора), стараясь не отрывать головы от кровати.Снова плечевой пояс и шея. Заложив кисти рук в замке за голову, раздвигаем локти в стороны и, наоборот, максимально сдвигаем их в вертикальном положении. Затем освобождаем руки, и поворачиваем голову до упора направо и налево.Мышцы живота. Вновь соединяем кисти рук за головой,  максимально соединяем локти, и поднимая вверх голову,  делаем выдох. Некоторую часть упражнения делаем с поворотом  головы на выдохе направо и налево. После этого,  одновременно  с подъёмом головы поднимаем ноги, подтягивая их руками. Часть Этого упражнения следует делать, отклоняя ноги вправо и влево. Следите за правильным дыханием.Финальная часть комплекса — мышцы живота и плечевой пояс. Движения прямых соединённых рук с максимальной амплитудой за голову и к ногам. Затем круговые движения прямых соединённых рук в правую и в левую сторону. Эта часть комплекса далее может быть продолжена с подключением гантелей оптимального веса — форсировать силовую нагрузку не стоит.Ваш покорный слуга меняет повторность всех вариантов упражнений от 10 до 40 движений, и тратит при этом времени от 15 до 45 минут. Конечно, возможны вариации, например, зарядка сидя с упражнениями на «скручивание и покачивание» позвоночника.. Но это пусть будет ваше творчество. Самое главное в нашем деле —  регулярность и ежедневная обязательность разогрева мышц несомненная жизненная необходимостью!Нужно принять себе за правило делать разминку всегда, когда прилегли отдохнуть и когда завершаете отдых. Установить порядок выполнения упражнений и исполнять его регулярно.Общаться лучше по Skype — anatoly-detsina.ПРИЛОЖЕНИЕ 5 . Умершие доктора не лгутЗдесь представлена статья американского доктора Уоллока.  Текст переведен на русский язык и напечатан с сохранением
авторской лексики в 1995 году. Доктор Уоллок очень популярен в США. В 1991 году был выдвинут на соискание Нобелевской премии.«То, что Вы прочитаете, может полностью перевернуть Ваше представление о здоровье и о современной медицине и таким образом радикально изменить Вашу судьбу и судьбу Ваших близких. Мне очень приятно встречаться со всеми Вами. Я вырос на ферме, на западе графства Сент-Луис. В 50-х годах мы начали с разведения мясных коров. Если Вы знакомы с разведением домашнего скота, Вы, наверное, знаете, что единственный путь заработать в сельском хозяйстве — это вырастить собственные корма, собственные кукурузу, соевые бобы, сено. На мельнице для нас размалывали кукурузу, бобы и сено, добавляя туда множество витаминов и минералов. Так мы готовили корм для коров. Через 6 месяцев этих коров можно было уже выставлять на рынок; мы производили отбор, оставляя лучшее поголовье для себя. Что интересно, делая это для коров, мы сами, представьте, не принимали никаких минералов и витаминов, а ведь мы были молоды, хотели прожить 100 лет без всяких болей и недомоганий. Это меня очень волновало, и я спросил своего отца: «Папа, скажи, почему ты и для нас не делаешь то же, что и для коров?» И тогда отец подарил мне мудрую мысль, он сказал: «Помолчи, парень, ты должен ценить то, что ежедневно ешь свежие продукты с фермы, надеюсь, ты это понимаешь?». Я, конечно, не стал больше приставать, не хотел лишиться обеда или ужина. Затем я поступил в сельскохозяйственную школу и, получив научную степень, стал специалистом по животноводству, по полевым культурам и почвоведению. После этого поехал на 2 года в Африку. Там мне удалось исполнить свою мальчишескую мечту, я работал с Мауром Паркинсом. Это великолепный человек.Через 2 года получил телеграмму с приглашением работать в зоопарк в Сент-Луисе. Национальный Институт здоровья выделил зоопарку ссуду в размере $78 млн., и им был нужен ветеринар, чтобы производить вскрытие животных, умерших естественной смертью в зоопарке. Я согласился, приехал. Мне приходилось делать вскрытие животных, умерших не только в этом зоопарке, но и в зоопарках Брукволдском, Чикагском, Нью-Йорском национальном, Лос-Анжелесском и так далее. В мои обязанности входило не только вскрывать животных, умерших естественной смертью, но и найти и наблюдать особей, сверхчувствительных к загрязнению окружающей среды, потому что в начале 60-х годов никто толком не знал об экологических проблемах и катастрофах. Итак, исследуя причины смерти людей и животных, я сделал 17500 вскрытий и вот к какому заключению пришёл:«Каждое животное и человек, умершие естественной смертью, умирают от неполноценного питания, т.е. от дефицита питательных веществ.»Результаты химических и биохимических анализов с документальной точностью показали, что естественная смерть наступает из-за неправильного питания, и это меня так поразило, что я вернулся к истории с коровами.Я написал 75 научных статей и трудов, 8 учебников совместно с другими авторами и одну книгу самостоятельно. Её продавали за $140 для студентов медиков. Я печатался в 1700 газетах и журналах, выступал в телепередачах и где только не выступал. Но тогда, в 60-е годы, мои труды относительно питания мало кого волновали.Что оставалось? Пришлось вернуться к учёбе и стать врачом, это позволило мне использовать все те знания о питании, которые я получил в ветеринарной школе. И, как ни удивительно, это сработало. Я провёл 15 лет в Торкмунде, штат Орегон, где занимался обычной врачебной практикой. И сегодня хочу поделиться с Вами своими знаниями и выводами, полученными за эти 10…12 лет. И если Вы унесете отсюда лишь 10% того, что услышите, Вы убережёте себя от многих неприятностей, страданий, сэкономите уйму денег и продлите на много лет свою жизнь. Вам не достигнуть этого, т.е. не получить дополнительных лет жизни, не достигнуть своего генетического потенциала просто так, без каких-либо усилий с Вашей стороны.Теперь хочу сказать Вам главное. Генетический потенциал продолжительности жизни составляет 120…140 лет.В настоящее время можно насчитать 5 народностей, представители которых доживают до возраста 120…140 лет на Востоке, Тибете и в Западном Китае. Эти люди были описаны ещё в 1964г. Джеймсом Хилтоном, написавшим книгу «Потерянный горизонт».Старейшим человеком, согласно имеющимся данным, хотя допускаю, что есть некоторые преувеличения, был доктор Ли из Китая, родившийся в Тибете. Когда ему было 150 лет, он получил от императорского китайского правительства сертификат, удостоверяющий, что ему действительно 150 лет, а родился он в 1677 году.Когда исполнилось 200 лет, он получил вторую грамоту. Документы свидетельствуют, что он умер в возрасте 256 лет. В 1933 году, когда он умер, о нём написали в «Нью-Йорк Таймс», «Лондон Таймс», где всё довольно хорошо подтверждено документами. Может быть, ему было всего 200 лет, не 256.В восточном Пакистане жила группа людей, которых называли богазами. Эти люди тоже известны какдолгожители. Они жили 120…140 лет. В бывшем Советском Союзе грузины, употреблявшие кисломолочные продукты, живут до 120 лет. Армяне, абхазцы, азербайджанцы доживают, прекрасно сохранившись, до 120…140 лет. В 1973г. в январском номере «Нэйшнл Джиографик» была помещена отдельная статья о людях, которые прожили 100 лет и более. Материалы снабжены прекрасными иллюстрациями, какими славится этот журнал. Мне запомнились три из множества фотографий. На одной изображена женщина в возрасте 136 лет. Она сидела в кресле, курила кубинскую сигару, пила водку и принимала участие в вечеринке. Она прекрасно веселилась, не прикованная к койке в доме престарелых, которому ещё нужно ежемесячно выделять $2000 со своего счета. Она наслаждалась жизнью в 136 лет. На другой фотографии были изображены две супружеские пары, празднующие 100 и 115-ю годовщины своей свадьбы. На третьей фотографии был изображён мужчина, собирающий чай в горах Армении, слушающий небольшой транзисторный приёмник. Согласно записям его метрик — датырождения, крещения, записи данных его детей — ему 167 лет и он самый старый человек на планете того времени. В Западном полушарии славятся долгожителями индейцы волкобанды и знаменитые жители Эквадора, живущие в Андах, в юго-восточном Перу, а так же любимые племена Тити-Кака и Мачу-пичу. Так вот, представители старейшего племени Тити-Кака живут 120 лет.Американка Маргарет Пич из штата Вирджиния, внесённая в книгу рекордов Гиннеса как самая старая американка, умерла в возрасте 115 лет от недостаточности питания. Точнее, она умерла от осложнения после падения. Кто из Вас скажет, от
чего она могла умереть? Правильно, от остеопороза. Женщина умерла от дефицита, в первую очередь, кальция в организме. У неё не было сердечно-сосудистой недостаточности, рака или диабета, но через 3 недели после падения она умерла, т.к. в организме у неё не хватало кальция. Очень интересно, её дочь сказала, что перед смертью у Маргарет Пич была тяга к сладкому. Это заболевание известно под названием Пайка, об этом позже.Обычно, если Вы слишком увлекаетесь шоколадом, сладким, это значит, что в Вашем организме не хватает хрома и ванадия.В одной из стран третьего мира, в Нигерии, вождь племени Бауэ умер в 126 лет. На похоронах одна из его многочисленных жён хвасталась, что когда муж умер, у него были все зубы свои, а это признак того, что и другие органы его выполняли свои функции надлежащим образом. Один мужчина из Сирии умер в возрасте 133 лет в июле 1993г. Его внесли в книгу рекордов Гиннеса не потому, что ему было 133 года, многие доживают до этих лет, и не потому, что в 80 лет он женился в четвёртый раз, а потому, что после 80-ти лет он стал отцом 9-ти детей. Если Вы посчитаете, что на каждого ребёнка надо 9 месяцев плюс год на грудное вскармливание и год между каждым ребёнком, у Вас получится, что этот герой-производитель становился отцом и после 100 лет. Вот после чего его внесли в книгу рекордов. Так что не отчаивайтесь, ребята, у Вас ещё есть надежда!Теперь немного наукиВ ноябре 1993г. в Аризоне был произведён интересный эксперимент. Три пары провели 3 года в изоляции, где ели здоровую пищу, которую выращивали сами, дышали очищенным воздухом, пили незагрязнённую воду. Когда они вышли, их обследовали медики-геронтологи из Калифорнийского университета в Лос-Анджелесе. Все данные — анализы крови и другие жизненно важные показатели — ввели в компьютер лос-анджелесского университета, который дал прогноз, что эти 3 пары, если будут продолжать жить так же, могут прожить 165 лет. И всё это лишний раз доказывает, что прожить 120…140 лет вполне возможно.Средняя продолжительность жизни американцев сегодня 75,5 лет, продолжительность жизни магистра или врача — 58 лет.Так что, если Вы хотите отвоевать 20 статистических лет жизни,
не поступайте в медицинскую школу. Есть две основные вещи,
которые Вы должны сделать, чтобы попасть в число долгожителей.Если Вы действительно хотите дожить до 100…140 лет — запомните важнейшее:Во-первых, нужно избегать опасностей, не наступать на мины, то есть имеется в виду — избегать бессмысленных и беспричинных опасностей. Конечно, если Вы играете в русскую рулетку, курите, пьёте, выбегаете на скоростную дорогу в часы пик, вряд ли доживёте до 120. Это звучит забавно, но Вы не представляете, тысячи людей в год умирают из-за подобных глупостей. И я хочу, чтобы Вы подумали об этом там, где возможно, Вы должны защитить и обезопасить себя. Иными словами, если у Вас есть возможность предотвратить болезнь, особенно неизлечимую, Вы должны этой возможностью обязательно воспользоваться.Во-вторых, Вы должны делать только то, что приносит пользу. Вам необходимо 90 добавок к пище: 60 минералов, 16 витаминов, 12 основных аминокислот и содержащих их белков и 3 основные жирные кислоты. Всего 90 добавок к ежедневной диете, иначе у Вас разовьются заболевания, вызванные их дефицитом.Сегодня об этом пишут в газетах, говорят по радио и телевидению, все об этом знают, т.к. интересуются здоровьем, долголетием и добавками к пище, и врачи с нами говорят постоянно об этом. Но не потому, что их к этому принуждает медицинская профессия. Не подумайте, что медики просят газетчиков, нет,это происходит потому, что такая информация способствует лучшему распространению газет.Моя любимая статья появилась в журнале «Таймс» 06.04.1992 года, и если Вы её не читали, настоятельно рекомендую достать её в школьной или публичной библиотеке. Сделать несколько фотокопий и приклеить их на дверь, в ванной, на холодильнике. Это всеобъемлющая статья, в ней говорится, что витамины способны побороть рак, сердечно-сосудистые заболевания и разрушительные действия старения.
На 6-ти поучительных страницах этой статьи есть всего одна отрицательная мысль, высказанная доктором, которому автор задаёт вопрос: «Что Вы думаете о витаминах и минералах, как добавках к нашему питанию?». «Поглощение витаминов не приносит пользы, — считает Виктор Хубин, профессор медицины нью-йоркской медицинской школы Маутсинай, — Все витамины, как дополнения, лишь делают нашу мочу более дорогой.» Если попробовать эти слова перевести на общечеловеческий язык, получается, что мы мочимся долларами, если принимаем витамины и минералы, т.е. просто тратим впустую на витамины и минералы. Вот это он хотел сказать. И, если это опубликовали, значит, в этом что-то есть. Но вот,  что я должен Вам сказать. После того  как произвёл 17500 вскрытий на 14501 особях животных со всего мира и на 3000 люде. Я всегда сам хотел быть здоровым, имея детей, внуков, да ещё и правнуков, я считаю, что, не инвестируя в самого себя на витамины и минералы, Вы инвестируете в благосостояние и улучшение жизни докторов медицины. Я твердо верю в то, что именно мы способствуем обогащению врачей.С 1776 г и до второй мировой войны правительство США истратило около $8,5 млн. на здравоохранение и научные исследования в области здравоохранения. Сейчас на здравоохранение тратится $1,2 трлн. в год и этого ещё очень мало, ведь каждому хочется, чтобы медицина была бесплатной.И я Вам скажу, что если использовать для сельского хозяйства, точнее, для животноводства, медицинскую систему человеческого типа, Ваши котлеты обойдутся Вам в $275 за 0,5 кг. А если воспользоваться сельскохозяйственной системой, которую применяем в животноводстве, страхование на семью из 5 человек будет составлять $10 в месяц. Так что можете делать выбор.Я убежден, что поскольку мы способствуем обогащению врачей при помощи страхования и государственных субсидий, они нам тоже кое-что должны. А должны они нам присылать хотя быинформационные письма о результатах новейших медицинских исследований.Кто-нибудь из Вас, сидящих в зале, получал когда-нибудь подобную информацию от своего врача? Нет. Интересно, не правда ли? У меня Вы могли бы получить много информации. Хочу поделиться с Вами.Причины смертности1. Первое. Язва желудка:Кто-нибудь из Вас слышал, что причина язвы желудка — стресс. Уже 50 лет назад мы знали в ветеринарии, что язвы у свиней вызываются бактериями. Позволить себе дорогостоящую операцию на желудке свиньи мы не могли, а если бы и смогли, Ваша свиная отбивная обходилась бы Вам $275 за 0,5 кг. Мы знали, что существует минерал, называемый висмут, при помощи которого мы могли предотвратить и вылечить язву желудка у свиней без всякого хирургического вмешательства. Мы так и сделали, и лечение обходилось примерно $5 на свинью. Лечение при помощи висмута, других минералов и тетрациклина. Национальные институты здоровья лишь в феврале 1994г. выступили с заявлением, что язва желудка вызывается бактериями, а не только стрессами, и может быть вылечена.А ведь медицинские исследователи обычно говорят:  «…показывает обнадёживающие результаты, которые могут оказаться благотворными…» Теперь же национальные институты используют именно слово «вылечить» без намеков. Они говорят: «вылечена методом, сочетающим минерал висмут и тетрациклин». Тем, кто не знает, что такое висмут, достаточно зайти в любой продовольственный магазин или аптеку и купить за $2 бутылку с содержимым розового цвета. Она называется пептобизма. Итак, 1 ч.л. в день — и можно вылечить язву. Опять — таки есть выбор. Можно вылечиться за $5 или позволить, чтобы Вас разрезали. Выбор за Вами.2. Далее, какова вторая причина смертности среди американцев?Да, это ужасное заболевание, называемое рак. В сентябре 1993г. в национальном институте онкологии Бостонской медицинской школы после наблюдения над раковыми больными заявили, что ими обнаружена противораковая диета. Исследования проводились в Китае по той простой причине, что в провинции Хинай был зарегистрирован самый высокий уровень заболеваемости. За 5 лет исследованию подверглись 29 000 человек. Им давались витамины и минералы в два раза больше «нормы», т.е. если рекомендовано в день витамина С 60 мг, то больные получали 120 мг.Алан Пол, человек, удостоенный двух Нобелевских премий, говорил, что если Вы хотите предупредить раковые заболевания при помощи витамина С, Вы должны употреблять его 10000 мг в день. И вот результат: врачи, которые взахлёб спорили с ним, уже на том свете (царствие им небесное), а Алан Пол живет и здравствует. Ему 94 года. Он работает по 14 часов в день, 7 дней в неделю. Живёт на ранчо в Калифорнии и преподаёт в Калифорнийском университете в Сан-Франциско. Только Вам выбирать, прислушиваться к советам почивших докторов или же придерживаться мнения доктора Пола. Итак, вполне нормально принимать витамин С и витамин А — двойную норму, ничего плохого не случится, а также цинк, рибофлавин, молибден и т. п.И одна группа особенно полезна. В неё входят 3 компонента: витамин Е, бета-каротин, минерал селен. Эти три компонента нужно применять в двойной норме, и, если Вы извлечёте 0,5% пользы, уже хорошо. В группе пациентов, получавших витамин Е, бета-каротин, минерал селен в течение 5 лет, смертность во всех случаях снизилась на 9%, т.е. 9 из каждых 100, обречённых умереть, выжили. А те раковые больные, кого уже сочли обречёнными на смерть, но которые принимали эти три компонента, в 3 случаях из 100 выжили.В случаях  рака желудка и пищевода,  преобладающих в провинции Хинай,  21% выжили. Об этом Ваш лечащий врач должен был прислать Вам информацию. Если он не хотел брать на себя ответственность, то он хотя бы мог информировать Вас, чтобы Вы могли сами выбрать. Вот почему такое отношение к пациентам я считаю просто смешным, а с другой стороны — это ещё одно подтверждение их равнодушия.Далее, артрит. С сентября 1993 года в медицинской школе Гарварда и в Бостонской больнице проводилось лечение куриным протеином больных с распухшими от артрита суставами. Выбирались больные, чьё состояние не улучшалось в результате медикаментозного лечения. Этим больным проводились инъекции аспирина, преднизолона, кортизона, различные методы физиотерапии. Единственно, что оставалось, это хирургическое вмешательство по замене суставов. Тогда я сказал: «Послушайте, эти люди столько выстрадали, что если они согласятся пострадать ещё 90 дней, всего 3 месяца, я произведу небольшой эксперимент.»На этот эксперимент согласились 29 добровольцев. Эти 29 человек, для которых все возможности медицины были исчерпаны, а улучшений не наступило, подверглись следующему лечению: им давали каждое утро чайную ложку с верхом измельчённого куриного хряща, разведённого в апельсиновом соке. И через 10 дней, по наблюдению Гарвардской медицинской школы, все болевые воспаления и ощущения исчезли; через 30 дней они могли позволить себе кое-что, а через 3 месяца функции суставов полностью восстановились.А теперь я Вас рассмешу. Смешная история связана с высказыванием доктора, который проводил эти исследования в Гарварде. Он объявил куриный хрящ лекарством, потому что если что-то помогает вылечить болезнь, значит это можно назвать лекарством, выдаваемым по рецептам. Мы сразу же видим, что его мозг начинает лихорадочно подсчитывать: «…$3,00 капсула, всего 25 пациентов» и так далее. Ну, а если со всем этим связываться неохота, можно пойти в аптеку и купить ноксиджелон, женщины хорошо знают это средство. Его принимают для укрепления волос и ногтей. Основной компонент — коровий хрящ, который, в свою очередь, — хорошее укрепляющее средство для Ваших хрящей и костей. Оно приготовлено из говяжьих хрящей и связок. Если Вы будете принимать по 0,5 ч.л. ежедневно с апельсиновым соком в соотношении 1 унция на 100 фунтов веса с коллоидными минералами, то в следующий раз, когда я сюда приеду, Вы подниметесь на сцену и начнёте меня целовать и обнимать, если ещё вспомните про артрит.Кто из Вас слышал когда-нибудь о болезни Альцгеймера? Сейчас о ней знают все, а когда я был маленьким, болезни Альцгеймера просто не было. Теперь же это один из распространённых недугов, поражающих одного из двух людей, достигших 70 лет. Довольно пугающие данные. А как определить и вылечить болезнь Альцгеймера на ранней стадии у животных? Представьте себе, какие бы убытки понесли фермеры, если бы свиноматка не понимала, зачем подошла к кормушке.Поэтому 50 лет назад начали изучать, как предотвратить и вылечить в ранней стадии болезнь Альцгеймера в животноводстве. Делали мы это с помощью больших доз витамина Е.  Вы должны были получить письмо от Вашего доктора в июле 1992 года, потому что серьёзная научно-исследовательская школа Калифорнийского университета Сан-Диего с 1992г. выступила с заявлением, что витамин Е замедляет потерю памяти при болезни Альцгеймера. И в этом они отстали от ветеринарной медицины лет на 50. Именно поэтому, может быть, Вам надёжнее сходить к ветеринару.Теперь скажите, кому из Вас приходилось испытывать такое неприятное переживание, как камни в почках. Вижу несколько рук. Скажите, от чего прежде всего доктор велел отказаться Вам в питании? От кальция. И никаких молочных продуктов, ничего, содержащего кальций. Потому что была уверенность: «кальций в почках появляется из кальция из продуктов, которые мы употребляем в пищу.» На самом деле камни в почках происходят из Ваших собственных костей. Когда Вы испытываете дефицит кальция, вот тогда у Вас камни в почках. Тысячу лет назад знали: для того, чтобы предотвратить появление камней в почках домашних животных, им нужно побольше давать кальция, магнезии и бора. Но быки, бараны, молочный скот, овцы имеют такую анатомию, что, когда они заболевают этим, они просто умирают. Когда же у нас появляются камни в почках, от боли остаётся жалеть, что не можешь умереть.Мы знаем, как нужно предотвращать это заболевание. Вы должны были получить от Вашего доктора письмо ещё в 1993 году, и в нём должно было говориться, что кальций снижает риск образования камней в почках. Было изучено более 40000 пациентов, разделенных на 5 категорий. В группе, получавшей наибольшее количество кальция, ни у кого не было камней в почках.Помните, я говорил, что врачи доживают до 58 лет, а мы с Вами до 75,5. Так вот, группа людей, профессионалов, которые указывают Вам, как жить, и уверяют, что Вы не должны употреблять соль, кофеин, должны есть не сливочное масло, а маргарин, не делать всякие глупости, умирают в 58 лет; в то время как люди в возрасте 120…140 лет кладут кусок каменной соли в чашку чаю, а пьют по 40 чашек в день, готовят на сливочном масле вместо оливкового и живут.Так кому же Вы поверите — тем, кто живёт 120 лет, или тем, кто доживает до 58? Выбор за Вами.И тем не менее, некоторых из них я очень уважаю. Среди них доктор Стюард Картред. Ему 38 лет, он семейный врач. Он занимается проблемами аневризмы. Это распухание ослабленной артерии из-за утери эластичности ткани. В 1957 году мы узнали, что причина аневризмы — дефицит меди в организме. Мы работали тогда над проектом, по которому наблюдали 200000 индеек. Им давали специальный рацион, в который включены 90 питательных веществ. И в первые 13 недель ровно половина индеек умерли. При вскрытии 125 тысяч индеек обнаружилось, что они умерли от аневризмы. Увеличив вдвое количество меди в питании, фермеры вырастили 500 тысяч индеек, и ни одна из них не пала от аневризмы.Этот эксперимент был произведён на мышах, кошках, собаках, коровах, свиньях и ещё не знаю на каких животных. И мы пришли к мнению, что именно дефицит меди — причина заболевания.Преждевременная седина — первый признак, что у Вас дефицит меди в организме. Причём кожа сморщивается, потому что нарушается эластичность тканей, появляются круги под глазами, линии на лице, и Вы становитесь похожими на чернослив. Кроме того, существует такая проблема, как варикозное расширение вен, причина которого — нарушение эластичности тканей, всё Ваше тело начинает провисать, на руках, груди, животе, на щеках повисает, и Вы идёте к косметологу и прибегаете к пластической операции. На самом деле Вам гораздо дешевле, практичнее и безопаснее принимать  коллоидные минералы.А теперь я Вас познакомлю с другим врачом — Мартином Картером. Он умер в 57 лет. Он получил степень врача в Гарвардской медицинской школе, степень доктора медицины в Йеле. Когда его вскрыли, определили, что причина смерти — аневризма аорты. Таково заключение врача из больницы Рокфеллеровского университета. Так вот от чего умер доктор, от дефицита меди. И у него тоже была недорогая моча.Вот другой пример. Довольно известный адвокат из Детройта Элен Уолтер умерла в 44 года. Она посещала один из самых модных спортивных клубов, знаете, сейчас все женщины хотят иметь стальные кости при малых затратах. Она тоже умерла от аневризмы. По результатам вскрытия симптомы напоминали паралич или кровоизлияние. Причиной этого бывает тоже дефицит меди. И у неё тоже была недорогая моча.Кто-нибудь из Вас слышал о человеке по имени Стюард Буркeр? Он написал 5 нашумевших книг о здоровье, диете, питании, получил степень магистра медицины в медицинской школе Тора — это один из лучших медицинских авторитетов в Бостоне. Его книги включают диеты для потери веса. Он писал эти книги для 20-летних и моложе, а сам умер в 40 лет. Хотелось бы Вам последовать примеру и диете этого человека? Он умер в 40-летнем возрасте откардиоанемии, причина которой — дефицит селена. Некоторые фермеры просто приходят в магазин, где продаются корма, за селеном в инъекциях или в таблетках для своих животных, чтобы предотвратить это. А парень, что написал 5 книг по питательным продуктам, умер из-за недостатка селена в своём питании. И у него была недорогая моча.Поверьте, Вы можете полностью предотвратить кардиоанемию всего за 10 центов в день, и если Вы этого не знаете, Вы законченные глупцы. Иначе я просто Вас назвать на могу, если Вы не принимаете в день на 10 центов селена, чтобы спасти собственную жизнь.Многие из Вас, возможно, знают эту женщину. Её зовут Гейл Кларк. В возрасте 47 лет она была главным кардиологом графства Сент-Луис, и догадайтесь, от чего она умерла? Она умерла от кардиомиопатического приступа. Вы, наверняка, не раз видели, как коровы, которые с молоком интенсивно теряют много кальция, подбирают камни, кости, стараются жевать посторонние предметы, гальку, кровельную дрань. Это и называется панька. Хорошему фермеру необходимо дополнить их рацион минералами, а не то они могут съесть и сарай целиком. У людей этот феномен наблюдается часто. Беременные женщины отличаются, как всем известно, тем, что
они постоянно что-то хотят. Толкая мужа в бок, говорят: «Эй, вставай, хочу мороженого с солёным огурцом». Это происходит от того, что растущий плод забирает из организма нужные ему минералы.Небольшой совет: посмотрите на свои руки и лицо. Если Вы увидите розовые пятна, это свидетельство раннего дефицита селена. Обнаружив, начинайте принимать коллоидный селен в течении 6 месяцев. Всё исчезнет. За полгода Вам удастся повернуть процесс вспять. Ведь если пятна исчезнут снаружи, они исчезнут и на внутренних органах, на мозге, сердце, печени, почках.А у кого из Вас низкий сахар в крови? Хорошо, примерно 10%. Наверняка, Вам приходилось видеть слишком активных детей, набрасывающихся на сахар. Дефицит хрома и ванадия приводит к низкому содержанию сахара в крови. Если не обращать внимания на это, разовьётся всем известное заболевание, называемое диабет.Что касается дефицита олова в организме, это проявляется в таком распространённом явлении, как лысина у мужчин, и у многих здесь присутствующих очевидный дефицит олова. Если эту нехватку долго не восполнять, развивается глухота.Далее следуем: дефицит бора в организме. Женщины должны уважать и знать бор. Он помогает сохранить в костях употребляемый кальций, чтобы предохранять Вас отостеопороза. Бор помогает выработке эстрогена, а мужчинам в выработке тестостерона. Если не принимать достаточно бора, Вы, женщины, будете очень страдать во время менопаузы, испытывая все неприятные ощущения этого периода. А мужчинам при нехватке тестостерона и вовсе придётся туго. Им грозит преждевременная импотенция.Первый признак дефицита цинка в организме, когда Вы теряете обоняние и вкус, когда Вам не нравится пища, приготовленная женой, и Вы жалуетесь, что не ощущаете вкуса. «Как, я провела весь день на кухне, чтобы приготовить вкусный обед, а ты даже его не хвалишь?» «Интересно, я пришёл на кухню и ничего не почувствовал». Это дефицит цинка.В экспериментах на лабораторных животных выяснилось, что имеется примерно 7 минералов для увеличения продолжительности их жизни вдвое. Помните, я говорил Вам, что необходимо 90 элементов питания: 60 минералов, 16 витаминов, 12 аминокислот, 3 жирных кислоты. И нам очень повезло, растения способны производить необходимые нам аминокислоты, витамины и жирные кислоты. Растениям это по плечу, и нам следует употреблять в пищу15…20 растительных компонентов в день в правильных сочетаниях, чтобы получить эти необходимые 90 элементов.Теоретически это возможно, но большинство американцев этого не делают. Средний американец считает, что если он съел немного картофеля в виде чипсов, то выполнил дневную овощную норму. Нужно подходить к этому правильно. Итак, несмотря на то, что это теоретически возможно, практически мало кто получает нужное количество витаминов, аминокислот, жирных кислот в нужном соотношении в своей диете.И поэтому, если Вам дорога Ваша жизнь, как мне моя, моих детей, внуков, Вы должны сами позаботиться, чтобы принимать достаточное количество витаминов, аминокислот, жирных кислот, потому что, я гарантирую, если этого не делать, дожить до 120 или 140 лет невозможно.Другая история. Это минералы. С ними связана просто трагическая история, потому что растения больше не содержат минералы ни в каком виде. Их нет в почве, их нет и в самих растениях.Мы приготовили для Вас копию документа сената США, документ 2.64 со второй сессии 74 Конгресса. В нём говорится, что содержание минералов в почвах наших ферм совершенно истощено, и поэтому урожай, будь то зерновые, овощи, фрукты, орехи, не содержит минералов. Люди, употребляющие эти продукты, автоматически приобретают заболевания, связанные с дефицитом минералов, и единственный способ предотвратить и вылечиться — потреблять в пищу минеральные добавки. Так говорится в документе, подписанном Конгрессом США в 1936 году. Изменилась ли сегодня ситуация к лучшему? Нет, лучше не стало. Стало, к сожалению, ещё хуже. Причина в том, что фермеры удобряют почву натрием, фосфором и калием. Три компонента в различных сочетаниях и соотношениях. Никто не заставит фермера добавлять в почву ещё 60 минералов, потому что от них не зависит урожайность. Поэтому каждый раз, собирая урожай, то есть растения, высасывающие из почвы минералы, много фунтов на каждый акр, Вы лишаете почву тех самых минералов. И если Вы кладёте обратно 3 минерала, а забираете 60, ситуация напоминает Ваш расчетный счёт в банке, если Вы ежемесячно кладёте на счёт $3, а со счёта списываете $60. Можете представить, что станет с Вашими чеками. Конечно, они могут лопнуть.Я могу Вам сказать, что наше с Вами здоровье тоже на грани катастрофы, потому что больше нет минералов в нашей почве, и поэтому мы с Вами, все вместе и каждый в отдельности, несём полную ответственность за своё здоровье и сознательное дополнительное употребление минералов.Меня часто спрашивают: «А что делали 1000 лет назад, когда не было удобрений, а в обществе были люди, которые жили много лет? И что Вы думаете о египтянах, китайцах, индусах?»Они жили у великих рек Нила, Ганга, Жёлтой в Китае, которые почти ежегодно разливались и наполняли всё вокруг. И каждый раз наводнение, догадайтесь, догадайтесь, что приносило. Вода приносила ил и песок с гор на расстояние тысячу миль. И люди молились всем своим богам, благодаря за наводнение. Мы молимся — чтобы их не было. А наводнения обогащали почву осадками, илом и минералами, тем самым обогащая и урожай зерновых культур. Король Филипп, отец Александра Великого, женился на 12-летней девочке, королеве Египта Клеопатре. Она была далеко не Элизабет Тейлор в дорогих косметике и нарядах. Она была плоскогрудым, худым созданием, не отличавшимся сексапильностью. Почему же король женился на ней? Да потому, что в её владениях были лучшие поля. Все знали, что лучше зерновых, чем в Египте, нигде не сыщешь, а гигантская армия во главе с его сыном Александром Великим собиралась завоевать весь мир. Нужна великолепная мука для солдат, чтобы они могли маршировать 20 часов, драться 6 часов и побеждать. Если бы они пользовались зерновыми из бедной минералами почвы, они бы и 20 минут не выдержали, а скорее стали кричать: «Мама, забери меня!» Он знал, что Египет— место, где лучшие зерновые. Наводнения там отменно снабжали почву минералами, и мировые культуры, давшие миру великое искусство и технологии, происходят из этих мест. Люди обладали большим умственным потенциалом именно потому, что их пища была богата минералами.А теперь я сделаю вот что. Я возьму несколько минералов. Пару всего, чтобы Вы имели представление, а относится это ко всем минералам без исключения. Давайте возьмем самый распространённый минерал кальций. О нём все знают. Дефицит кальция — причина примерно 147 различных заболеваний. Иногда они называются по именам людей, например Билсползи — это когда половина Вашего лица искривляется. Это не паралич, это просто парез лицевого нерва. Это состояние вызвано дефицитом кальция в организме. Остеопороз — это заболевание занимает 10 место по смертности среди взрослого населения. Болезнь эта очень дорогостоящая. Операция по замене шейки бедра или тазобедренного сустава стоит $35000, а если, не приведи бог, два бедра, так это $70000. Хорошо, если Вам это обходится бесплатно и у Вас есть страховка. Миссис Китц из Ретфорда, в штате Вирджиния, умершая в возрасте 115 лет, если помните, умерла в результате осложнения после падения. У животных остеопороза, насколько мне известно, не бывает. Например, у Вас в стаде 100 коров и в этом году нет ни одного телёнка, чтобы покрыть текущие расходы и Вас это беспокоит, так как надо платить за корма, услуги ветеринару, уход за пастбищем и фермой, удобрения, за починку забора и так далее. У Вас нет телёнка, чтобы продать его и получить наличные для покрытия расходов. Вы звоните ветеринару и говорите: «Что
происходит? Не нужно ли избавиться от коров?» Ветеринар приходит, осматривает их и говорит, что дело совсем не в Ваших коровах. Затем осматривает быка и делает заключение: «Проблема ясна, у быка остеопороз, с его тазобедренными суставами ему трудно общаться с коровами». Но чтобы предотвратить это, нужно давать родившемуся телёнку кальция всего на 10 центов в день, и у него никогда не будет остеопороза.Для профилактики пародонтоза и воспаления дёсен дантисты и пародонтологи советуют Вам чистить зубы после каждой еды и пользоваться флосом. Как ветеринару,  мне приходилось сталкиваться с сотнями тысяч животных: мышей, крыс, кроликов, собак, овец, свиней, лошадей, львов, тигров, медведей. Они не страдают заболеваниями дёсен, они не пользуются флосом. У них порой несвежее дыхание, но здоровые дёсны. Причина того, что в животноводстве мы не встречаемся с заболеваниями дёсен, та же. Нет дефицита кальция.Далее — проблема артрита. Если Вы помните, мы уже говорили про куриный хрящ и желатин. 85% артритов вызвано остеопорозом суставных окончаний костей. Далее — артериальная гипертония. Гипертония — это повышение давления. Первое, что Вам порекомендует врач, это понизить содержание соли в Вашей диете. Все это знают, коли всегда вдалбливали в голову. Но вспомним коров. Первое, что фермер добавляет в пищу домашнего скота — это кусок соли. Ни один фермер не будет конкурентособен, если не будет давать скоту кусок соли. Он просто умрёт при виде счетов от ветеринара, просто с ума сойти. И нам предлагается поверить, что нам не нужна соль, что,  то количество соли, которое мы получаем в пшеничном хлебе, в салате — достаточно. Не верьте. Представьте, врач, который доживёт до 58 лет, говорит Вам: «Не ешьте соль, не употребляйте сливочное масло», а те, кто жил 120 лет, употребляли сливочное масло и соль. Попробуйте сделать выбор.Я взял контрольную группу в 5000 человек с повышенным кровяным давлением и увеличил вдвое потребление кальция, и через 6 недель прекратил экспериментировать, потому что у 65% из этой группы кровяное давление нормализовалось лишь путём удвоения кальция.Когда эти пациенты, лечившиеся у врача, появлялись на приём, врач говорил: «О, у Вас нормальное кровяное давление, что Вы принимали?». «Я находился на эксперименте, принимал двойную норму кальция» — отвечал пациент.Следующая проблема — судороги. Вы просыпаетесь среди ночи и не можете пошевелить ногой. Мы все это испытали. Обычно это дефицит кальция в организме.Далее следует постменструальный синдром. Эмоциональное и физическое состояние, которое мы называем — истерикоэктомия. В Калифорнийском институте Сан-Диего было предложено удвоить дневную норму приёма кальция, и 85% эмоциональных и физических симптомов как не бывало.И последнее — боли в пояснице. 65% американцев страдают болями в пояснице, независимо от того, работают ли они за компьютером, разгружают ли грузовики или водят большие автобусы. Это большая американская трагедия. На самом деле, боли в пояснице — это остеопороз позвонка, независимо от того, есть проблема с позвоночными дисками или нет. Если диску не на чём держаться, позвонок истощается, разрушается, особенно если у Вас дефицит меди.Последнее, о чём я хочу с Вами поговорить, это диабет. С этой проблемой был связан каждый. Это третья по счёту причина смертности в США. Он имеет осложнения, побочные эффекты, включая слепоту, нарушение почечной деятельности, сердечно-сосудистые заболевания различной степени. Что, в свою очередь, — первая причина смертности среди американцев. Если у Вас диабет, продолжительность Вашей жизни в среднем ниже, чем у того, у кого его нет. В ветеринарии мы узнали в 1957 году, что можно предотвратить и вылечить диабет при помощи минералов. Эти данные были опубликованы в официальном журнале, представляющем науку в национальных институтах здоровья, где было сказано, что «диабет можно предотвратить и вылечить с помощью хрома и ванадия«. Один только ванадий, согласно данным университета Ванкувера и медицинской школы Бригшколумбиум, в состоянии заменить инсулин. Для многих людей процесс продолжается 4…6 месяцев, т.е. это постепенный процесс, в течение которого надо принимать адекватное количество хрома и ванадия.Я собственными глазами видел, как это работает на сотнях и тысячах пациентов. Было бы хорошо, если мне удалось убедить Вас принимать минералы самим, а не рассчитывать на то, что они поступят в организм из продуктов питания. А тем более рассчитывать на то, что упаковано в коробки, пакеты, бутылки.Существуют три типа минералов, на которые следует обратить особое внимание. Первый тип — неорганические минералы. Это те, которые добывают, в основном, из каменных пород. Они усваиваются только на 8…12%. А когда Вы достигаете возраста 25…40 лет, усвояемость падает до 3…5%. Очень плохо, если Вы принимаете что-то вроде кальция-лакте, являющегося обычным неорганическим минералом. Предположим; что это кальций-лакте в таблетках по 1000 мг. Многие люди, принимая по 2 таблетки в день, говорят: «Доктор, я принимала очень много кальция. Я слышала передачу по радио об артритах и принимала 2000 мг кальция в день, но это не облегчило мой артрит, а сделало хуже». Спрашивают: «А какой именно кальций Вы принимали?» Отвечает:«Кальций-лакте». Вот в этом и есть Ваша ошибка, потому что лишь 250 мг из этого количества — кальций. И если учесть, что Вы усваиваете лишь 10% из этого количества и 750 мг — это лактоза и молочный сахар, а 10% от 250 мг составляет 25 мг, то если Вы принимаете 2 таблетки, Вы получаете не 2000 мг, а 50 мг. Получается, что для того, чтобы получить необходимое количество кальция, Вам нужно принимать 90 таких таблеток в день, по 30 во время каждого приёма пищи. И не забывайте ещё об остальных 59-ти минералах.В 60-е годы в сельском хозяйстве стали использовать хелатные минералы. Эти минералы представляет собой неорганические минералы с аминокислотами, протеинами или энзимами, обволакивающими неорганический атом. Такая форма минералов увеличивает их абсорбцию на 40%. Именно поэтому пищевая промышленность набросилась на эту идею.Третья форма минералов называется коллоидные минералы. Они имеют самую высокую абсорбцию. А ведь именно абсорбция, всасывание, волнует нас больше всего. Коллоидные минералы всасываются на 98%, что в 2,5 раза больше, чем хелатные минералы и в 10 раз больше, чем неорганические. Коллоидные минералы могут быть только в жидком виде и в очень маленьких тельцах, в 7000 раз меньше, чем красное кровяное тельце, эритроцит. Каждая частица негативно заряжена, а покрытие кишечника заряжено положительно, и образуется электромагнитное поле, которое концентрирует минералы у стенок кишечника. Всё это, вместе взятое, дает Вам 98% усвоения.
Растения играют очень интересную роль в образовании коллоидных минералов. Они в своих тканях преобразуют неорганические минералы в коллоидные. Употребляя эти растения, мы накапливаем минералы в своем организме и используем их. Но так как в нашей почве нет минералов, в растениях, в урожаях недостаточно минералов.Все долгожители, которые жили до 120…140 лет, имеют много общего. Они живут в высокогорных деревнях, выше 8000 и 14000 футов от уровня моря. У них не более 2 дюймов осадков в год, совсем нет дождей, не бывает снега. Это очень сухие регионы.И как, Вы думаете, они получают воду для питья и ирригации? От таяния горных снегов. Вода, которая выходит из-под ледников, не такая чистая и прозрачная, как гейзеровская вода, а если наполнить стакан и посмотреть, желтовато-белая или бело-голубая. Она содержит от 60 до 72 минералов.В Тити-Кака, мне нравится повторять это название, или на Тибете её называют ледовым молоком. И они эту воду не только пьют, получая 8…12% абсорбции минералов, но и, что более важно, они орошают землю этой водой год за годом, урожай за урожаем, поколение за поколением уже 2,5…5 тысяч лет.И у них нет диабета, сердечно-сосудистых болезней, высокого кровяного давления, артритов, остеопорозов, рака, катаракты, глаукомы, нет дефектов у детей при рождении, нет тюрем, нет наркоманов, нет налогов, нет врачей и они живут 120…140 лет без заболеваний.По — Вашему, важны ли коллоидные минералы? И каждый раз, когда Вы один день не принимаете минералы, Вы укорачиваете свою жизнь на несколько часов или даже несколько дней. ПРИЛОЖЕНИЕ 6. Программа «Здоровое питание — здоровье нации»Программа «Здоровое питание-здоровье нации» ставит перед собой следующие задачи: 1. Реализация основ государственной политики в области здорового питания населения России 2. Оценка фактического питания разных категорий населения (т.к. нужны разработки по методам коррекции питания) в связи с выявлением уровня и направленностью нарушений 3. Экспертиза продукции ВСЕЙ , в т.ч. и средств гигиены питания (диетических, оздоровительных, функциональных ,специальных продуктов, БАД) 4. Оценка в целом пищевого статуса 5. Реализация просветительских программ (пропагандистская, образовательная деятельность по истинным причинам заболевания и методам их устранения) Программа «Здоровое питание-здоровье нации» разработана- Сибирским Федеральным центром оздоровительного питания. Она одобрена: — Общероссийским общественным движением «За здоровую Россию»; — Межведомственной комиссией по проблемам питания Медицинской Академии РФ; — Минздравсоцразвития РФ ;- Правительственной комиссией по охране здоровья; — Межрегиональным общественным движением «Сибирский народный собор»; — Национальным проектом «Россия против контрафакта».  Практическая реализация программы «Здоровое питание-здоровье нации» была поручена Центрам оздоровительного питания , которые аккредитовании в программе. Правило 1. Человек неотделим от окружающей его среды обитания. Основные факторы (составляющие) среды обитания, влияющие на состояние здоровья человека: — физические факторы (электромагнитное, рентгеновское и другие виды излучений, гравитационная составляющая, температура окружающей среды и т.д.); — химические (все вещества, с которыми, так или иначе, контактирует наш организм, в первую очередь, в составе пищи, воздуха и воды); — биологические (микроорганизмы – вирусы, простейшие, бактерии и т.д.); — социальные (материальная обеспеченность, семья, окружающие люди, работа, обстановка в стране, в целом); Со всеми этими факторами организм постоянно взаимодействует и вынужден приспосабливаться к их влиянию. Быть здоровым можно только при условии соответствия состояния внутренней среды организм, требованиям, предъявляемым к нему факторами окружающей среды. Правило 2. Организм способен извлекать пользу из всех факторов окружающей среды и бороться с негативными ее проявлениями только при полноценном, активном обмене веществ; Правило 3. Любое хроническое заболевание является следствием неспособности организма справиться с действующими на него неблагоприятными факторами. Существующее заболевание само по себе становится неблагоприятным фактором, постоянно действующим на организм. При этом повышается количество и перечень веществ, которые необходимы организму для того, чтобы успешно с ним бороться, а также требования к интенсивности обменных процессов; Правило 4. Здоровье человека зависит от уровня его образованности и знаний о действительных причинах возникновения заболеваний и существующих объективных методах борьбы с ними; Правило 5. Важнейшим условием формирования высокого потенциала здоровья является социальное благополучие человека, в том числе, материальная обеспеченность. В случае отсутствия социального благополучия, для человека становятся недоступными те мероприятия, средства, образ жизни, следование которым является неотъемлемой частью системы восстановления здоровья и профилактики заболеваний; Правило 6. Осознание ответственности за свое здоровье и благополучие. Недопустимо перекладывать заботу о своем здоровье на плечи государства, правительства, здравоохранения. ГИГИЕНА – учение о здоровом образе жизни, о здоровых условиях жизни; совокупность мер, обеспечивающих сохранение иммунитета, здоровья; (Д. Н. Ушаков, Толковый словарь русского языка). ГИГИЕНА — искусство или знание сохранять здоровье, оберегать его от вреда (В. И. Даль, Толковый словарь живого великорусского языка, 2003).Цель ГИГИЕНЫ – устранение заболеваний, социального неблагополучия. Все мероприятия, направленные на устранение заболеваний и социального неблагополучия (в том числе, номенклатура продукции) относятся к понятию ГИГИЕНА, и делятся на три группы: • ГИГИЕНА внутренней среды организма (питание, лечебная косметика и физиотерапия)• социальная ГИГИЕНА (бизнес-программы – социальное и материальное благополучие); • ГИГИЕНА труда и окружающей среды; Новая государственная стратегия охраны здоровья. В связи с тем, что:1. Ориентация медицины исключительно на больных людей. Культ болезней. 2. Рост заболеваемости детей и подростков в 2008г.: к 8 классу увеличение патологии опорно-двигательного аппарата в 10 раз, ЦНС –15 раз. 3. Здоровье трудоспособного населения: ежедневно не выходят на работу 3 млн. человек; 25 млн. находятся на работе в пред- или пост — болезненном состоянии. «… система здравоохранения ориентирована на борьбу с уже возникшими заболеваниями и объективно не способна радикально улучшить состояние здоровья.» Основная направленность – не лечение, а восстановление здоровья и недопущение развития болезни, прежде всего за счет … питания. ПРИЧИННО-СЛЕДСТВЕННЫЕ ФАКТОРЫ ЗАБОЛЕВАНИЙ В современных условиях невозможно установить ни точный состав загрязнителей, ни величину загрязнения, Поскольку, с одной стороны, не все вещества учитываются и определяются контролирующими органами, а с другой – ряд химических веществ не имеет предельно допустимых концентраций (ПДК) и, следовательно, вообще не контролируется (Сидоренко Г.И., Кутепов Е.Н. Проблемы изучения состояния здоровья населения // Гиг. И сан. – 1994. — №8. – С. 3-5). «Скрытые проявления гигиенических (в том числе, химических) нарушений могут часто имитировать клинику ряда воспалительных заболеваний, вирусных инфекций, иммунопатологических процессов, хронических заболеваний соединительной ткани, включая ревматоидный артрит и другие» (В.Г. Маймулов, 2000) Кроме того, в результате взаимодействия химических веществ, в том числе, в процессе обмена в организме человека, образуются новые соединения, и, в целом, на человека действуют смеси веществ, состав, характер действия которых неизвестны. В целом, за последние 100 лет в биосферу было внесено громадное количество химических веществ, около 4 миллионов из них признаны потенциально опасными, а свыше 180 тысяч обладают выраженным мутагенным действием (Е.В. Олейникова, 2005). Очевидно, что в данном случае совершенно бессмысленно пытаться направленно «полечить» возникшее заболевание или использовать специфические для симптомов(!!!) биологически активные вещества, в том числе, в составе БАД к пище, поскольку они не будут действовать на причину возникновения заболевания (которую и определить невозможно!). «…рост хронических заболеваний человека есть форма приспособления организма к неблагоприятным факторам окружающей среды на популяционном уровне» (И.В. Давыдовский, Общая патология человека. – М.: Медицина, 1963. – 611 с.). ГИГИЕНА ВНУТРЕННЕЙ СРЕДЫ О Б Я З А Т Е Л Ь Н А  К  И С П О Л Н Е Н И Ю 1. Реабилитация околоклеточного пространства (выведение «отходов» обмена и чужеродных веществ) 2. Катализ (активизация) обмена – помощь в преодолении негативного влияния внешних факторов 3. БАС – поставка биологически активного сырья ОСНОВА ВСЕХ ЭТАПОВ ГИГИЕНЫ – ПИЩЕВОЙ ФАКТОР! А. РЕАБИЛИТАЦИЯ ОКОЛОКЛЕТОЧНОГО ПРОСТРАНСТВА (РОП) 1. Выведение вредных веществ. В случае нарушения данной функции, «таможня» «не выпустит» вредные вещества, скопившиеся вокруг клетки; 2. Поступление полезных веществ. При нарушении данной функции, «таможня» «не пропускает» к клеткам полезные вещества, которые Вы употребили с пищей , независимо от их биологической доступности и активности; 3. «Погрузка» выработанных «клеткой-фабрикой» веществ, необходимых для устранения нарушений, регуляции работы различных органов; 4. Улучшение/нормализация работы лимфатических сосудов (в том числе, свойств их стенки). При неполноценной работе лимфатических сосудов, те удаленные от клеток «отходы», которые в них транспортируются, могут не дойти до места их переработки, «просыпаться по дороге»; 5. Нормализация лимфы. Является важным для доставки и распределения полезных веществ и «сортировки» вредных; 6. Восстановление работы лимфоузлов. Является важным пунктом, учитывая, что они играют роль «минизаводов» по переработке «отходов» и «казармами» для клеток иммунной системы, а также принимают на себя «удар» при интоксикациях, инфекционных процессах; 7. Регуляция работы клапанов лимфатических сосудов. Данный процесс призван обеспечить направленную доставку и «введение» произведенных «клетками-фабриками» регуляторных веществ именно в те органы и ткани, в которых они должны действовать, не позволяя им «проехать мимо» того органа, работу которого эти вещества призваны нормализовать. Б. КАТАЛИЗ 8. катализ «производства» специализированными «клетками-фабриками» строго определенных веществ, необходимых для устранения существующих нарушений («включение определенных конфорок при определенных нарушениях»); 9. Катализ «отключения» (либо снижения активности) работы «клеток-фабрик» — систем, вырабатывающих вещества, поддерживающих в организме (органах) развитие нарушений. Пример взаимосвязи Катализа и реабилитации околоклеточного пространства (РОП). ¡ Печень – мощный лимфопродуцирующий орган. При активном «загрязнении» околоклеточного пространства необходимо катализировать «производство» печенью большого количества нормальной лимфы, которая «транспортирует» токсины от каждой клетки в места их «переработки». ¡ Лимфатический узел – структура, в которой происходит катализ (активация) ферментов, «перерабатывающих» токсины, «принесенных» лимфой. ¡ Ферменты из крови попадают в лимфу и лимфоузлы – там активируются – идут обратно в кровь, в клетки – где необходима их работа и помощь. Очень яркий пример-сравнение внутренней гигиены организма человека и внутренней гигиены двигателя автомобиля. За авто мы следим: меняем масло, фильтры. Стараемся заливать качественный бензин, необходимые ингредиенты для работы двигателя. И если какие-то неполадки – бежим в сервис к специалистам. Почему же к своему организму у большинства людей такое отношение!!! Едим что попало , пьем воду без всяких санитарных норм (хотя наш организм на 90 % состоит из воды). В. ПОСТАВКА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО СЫРЬЯ График калорийности питания, потребности в витаминно-микроэлементных комплексах и пищевой ценности продуктов в XX – XXI веке За последние 30-50 лет, продукты – источники питательных веществ, снизили содержание витаминов и минералов. n Капуста «потеряла» 85% Са, 81% Fе n Яблоки – 40% Fе 42,5% витамина С, 41% витамина А n Говядина – 100% витамина А, 68% ПНЖК, 36% Fе  Для удовлетворения суточной потребности ребенка в питательных веществах, необходимо употреблять:n Для восполнения кальция – не менее 1 литра молока или 3 кг моркови, или 10 кг говядины; n Витаминов В1 и В6 – 1 кг черного хлеба или 400-500 г нежирного мяса; n Витамина С – 1 ведро яблок, 4-5 лимонов или 1,5-2 кг моркови. Дефицит витаминов и минералов у детей: витамина С 63-89% Zn 80-100% витамина А 27-38% Fе 91% витамина В1 21-96% J 29-75% витамина В2 27-53% Ca 33% Фолиевой к-ты 69-80% Mg 7% P 45% 10. Совместимость. Вещества, содержащиеся в используемых средствах, должны быть сочетаемы, а не угнетать, нарушать свойства друг друга. Данный аспект является рекламным ресурсом производителя, распространителя и не контролируется в обязательном порядке, поскольку не представляет опасности для потребителя, но может привести к отсутствию пользы. Компоненты, угнетающие действие основного вещества, могут образовываться, либо вноситься при производстве, содержаться в качестве примеси и не указываться на этикетке. Определяется в процессе 2 этапа экспертной оценки. 11. Усиление. Компоненты средства должны усиливать действие друг друга. Иначе результат действия средства может быть недостаточно выраженным, либо непродолжительным. Данный аспект является рекламным ресурсом производителя, распространителя и не контролируется в обязательном порядке, поскольку не представляет опасности для потребителя, но может привести к недостаточной выраженности ожидаемого эффекта. Определяется в процессе 2 этапа экспертной оценки. Бесконтрольное применение средств, которые не избирательно поставляют в организм микро-, макроэлементы требует обоснования. Передозировка даже таких элементов как медь, цинк, йод может привести к тяжелым нарушениям. l Дефицит селена в почве и пищевых продуктах – кардиомиопатия, остеопатия и др.;  l — Избыток селена в пищевых продуктах – разобщение фосфорно-кальциевого обмена, эмбритоксическое и мутагенное действие; l — Дефицит кальция в почве и пищевых продуктах – дисфункция щитовидной железы, нарушения функции мышечной ткани и др.; l — Избыток кальция в пищевых продуктах, воде – аналогично симптомам дефицита; l — Дефицит цинка в пищевых продуктах – нарушение иммунной защиты, роста и развития ребенка и др.; l — Избыток цинка в пищевых продуктах – повышение риска развития онкологических заболеваний;l — Избыток молибдена – подагра; l — Дефицит марганца – нарушение работоспособности, антиоксидантной защиты; l — Избыток марганца – паркинсонизм; l — Избыток белково-витаминные концентраты – аллергические заболевания;l — формальдегид, бенз(а)пирена, фенола, диоксида азота – врожденные пороки развития; l — метилртуть – поражение нервной системы; l — микотоксины в сочетании с некоторыми биологически активными элементами – желтухи неясной этиологии; l — Избыток кадмия в зерне, выращенном на загрязненных почвах – поражение опорно-двигательного аппарата; Это лишь примеры тысяч причин, влияющих на возникновение заболеваний. НОРМЫ ГУ НИИ питания РАМН содержания биологически активных веществ в БАД к пище – не более 30% от суточной потребности – НЕ НАВРЕДИ СЕБЕ ИЗ-ЗА РЕКЛАМЫ И НЕЗНАНИЯ. Для точного определения потребности организма в микро-макроэлементах, витаминах и минералах, используется диагностика нового поколения (такая как : «Странник», «Оберон», гемосканирование и т.д.) , которая определяет отклонения в работе всех органов и систем . Данную диагностику необходимо проходить не менее двух раз в год. По результатам диагностики рекомендуется реабилитационная программа по функциональному питанию, основанная на Стандартных диетах и СПП, указанных в «Методических рекомендациях», утвержденных Научным Советом по медицинским проблемам питания РАМН и Минздравсоцразвития. В рамках данной системы осуществляется добровольное сертифицирование продукции, соответствующей установленным стандартам программы «Здоровое питание – здоровье нации». Развитие данного направления, осуществляется Центрами оздоровительного питания программы «Здоровое питание – здоровье нации» под единым методическим руководством Научного Совета по медицинским проблемам питания РАМН и Минздравсоцразвития РФ. Принципы ГИГИЕНЫ питания ПРЕИМУЩЕСТВО И ОТЛИЧИЕ ОТ РАСПРОСТРАНЕННЫХ РЕКОМЕНДАЦИЙ БАДов ГИГИЕНА = ОПС + КПД ОПС – оценка пищевого статуса КПД – коррекция пищевой деятельности 1. Прежде чем использовать средства лечебного питания – необходимо провести ОЦЕНКУ ПИЩЕВОГО СТАТУСА (ГУ НИИ питания РАМН, 2004) 2. Коррекция пищевой деятельности проводится средствами, прошедшими экспертную оценку и входящими в утвержденные методические рекомендации (Научный Совет по медицинским проблемам питания РАМН и Минздравсоцразвития, 2004). ПРИЛОЖЕНИЕ 7.  Сопоставительная цитотоксическая активность экстрактов косметических средств (фрагменты статьи) В работе представлены результаты сопоставительного определения токсичности экстрактов косметических средств с использованием перевиваемых культур клеток в качестве тест – систем. Предложено использовать параметры цитотоксической активности экстрактов косметических препаратов для оценки качества композиций общего направления “anti-age’ (питание, регенерация и т.п.)  — по мотивам [4].Проблема перехода от использования животных, в качестве тест – объектов, для оценки токсичности разнообразных препаратов и индивидуальных веществ к тестированию на культурах клеток является основным направлением деятельности специально созданного в 1991 году (см. [57]) Европейского центра по ратификации альтернативных методов — ECVAM , а также ECVAN scientific Advisory Committee — ESAC  (см.- ECVAM’s Web site). В 2000 г методики оценки, основанные на моделировании человеческой кожи были включены в «Annex  V. Part B.40on Skin Corrosion» в тексте Директивы 67/548/EEC по классификации, упаковке и этикетированию опасных субстанций [58]. Не затрагивая морально — этические аспекты этой проблемы, относящиеся к защите животных, необходимо подчеркнуть, что в некоторых случаях логическая обоснованность такого перехода является неизбежной. Так, применительно к задачам косметологии, если не принимать во внимание весьма странные представления о «мертвых структурах кожи» в качестве основных объектов воздействия косметологических средств (см., например, [59]), то можно полагать, что именно использование клеточных тест – систем позволяет выявлять особенности взаимодействия ингредиентов косметических препаратов с клеточными структурами кожи [1]. Под эгидой ECVAM выпускаются официальные бюллетени по методикам оценки влияния индивидуальных веществ химического и природного происхождения на раздражение глаз [60], кожи [61], и разрушения (коррозии) кожного покрова  [62] с использованием клеточных тест — систем. Фактически упоминаемые выше и другие публикации направлены на оценку цитотоксической активности и предельно допустимых концентраций только индивидуальных веществ. Следует заметить, что особый интерес для потребителей косметических средств может представлять оценка качества готовых к применению препаратов, предназначенных для  сохранения кожи в хорошем состоянии. Однако, с одной стороны, применительно к многокомпонентным системам, какими обычно являются косметические средства, возникают вопросы, связанные с методическими аспектами суммирования экспериментально определяемых величин  цитотоксической активности индивидуальных ингредиентов, с учетом возможных проявлений синергетических эффектов. С другой стороны, на клеточных тест – системах показано [1], что необходимые для полноценного функционирования клеток макроэлементы (смесь солей натрия, калия, кальция, магния) и глюкоза в обязательном порядке, включаемые в составы питательных сред для культивирования клеток в концентрациях и соотношениях, близких к физиологическим, при повышении   содержания в питательной среде ухудшают состояние клеточных систем, вплоть до их полного уничтожения. Таким образом, необходимые для функционирования клеточных систем ингредиенты при повышении концентраций могут вносить существенный вклад в цитотоксические эффекты. Проведенные исследования свидетельствуют о том, что значения предельно допустимых концентраций указанных ингредиентов определяются их вкладом в суммарную величину осмотической активности, которая и вызывает цитотоксический эффект питательной среды. Изучение влияния  групповых добавок аминокислот и витаминов, а также индивидуальных микроэлементов (ионы железа, цинка и меди) выявило наличие «спецэффектов», повышающих цитотоксическую активность питательных сред, минимально в19 раз (для смеси 14 аминокислот), примерно в 360 раз (для смеси 8 витаминов группы В) и максимально в 1732 раза (для хлористого цинка)  по сравнению с величинами, определяемыми только осмотическим воздействием. Рассмотрение осмотических эффектов некоторых косметических препаратов приводится в следующем разделе.Как ранее уже отмечалось в отношении индивидуальных витаминов и их смесей медицинская практика свидетельствует об опасности  избыточной витаминизации организма (гипервитаминоз). Поэтому наблюдаемое отрицательное проявление гипервитаминоза на клеточном уровне не является удивительным. Тем более, что в более ранних работах было показано, что витамин Е, аналогично селениту натрия, N-ацетилцистеину и другим веществам, обладающим антиоксидантным действием, в концентрации 10-7-10-6 моль/л  защищают от индукции сестринских хроматидных обменов в клетках яичников китайского хомячка, а при повышении концентрации до 10-4 моль/л, наоборот, ускоряют этот неблагоприятный для клеток процесс [63]. Из-за отсутствия подходящих данных   сложнее обосновать наличие «спецэффекта», наблюдаемого на клеточном уровне для высоких концентраций смеси L-аминокислот. Однако, результаты наших экспериментов, приводимых в работе [1],  свидетельствуют о том, что известный принцип «кашу маслом не испортишь» не должен использоваться в клеточной биотехнологии и, по-видимому, в косметологии и бальнеологии тоже.Таким образом, суммарная цитотоксическая активность готовых к применению косметических средств может зависеть не только от присутствия в их составах токсичных  ингредиентов, но и от концентраций (возможно, и от соотношений) веществ, которые принимают участие в функционировании клеточных систем: макро- и микроэлементов, аминокислот, витаминов, углеводов и т. д. На наш взгляд, с высокой степенью вероятности можно полагать, что косметические композиции, предназначенные для поддержания кожи в хорошем состоянии, должны создавать комфортные условия для функционирования клеточных систем кожи. Это обстоятельство позволяет сформулировать один из основных  критериев для оценки их качества – «фактическое отсутствие проявления токсичности на клеточном уровне – цитотоксической активности, вне зависимости от её происхождения».Для решения этой задачи были использованы два варианта методики оценки цитотоксической активности готовых косметических препаратов  на клеточных тест – системах. В представленных ниже таблицах приведены результаты оценки токсичности препаратов, которые из-за высокой цитотоксической активности (более 30%) могут быть отнесены к косметическим средствам первого поколения.Подготовка образцов для оценки цитотоксической активности косметических средствИсходные препараты доставлялись из разных регионов, страны  в основном, в виде пробников («саше») с помощью участников Научного косметологического общества.Образцы готовили экстракцией ингредиентов косметических средств органическими растворителями — спирт этиловый (ректификационный из пищевого сырья, ГОСТ З 51652-2000) и/или диметилсульфоксид  (хч, ТУ 6-09-38-18-89). Навеску образца в количестве 1 г встряхивали с 9 г органического растворителя, полученную смесь отстаивали и/или фильтровали через бумажный фильтр. Цитотоксическую активность полученных экстрактов оценивали с помощью методик, основанных на определении количества выживших/погибших клеток после воздействия экстрактивных веществ, извлекаемых органическими растворителями из исследуемого препарата (тест на цитотоксическую активность).Методика А (планшетный вариант с окрашиванием клеток)Стандартные клетки перевиваемой линии Vero (культура клеток почки зеленой мартышки),  полученной из музея клеточных культур ФГУН ГНЦ ВБ “Вектор”, выращивали в лунках плоскодонных 96-луночных планшетов. В ростовую питательную среду Игла ДМЕМ, содержащую 10% сыворотки крови крупного рогатого скота над  полностью сформированным слоем клеток добавляли серийные разведения экстрактов исследуемых препаратов в концентрациях от 0.001 до 6-10%. Обработанные клетки инкубировали при 370 С в течение 72-96 часов. После инкубации в ячейки вносили прижизненный краситель (нейтральный красный) в течении 1,5-2 часов. Затем клетки разрушали (лизировали), а количество выживших клеток определяли косвенно по количеству связанного с живыми клетками красителя. Интенсивность окрашивания раствора определяли на планшетном спектрофотометре при длине волны 490 нм на планшетном спектрофотометре Emax (Molecular Devices, США).и строили графики зависимости оптической плотности от концентрации исследуемого препарата — программа SoftMax Pro 4.0, `Molecular Devises, США) которая автоматически рассчитывала 50%-ную токсическую концентрацию добавки (TC50 – уничтожение клеточной популяции на 50%). В некоторых случаях величину TC50  определяли графическим способом. В качестве дополнительного критерия цитотоксической активности использовали процент уничтоженных клеток при концентрации добавляемого экстракта – 1%. Точность оценки количества живых клеток по данной методике обычно составляла ±10%.Методика Б (с подсчётом живых клеток в камере Горяева)В данной методике цитотоксическую активность препаратов оценивали на клеточной культуре 4647 (клетки почки африканской зеленой мартышки), полученной из музея клеточных культур ФГУН ГНЦ ВБ “Вектор”. Клетки пассировали на питательной среде Игла МЕМ с внесением 5% сыворотки крови плодов коровы производства фирмы «HyClone».Клеточную культуру рассевали во флаконы с посевной концентрацией 1×105 клеток/мл ростовой среды. После выдерживания в течение 3-4 суток при температуре  37˚С, питательную среду меняли новые порции, содержащие экстракты в концентрациях 0.5; 1.0 иди.2.0%. Через 3-4 суток выдерживания в аналогичных условиях определяли с помощью камеры Горяева  количество сохранившихся клеток с оценкой соотношения индексов пролиферации ИПоп и ИПконтроль. Стандартная точность оценки количества живых клеток с применением камеры Горяева составляла ±20%. Результаты и обсуждение  При обсуждении результатов, полученных с применением методики А, в качестве основного параметра, характеризующего цитотоксическую активность экстрактов косметических средств, приняты величины концентраций экстрактов, которые приводят к  уничтожению клеточной популяции  на 50% после выдерживания клеток в питательной среде с добавками  – величины TC50, измеряемые в процентах.  На рис.  (цитотоксическая активность) представлена типичная кривая, построенная с помощью специальной программы в соответствии с  методикой (А) – планшетный вариант с окрашиванием клеток, для спиртового экстракта, полученного из крема для лица ProBiocosmetics (фирма «Артлайф», Россия) На вертикальной оси графика откладываются значения оптических плотностей при длине волны 490 нм, соответствующие количеству живых клеток, сохранившихся в плоскодонных лунках планшета, в зависимости от концентрации добавляемого экстракта – горизонтальная ось (%). В связи с аномально высоким  значением коэффициента С (в норме соответствующего значению TC50 ), рассчитанного для данного набора точек по уравнению, приведенному под графиком, величцна искомого параметра определена графическим способом и оказалась равной ~0.6% в табл. 20.  Рис. 5. Токсичность косметических средств

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 
Для данной кремовой композиции параллельно исследовали экстракт, полученный с использованием диметилсулфоксида (дмсо). В этом случае значения величин TC50, по-видимому, из-за различий в сольватирующей способности дмсо и спирта существенно отличались. Полученное в этом случае значение TC50 оказалось, равным 0.3%. Поэтому в случае такого рода неоднозначных оценок в качестве основного параметра для определения цитотоксической активности  экстрактов косметических препаратов предлагается использовать усредненные величины TC50 (см. табл. 20, столбец 4). Дополнительным параметром для оценки цитотоксической активности экстрактов косметических средств предлагается использовать долю погибших клеток, измеряемую в процентах при добавлении 1% экстракта. Обозначим этот параметр символом ТД1% (см. столбец 5 в табл.1 — цитотоксичность). По аналогии с TC50, при использовании параллельно двух растворителей полученные значения целесообразно усреднять (см. столбец 6 в табл. 1 — цитотоксичность). Из представленного рисунка следует, что количество живых клеток после их выдерживания в питательной среде с экстрактом крема ( в спирте) в количестве 1% приводит к гибели клеток на 75%.Таблица 20 Цитотоксическая активность экстрактов косметических средств, определяемая по методике А

№п/п Наименование косметической композиции ТС50(растворители – спирт идмсо) ТС50среднее значение Доля погибших клеток с 1% экстракта ТД1%, % ТД1%, % среднее значение Фирма, страна
1 Антицеллюлитный гель 1 ~ (спирт)1 ~ (дмсо) 1 ~ 3738 37.5 Клеточные технологии,Россия
2 Sanosan  Лосьон увлажняющий для младенцев. 1> (спирт) 1 > 37 37 Манн & Гмбл.Информация отсутствует
3 Aloe mousturizing. Lotion (дмсо) 0.1 39 39 Forever living Products Aloe Vera  America, Inc
4 OLAY total effect 7x . ночной крем 1~ (спирт)0.5 (дмсо) 0.75 ~ 41 44 42.5 P&G,США
5 ProBiocosmetics  Флюид очищающий. 1~ (спирт)0.9 (дмсо) 0.95 ~ 4667 56.5 Артлайф,Россия
6 Aloe propolis cream 0.74 (дмсо) 0.74 68 68 Forever living Products Aloe Vera  America, Inc
7 Крем питательный «Идеал» 0.5 ~ (спирт)0.86 (дмсо) 0.68 ~ 3499~ 66.5 Концерн Калина, Россия
8 Ультра-лифтинг. Дневной крем от морщин 0.28 (спирт)0.5 ~ (дмсо) 0.39 ~ 5879 68.5 GARNIER, Франция
9 Крем на основе плаценты свиньи «Стволин» 0.5 ~ (спирт)1 ~ (дмсо) 0.75 ~ 54 91 72.5 Клеточные технологии, Россия
10 Anti – wrinkle cream 0.57 (дмсо) 0.57 78 78 Dolmen a dead sea product, Иордания
11 Дневной крем «День» 0.24 (сптрь)0.17 (дмсо) 0.20 6387 75 Ситерна, Россия
12 Восстанавливающий крем для лица ночной 0.31 (спирт)0.26 (дмсо) 0.28 7689 82.5 Эвелин Косметикс, Польша
13 Крем для лица ProBiocosmetics 0.6 ~ (спирт)0.3 ~ (дмсо) 0.45 ~ 7696 86 Артлайф, Россия
14 Гель для кожи вокруг глаз «Silk Touch» SPF 10 0.45~ (спирт)0.16 ~ (дмсо) 0.3 91 91 Biotherm, Франция
15 Крем тонизирующий серия «Пять источников совершенств» 0.31 (спирт)0.26 (спирт) 0.310.26 939и 93.5 Тринити-М, Россия
16 Крем 0.3 ~ (спирт)0.05 (дмсо) 0.17 ~ 8990 89.5 MARY KAY, США
17 Ночной питательный крем «Эрилем – ретро»
с экстрактом плаценты человека
0.28 (дмсо) 0.28 95 95 Тринити-М, Россия
18 Aloe Jojoba conditioning Rinse 0.1 (дмсо) 0.1 96 96 Forever living Products Aloe Vera  America, Inc.США
19 Корректор мимических морщин. Дневной крем 0.5 (спирт)0.11 (дмсо) 0.3 10095 97.5 Эвелин Косметикс, Польша

Приведенные в табл. 20 данные свидетельствуют о симбатных изменениях измеряемых величин ТС50  и ТД1%, за исключением случаев, которые могут объясняться более пологой формой фиксируемых кривых или некоторой неопределенностью в оценке основного параметра – ТС50. Используемые при этом названия кремовых композиций (питательный; anti-wrinkl; дневной крем от морщин; корректор мимических морщин и т.п.), как минимум, могут вводить покупателя в заблуждение. Результаты исследований с применением методики Б приведены в табл. 2 (цитотоксичность). В этом варианте основным критерием для оценки цитотоксической активности являются величины ТД1%, отражающие количество клеток, уничтоженных в процессе их обработки экстрактами испытуемых препаратов с использованием органических растворителей (спирт и/или дмсо). Таблица 21 . Цитотоксическая активность экстрактов косметических средств, определяемая по методике Б

№п/п Наименование косметической композиции Индексы пролиферации -ИП опыт (ИП контроль) Доля погибших клеток с 1% экстракта — ТД1%,  % ТД1%, % среднее значение Фирма, страна
1 Сыворотка для шеи и области декольте 2,5±0,2(3,6±0,3) 31 (спирт) 31 Avon,Польша
2 НКО-АКС №10 1,8±0,2  (3,8±0,1)3,4±0,2  (3,8±0,1) 52.6 (спирт)10.5 (дмсо) 31,5 ~ ЛНЕО,Россия
3 Для век и лица. 2,4±0,1(3,6±0,3)2.4±0,1(3,6±0,3) 33.3 (спирт)33.3 (дмсо) 33,3 Новое время,Украина
4 Olive oil cream. 2,6±0,2(3,6±0,3)2,1±0,2(3,6±0,3) 27.8 (дмсо)41.7 (спирт) 34,7 Lambre,EU (Англия)
5 Retin-OX. 2,3±0,2(3,6±0,3) 36.1 (дмсо) 36,1 ROC.Франция
6 Крем-сыворотка для рук 3,2±0,1  (5,3±0,2) 39.6 (дмсо) 39,6 Natura Siberica.,Россия
7 Омолаживающий мезококтейль. 2,6±0,2  (4,4±0,1) 40.9 (спирт) 40,9 ??????
8 SPA- маска с парафином для ухода за кожей рук и ног 2,2±0,2  (4,4±0,1) 50 (дмсо) 50 AVON,США
9 Ночной крем для лица энергия молодости 1,7±0,1  (4,4±0,1) 61.4 (спирт) 61,4 Faberlic.Россия
10 Меликонс 1,2±0,2  (3,6±0,3) 66.7 (дмсо) 66,7 Вятский агроконцернРоссия
11 Shain. Whitening & Regenerating Collagen Mask. 2,5±0,2  (3,8±0,1)через сутки всплыли 34.2 (спирт)100 ~ (дмсо) 67,1 ~ ??????
12 Малавтилин. Крем для лица и тела 1,0±0,1  (3,8±0,1)- дегенерация;1,6±0,1  (3,8±0,1) 100 ~ (спирт) 57.9 (дмсо) 78,9 ~ ООО ЛДФ «МЕДИК», Россия
13 Крем мгновенная красота ГибельГибель 61.5 (спирт)100 (дмсо) 80,7 Глорис,Россия
14 Hydro Active. Hand Cream Гибель 1,7±0,1  (5,3±0,2) 100 (спирт)67.9 (дмсо) 84 Lambre,EU (Англия)
15 Body Corp ГибельГибель 100 (спирт)100 (дмсо) 100 Renew you Англтя
16 CERA WRAZLIWA. Sensitiv Skin Гибель 100 (дмсо) 100 ???..Польша
17 Essential Anti-ageing complex ГибельГибель 100 (спирт)100 (дмсо) 100 LA DANZA,Швейцария
18 EYE Cream. Крем вокруг глаз. Змеиное масло через 1 сутки всплыли;Гибель 100 (спирт) 100 (дмсо) 100 EVELINE,Польша
19 Fond de teint anti-rides cream ГибельГибель 100 (дмсо)100 (дмсо) 100 ROCФранция
20 Multi vitamin nail  and cuticle cream Гибель 100 (спирт) 100 Oriflame,Польша, Швеция)
21 Renew you. Body Corps. Anti Cellulite ГибельГибель 100 (спирт)100 (дмсо) 100 Информация отсутствуетАнглия
22 ROC. Fond de teint anti-rides cream Гибель 100 (спирт) 100 ROC,Франция
23 SKIN NATURALS ГибельГибель 100 (дмсо)100 (спирт) 100 GARNIER,, Польша, Франция
24 Крем для ухода за кожей вокруг глаз через 1 сутки всплыли;Гибель 100 (спирт)100 (дмсо) 100 Эвелин Косметикс,Польша
25 Лсьон для тела. ANEW Clinical Гибель 100 (дмсо) 100 AVON, Польша
26 Молочко для тела ежедневное восстановление ГибельГибель 100~ (спирт)100 (дмсо) 100 ~ NEUTROGENA., Норвегия
28 Ночной крем ГибельГибель 100 (спирт)100 (дмсо) 100 Olay. Age defyingРоссия
29 Питательная восстанавливающая маска ГибельГибель 100 (спирт)100 (дмсо) 100 ???Россия
30 Подтягивающий и укрепляющий лосьон для тела Гибель 100 (дмсо) 100 ANEW Clinical АVON, США
31 Серия ANEW. Clinical Advanced wrinkle corrector Гибель 100 (дмсо) 100 AVON.Полюша
32 Солнце-защитный крем-спрей.SPF-15 ГибельГибель 100 (спирт)100 (дмсо) 100 Мирра,Россия
33 Средство из плаценты овцы ГибельГибель 100(спирт)100 (дмсо) 100 SHEEPS PRIME.???
34 Усиленное питание. Маска – интенсив. Бира Гибель 100 (дмсо) 100 ООО ЛДФ МедикРоссия

Полученные результаты подтверждают однотипность применяемых методик (А и Б) и позволяют подчеркнуть, что использование изученных препаратов может отрицательно отражаться на функционировании клеточных систем кожи и, соответственно, их применение для сохранения кожи в хорошем состоянии является нецелесообразным. Как правило, они содержат в составах в качестве консервирующих добавок не присутствующие в природе химически синтезированные вещества. Следует отметить, что даже названия некоторых из изученных косметических средств также могут вводить потребителя в заблуждение. Поэтому все рассмотренные в таблицах 1 и 2 (цитотоксическая активность) препараты условно следует относить к косметическим средствам первого поколения.                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                ПРИЛОЖЕНИЕ 8. Цитотоксическая активность спиртовых экстрактов растенийЭкстракты готовили по стандартной методике — измельчение в спирте. Цитотоксическая активность спиртовых экстрактов растений варьирует в значительно большем интервале концентраций по сравнению с эфирными маслами. Результаты исследований и расчетов Сопт и Смакс представлены в нижеприведенной таблице.Таблица. Результаты определения цитотоксической активности спиртовых экстрактов растений

№ п/п Название препарата С, исх (%) ТС10 (%) Сопт (%) Смакс (%)
1 2 3 4 5
1 Ветреница алтайская 40.0 0,0033 0,0030 0,0046
2 Кедровый стланник ??? 0,0034 0,0031 0,0047
3 Тополь почки (эксп. 1), (эксп. 2),                       (эксп. 3) 34.3/10, 40,0/10, 40,0/100 0,0038, 0,0060, 0.8 0,0034, 0,0054, 0.72 0,0051, 0,0081,  1.08
4 Лютик едкий массовое цветение 33.3 0,0052 0,0047 0,0070
5 Ветреница 0,0071 0,0064 0,0096
6 Пион или Марьин корень,
цветы и листья
40.0 0,0094 0,0085 0,0127
7 Лютик однолистный 40.0 0,0098 0,0088 0,0132
8 Чай зелёный «Ахмат» 40,0 ~0,01 0,0090 0,0135
9 Какалия копьевидная 34.3 0,0137 0,0123 0,0185
10 Пихта сибирская углекислотный экстракт 26.44 0,0141 0,0127 0,0190
11 Ветреница голубая (анемона) 40.0 0,0161 0,0145 0,0217
12 Лимонника масло углекислотный экстракт (верхний слой) 16.67 0,0180 0,0162 0,0243
13 Береза листья СО2 экстракт 5.0 0,0184 0,0166 0,0249
14 Герань лесная соцветия с листьями и стеблем 40.0 0,0205 0,0185 0,о277
15 Тополь лист молодой клейкий 40.0 0,0215 0,0194 0,0291
16 Земляника лесная (лист и цвет) 33.3 0,0231 0,0208 0,0312
17 Хвощ лесной (песты) 40.0 0,0259 0,0233 0,0349
18 Береза лист молодой 40.0 0,0278 0,0250 0,0375
19 Тополь кора 25.0 0,0286 0,0257 0,0385
Сухой экстракт ягод жимолости (производство фирмы КиТ, Бийск) 40,0 0,03 0,027 0,0405
20 Реброплодник уральский 40.0 0,0328 0,0295 0,0442
21 Смородина листья СО2 экстракт меньше 5.0 0,0346 0,0311 0,0466
22 Береза лист молодой 40.0 0,0396 0,0356 0,0484
23 Ветреница вильчатая 40.0 0,0414 0,0372 0,0507
24 Грибы трубчатые на березе 14.3 0,0541 0,0487 0,0730
25 Ангелика (дудник лесной)
цветы и стебли растения с листьями
40.0 0,0727 0,0654 0,0981
26 Осина соцветия 33.3 0,0778 0,0700 0,1050
27 Осина соцветия 33.3 0,0847 0,0762 0,1081
28 Душица листья с цветами 40.0 0,0927 0,0834 0,1251
Промышленный сухой экстракт череды (фирма КиТ — Бийск) 10.0 ~0,1 (дети) — 0,05 0,09

0,045

0,13500,0675
29 Бадан толстолистный
(черн., листья)
густой водный экстракт
Нас. Раствор в спирте 0,1056 0,0950 0,1425
30 Гравилат речной 40.0 0,1143 0,1032 0,2048
31 Синюха голубая ??? объем 0,1153 0,1038 0,2057
32 Калина обыкновенная густой водный экстракт ??? 0,1525 0,1373 0,2060
33 Мальтол Нас. р-р ~4.0 0,1527 0,1375 0,2062
34 Володушка золотистая ??? 0,1582 0,1433 0,2149
36 Черемуха почки 33.3 0,1626 0,1463 0,2194
36 Гравилат алепский, начало цветения 40.0 0,1660 0,1494 0,2241
37 Лимонника масло, углекислотный экстракт (верхний слой) 1.67 0,1672 0,1505 0,2257
38 Ива трехтычинковая женская  — пестики на ножке 40.0 0,1673 0,1506 0,2258
39 Синюха голубая, верхняя часть, цветы, листья стебель 40.0 0,1775 0,1598 0,2397
40 Ива грушинколистная женская 40.0 0,1789 0,1611 0,2416
41 Чага                               Расчитанные значения 20,0, 40,0 0,1799, 0,0899 0,1620 0,2430
42 Осина лист молодой клейкий 40.0 0,1808 0,1627 0,2440
43 Ветреница лесная 40.0 0,1809 0,1628 0,2442
44 Проломник нитевидный или северный 33.3 0,1813 0,1632 0,2448
45 Вороний глаз четырехлистный 40.0 0,1819 0,1638 0,2457
46 Ива пепельная  мужская листья с выпуклым рисунком 33.3 0,1828 0,1645 0,2467
47 Лимонника  углекислотный экстракт (нижний водный слой) 20.0 0,1836 0,1652 0,2479
48 Пихта сибирская углекислотный экстракт 0.57 0,1892 0,1703 0,2554
49 Ива пепельная женская 33.3 0,1927 0,1734 0,2601
50 Череда, сухой экстракт (КиТ, г. Бийск) 10 0.2 0.18 0.27
51 Ива трех тычинковая женская 33.3 0,2033 0,1830 0,2745
52 Верба цветы ??? 0,2080 0,1872 0,2808
53 Рябина с бутонами соцветий 40.0 0,2261 0,2035 0,3052
54 Фиалка одноцветковая 40.0 0,2327 0,2094 0,3151
55 Черемуха листья 40.0 0,2381 0,2143 0,3214
56 Смородина с цветами объем 0,2535 0,2282 0,3423
57 Полипренолы Нас. р-р
~ 8%
0,2666 0,2400 0,3600
58 Лютик ползучий 40.0 0,2728 0,2455 0,3678
59 Имбиря корень 40.0 0,2766 0,2489 0,3733
60 Ива козья ??? 0,2898 0,2608 0,3912
61 Горошек заборный 33.3 0,2999 0,2700 0,4050
62 Промышленный сухой экстракт ягод рябины черноплодной (фирма КиТ, Бийск) 10,0 0,30 0,27 0,4050
63 Яблоня ягодная, цветы и листья 40.0 0,3166 0,2849 0,4274
64 Кедровая скорлупа 17.3 0,3351 0,3016 0,4524
65 Осока дернистая с соцветиями 40.0 0,3399 0,3059 0,4588
66 Смородина листья 40.0 0,3674 0,3307 0,4960
67 Подорожник объем 0,3756 0,3380 0,5071
68 Котовника семена 40.0 0,3946 0,3551 0,5327
69 Лопух листья объем 0,4077 0,3669 0,5504
70 Ива пепельная мужская 33.3 0,4155 0,3739 0,5609
71 Черника 39.89 0,4244 0,3820 0,5729
72 Крапива молодые листья ??? 0,4271 0,3844 0,5766
73 Фиалка волосистая 40.0 0,4346 0,3911 0,5867
74 Борщевик рассеченный или Борщевик сибирский ??? 0,4364 0,3918 0,5877
75 Жимолость цветы с листьями ??? 0,4441 0,3997 0,5995
76 Грибы сморчки объем 0,4501 0,4050 0,6075
77 Персиковое масло (ядер) <1 0,4614 0,4153 0,6229
78 Брусника 39.0 0,4863 0,4377 0,6565
79 Калина обыкновенная цветы 40.0 0,5066 0,4559 0,6839
80 Калужница болотная 40.0 0,5795 0,5215 0,7823
81 Рябина красная листья с цветами 0,5834 0,5251 0,7876
82 Грибы китайские Ча Ши Гу 40.0 0,5928 0,5332 0,7999
83 Рябина сибирская бутоны и два верхних листа 40.0 0,6169 0,5521 0,8328
84 Малина обыкновенная,
бутоны и листья
25.0 0,6389 0,5750 0,8625
85 Незабудка луговая объем 0,6709 0,6038 0,9057
86 Калина цветы без листьев ??? 0,7215 0,6493 0,9740
87 Ирис русский, массовое цветение 40.0 0,7457 0,6711 1,0067
88 Вероника дубравная начало цветения 40.0 0,7497 0,6747 1,0121
89 Лимон с кожурой 40.0 0,7619 0,6857 1,0286
90 Медуница с цветами ??? 0,7995 0,7195

 

1,0793
91 Тмин лесной объем 0,8188 0,7369 1,1054
92 Ива трех тычинковая мужская 40.0 0,8381 0,7542 1,1314
93 Тыквенное масло <10 0,8433 0,7590 1,3845
94 Чай из цветов Цянь Жи Хун (Юн Нань) 11.0 0,8439 0,7595 1,3926
95 Спирея средняя (таволга) цветы 40.0 0,8449 0,7604 1,4061
96 Фиалка собачья 40.0 0,8581 0,7723 1,5843
97 Одуванчик обыкновенный стебли с цветами 40.0 0,9016 0,8114 1,2172
98 Сныть обыкновенная лист ранний блестящий 40.0 0,9037 0,8133 1,2200
99 Пихта сибирская водная фракция 0.50 0,9397 0,8457 1,2696
100 Гусинолук зернистый 40.0 0,9466 0,8483 1,2725
101 Страусник чернокоренный 40.0 0,9483 0,8535 1,2802
102 Моринда сок (Tohitian Noni) 25/0 0,9512 0,8561 1,2841
103 Мать-и-мачеха 40.0 0,9868 0,8881 1,3216
104 Манжетка обыкновенная массовое цветение 40.0 0,9935 0,8941 1,3412
1035 Лимонника  углекислотный экстракт (нижний водный слой) 2.0 0,9980 0,8982 1,3473
106 Незабудка подражающая или душистая начало цветения 33.3 1,0143 0,9129 1,3693
107 Вероника тимьяно листная ??? 1,0257 0,9231 1,3847
108 Медуница мягкая 40.0 1,0600 0,9540 1,4310
109 Полипренолы 0.54 1,0641 0,9576 1,4365
110 Орляк обыкновенный 40.0 1,0939 0,9844 1,4766
111 Одуванчик с цветами
(без листьев)
объем 1,0942 0,9848 1,4772
112 Грибы китайские пластинчатые сухие (подарок из Шань Си) 11.6 1,1110 0,9999 1,4998
113 Истод гибридный 33.3 1,1431 1,0288 1,5432
114 Нонея темно-бурая 40.0 1,1507 1,0356 1,5534
115 Пихтовит водная фракция СО2 экстракта пихты 9.1 1,1577 1,0419 1,5629
116 Пихта сибирская водная фракция 19.7 1,2048 1,0843 1,6265
117 Купальница азиатская с цветами и бутонами 40.0 1,2057 1,0851 1,6277
118 Чина весенняя верхняя часть с цветами 25.0 1,2220 1,0999 1,6497
119 Борщевик рассеченый бутоны 40.0 1,2681 1,1412 1,7193
120 Карагана древовидная лист и цветы 40.0 1,2783 1,1505 1,7257
121 Ива корзиночная или прутовидная 28.6 1,2859 1,1573 1,7360
122 Грибы китайские Пин Гу 40.0 1,2970 1,1673 1,7509
123 Чай из цветов хризантемы белой
(Хуан Шань)
7.1 1,3012 1,1711 1,7566
124 Клюква 40.0 1,3968 1,2571 1,8857
125 Огурцы 40.0 1,4056 1,2650 1,8976
126 Персиковое масло (ядер) <10 1,4869 1,3382 2,0072
127 Грибы опята 40.6 1,6721 1,5049 2,2573
128 Капуста белокочанная 40.0 1,9188 1,7269 2,59о4
229 Ламиналь — биогель из морской капусты 20.8 2,7201 2,4481 3,6721
130 Ива пепельная мужская; Рассчитанные значения 28.6, 40.0 3,0019, 2,1464 27017 4,0526
131 Ива пепельная женская 28.6, 40,0 3,3588 3,0229 4,5344
132 Купена душистая бутон 40.0 4,3002 3,8702 5,8053
133 Чина Гмелина цветущие побеги 40.0 4,3387 3,9048 5,7582
134 Грибы китайские Син Бао Гу 40.0 4,7232 4,2509 6,3732
135 Тыквенное масло <1 4,7279 4,2551 6,3827
136 Грибы китайские
Цзинь Чжень Гу
40.0 4,7587 4,2828 6,4242
И т.д.

Приведенные в 3, 4 и 5-м столбцах таблицы, цифровые значения связаны между собой. Значения столбца 3 (ТС10)  являются экспериментально полученными данными. Значения столбца 4 расчипываются по формуле (Сопт) = ТС 10 — 10%,  а значения в  столбце  5 аналогично считаем по формуле Смакс)  = Сопт  + 50%. При этом, для одного и того же образца мы получаем, чем выше Сисх (столбец 2), тем ниже значения концентраций в следующих столбцах — зависимость обратно пропорциональная. Результаты подобных расчётов, приведенные в этой  и в других таблицах, свидетельствуют о повышении цитотоксической активности при их уменьшении, и обладают определённой предсказательной силой. Так, например, если увеличить Сисх всем известного экстракта плодового тела чаги в спирте (№41) от 20 до 40%, то за счёт увеличения цитотоксической активности полученный раствор по величине ТС10 может передвинуться на 13 место в рейтинге токсичности.Почки тополя — экспериментальный «артефакт»Понятие «артефакт» в археологии и некоторых подобных науках обозначает обнаружение чего-то нового, позволяющего выстраивать дальнейшие умозаключения, подтверждать или отвергать гипотезы. В экспериментальных науках оно означает примитивную ошибку и требует повторения эксперимента. В нашем случае при оценке цитотоксической активности экстрактов почек тополя (№4, табл. 9). Первые два эксперимента были представлены разработчику в виде соответствующих графиков. При этом, исполнитель, который готовил растворы для анализов стандартным образом, не контактировал с руководителем экспериментов. Через некоторое время появился третий производитель, который занимался заготовкой сыря и готовил растворы для испытаний. Их результаты всех ошеломили.      Заключение: образец  весьма токсичен – клетки погибли даже при наименьшей применённой концентрации (0,04%). Только после дополнительного 10-кратного разбавления спиртом испытуемого раствора производителем исследователям удалось получить удобоваримый график (см. ниже). Причина различий, наблюдаемых у производителей, будет рассмотрена далее, и установлена  дополнительно в  сопоставительном исследовании. Однако, учитывая наличие в основном активности, подавляющей развитие микроорганизмов и многоклеточных систем, два сопоставимых результата первых производителей будут рассматриваться в дальнейшем. Конечно, одной из причин наблюдаемых расхождений могла быть связана с отличиями в используемой концентрации спирта. Спирт более низкой концентрации может обладать большей растворяющей способностью по отношению к некоторым веществам. Ещё одно различие можно связывать с процедурой очистки спирта у первого производителя. В нативном белке куриного яйца содержатся активные компоненты, например, протеолитический фермент лизоцим. Но, если он сохраняется в спиртовом растворе, то следует полагать, что биоцидное действие экстракта, по идее должно повышаться. Определённую роль могли сыграть различия в территории сбора почек тополя. Заметим, что в курином яйце содержится значительное количество воды.  Имеется ещё одно «криминальное» объяснение, связанное с качеством 70%-ного спирта из аптеки. Все версии необходимо проверить. И ещё о некоторых аномальных результатахК удивлению автора в лидирующей группе по цитотоксической активности оказался сухой экстракт ягод жимолости. Трудно себе представить, чтобы (любимая) ягода обладала такими свойствами. Видимо, такой результат «достигается» в процессе промышленной переработки ягодного сырья. Следует заметить, что это не первый случай изменения свойств растительного сырья. Аналогичное появление цитотоксической активности и потери противовирусных свойств наблюдается в производимом сухом экстракте ягод черноплодной рябины. Как видим, можно и нужно ставить вопросы, связанные с агрессивным воздействием на растительное сырьё и  о качестве растворителей.Качество растворителейПриготовление образцов для определения цитотоксической активности проводили обычно с помощью специально очищенного этилового спирта. Иногда использовали для сопоставления действия  диметилсульфоксид (ДМСО), с качеством которого не было никаких проблем — химический препарат определённой квалификации. А вот у нас в России с качеством спирта дела обстоят неважно. Несомненно,  этому способствует неистребимая привычка нашего населения принимать спиртное «на грудь» в радости и в горе… Читатели могут продолжить перечень отмечаемых событий самостоятельно. Это неизбывно и тянется веками. Но нужно знать свою дозировку.Поговорим о качестве «российских спиртосодержащих жидкостях». Неужели в этом вопросе, связанном с потреблением палёной бурдомаги, «мы впереди планеты всей»? Мы не будем обсуждать эту проблему — сколько автор себя помнит, поиски доступного и дешёвого алкоголя занимали определённую часть  нашего населения ВСЕГДА! Чтобы несколько развлечь читателя, расскажу эпизод из жизни моей мамы, когда она — деревенская молодая молдаванская девушка оказалась в интеллигентной семье моего папы — моряка дальнего плавания. Застолье — немного выпили и решили послать самую молодую женщину в соседнюю китайскую лавку за выпивкой с наказом — посмотри там какого-нибудь дешёвенького вина, дали денег. Она быстро вернулась с целой сеткой шкаликов — самым дешёвым оказался спирт. Все весело смеялись. Этот казус можно передавать из поколения в поколение, что автор в этой книге и делает!  Спирт был очень дешёвым, среди населения в Приморье процветал и алкоголизм. Мой дедушка — священнослужитель, активно боролся с пьянством. Примерно  через пятьдесят лет Ваш покорный слуга столкнулся с необходимостью смены этикеток на склянках с этиловым спиртом, которые быстро пустели после вечерних обходов рабочих помещений дежурным персоналом. Надпись «Et0Н» на потери спирта не повлияла. Рабочий люд переводил её почти правильно — «Это он»! Вернемся в нынешние времена. Нам приходится использовать спирт и в экспериментах с сырьём, и для наработки небольших количеств экстрактов для производства продукции. Нашим малым предприятиям приходится правдами и неправдами приобретать его из разных источников и быть уверенными в чистоте этого растворителя, увы,  не приходится.В народе,  известны различные методики очищения этилового спирта от нежелательных (наиболее токсичных) примесей. Не касаясь                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               механизма реализации процесса их оценки, я привожу наиболее простую из  собственных методик его очищения:а) 1 л спирта взбивать с двумя куриными белками свежих яиц течение 5-10 минут;б) полученную взвесь яичных белков фильтруют и прозрачный фильтрат готов к использованию.Именно этиловый спирт с такими характеристиками в основном  использовался при изучении растительного и других видов сырья,   готовой пищевой продукции, косметических средств, бытовой химии, присутствующих на прилавках наших торгующих организаций, а также  новых разработок препаратов пятого поколения.Имеется также график, отражающий цитотоксическую активность фармакопейного 70%-ного этилового спирта, который использовался вторым производителем для получения экстракта почек тополя и для разбавления образцов перед исследованием в последнем эксперименте. Здесь тоже имеется непонятность, связанная с тем обстоятельством, что на графике появилось чёткое указание на наличие противовирусной активности  в якобы «чистом» спирте. Скорее всего  здесь либо аптечный спирт содержал какую-то примесь, либо производитель что-то напутал.  Боюсь, что мне придётся закрывать  это «эпохальное  открытие». Но, по нашему мнению, наиболее качественный этиловый спирт, получается при использовании модифицированной методики очистки, представленной в проекте 1 (часть вторая) — исследование сухих растительных экстрактов растений (см. табл. 5 в основном тексте учебника).ПРИЛОЖЕНИЕ 9. Цитотоксическая активность эфирных масел  растений. Предельно допустимые концентрации в косметической продукции Ингредиентами, которые могут способствовать ускорению процесса старения кожи, в первую очередь, являются биоцидные добавки (консерванты), вводимые в составы косметических препаратов для предотвращения развития микроорганизмов. Можно было полагать, что величины предельно допустимых концентраций таких добавок, определенные на клеточных тест-системах, окажутся значительно более низкими по сравнению с влиянием аналогичных веществ на организм, определяемым с использованием животных и добровольцев.Экспериментально (из сопоставления, рекомендованных в косметических средствах, концентраций с результатами тестирования на клетках) это было прослежено в работах автора, в основном, для химически синтезированных консервантов (имидазолидинил мочевина, диазолидинил мочевина, иодопропенилбутилкарбамат и парабены в разных сочетаниях). Накопленные к настоящему времени данные однозначно свидетельствуют об опасности для организма человека такого рода химически синтезированных добавок. Поэтому некоторые разработчики и производители косметических средств начинают искать выход из создавшегося «биоцидного концентрационного тупика», пытаясь использовать в качестве биоцидных консервирующих систем эфирные масла и экстракты растений.В работе автора указывается на то, что среднее значение предельно допустимых концентраций эфирных масел растений составляет примерно 0.01%. Это свидетельствовало о достаточно высокой цитотоксической активности рассмотренных препаратов. Оценка проводилась на перевиваемой культуре клеток легких эмбриона человека в присутствии 5% этилового спирта. Приблизительность полученного значения и использование несколько необычной (не стандартной) клеточной тест-системы послужили поводом для более детального исследования цитотоксической активности эфирных масел растений.Методика экспериментаКак это описывалось ранее, для оценки цитотоксической активности (токсичности) препаратов использовали стандартно применяемую для этих целей культуру клеток Vero (клетки почки зеленой мартышки), которую выращивали в лунках плоскодонных 96-луночных планшетов. В культуральную среду добавляли серийные разведения исследуемых растворов эфирных масел растений. После инкубирования в течение 3-х суток, монослой клеток прокрашивали витальным красителем, вносили в лунку лизирующий раствор и количество красителя, включенного в монослой клеток, учитывали на спектрофотометре при длине волны 490 нм. В качестве контроля использовали лунки планшета, в которые исследуемые растворы эфирных масел не вносили (контроль качества процесса культивирования). Методика основана на том обстоятельстве, что при отсутствии токсичности клетки не погибают и сохраняют способность фагоцитировать нейтральный красный. Компьютерная обработка полученных данных в рамках уравнения y = (A-D) / (1+(x/C)^B)+D позволяла определять значения ТС50 и ТС10, соответствующие процентным концентрациям, добавляемых в лунки исходных спиртовых растворов эфирных масел растений, которые приводят к уничтожению клеточной популяции на 50% и на 10%, соответственно. При этом вся совокупность полученных экспериментальных данных по стандартным разведениям для каждого препарата сопоставлялась с теоретической кривой, описываемой данным уравнением, с оценкой коэффициента достоверности аппроксимаций (R^2), характеризующего статистическую достоверность рассчитанных значений цитотоксичности (ТС50 и ТС10).Значения ТС50 или ТС10, в зависимости от назначения могут рассматриваться в качестве предельно допустимых концентраций (ПДК). Применительно к задачам косметологии следует, в соответствии с теорией мягких косметологических воздействий [4]  придерживаться принципа «не навреди». Поэтому из двух обсуждаемых значений токсичности, более приемлемой для оценки предельно допустимых концентраций (для повседневного ухода за кожей) является величина ТС10. Она характеризует концентрацию добавки, при которой процесс уничтожения клеточной системы только начинается — не более 10%.Для примера на прилагаемом рисунке представлены результаты изучения  цитотоксической  активности  спиртовых растворов эфирного масла чайного дерева (Melaleuca alternifolia) в исходных концентрациях 10.42 и 0.43% фирмы DDF (Australia).Рис.4. Результаты изучения токсичности спиртовых растворов масла чайного дерева (с различной концентрацией)   В соответствие с этим графиком, величина ТС10 для раствора с более высокой исходной концентрацией, рассчитанная по уравнению с приведенными под графиком коэффициентами, равнялась 0.0239%. Это значительно меньше (и она более токсична) аналогичной величины, равной 0.4550%, для более разбавленного раствора. Однако, если провести нормировку этих значений с оценкой абсолютного содержания эфирного масла в этих растворах, то получаемые величины (соответственно, 0.0025 и 0.0020%) между собой существенно не отличаются. Именно среднее значение этих величин может характеризовать предельно допустимую концентрацию данного образца эфирного масла чайного дерева (ПДКкос) в косметических средствах, используемых для повседневного ухода за кожей.В работе исследовались образцы эфирных масел растений следующих фирм — производителей и поставщиков: DDF (Australia) P/L; Сибирский завод экстрактов и биотехнологий (г. Томск, Россия); ООО «Флория» (поставщик, Россия); ЗАО “Евроресурс” (поставщик, Россия).Результаты и обсуждениеРезультаты исследований и расчетов ПДКкос представлены в нижеприведенной таблице.

Таблица 7. Результаты определения цитопатической активности эфирных масел растений — расчет ПДК для косметических средств

Фирма — произв.  (поставщик) Страна —  произв. Название продукта оригиналь. / российское Регистрац. № (ТУ) С конц. (%) TC50 (%) исходн. раствора TC10 (%) исходн. раствора ПДКкос (%) чистого масла
(Евро
ресурс) 
Sandal wood oil (Santalium spicata) / Сандалового дерева масло 22815 1,96 0,01 0,0075 0,0001
(Евро
ресурс)
Чабреца масло 23093 1,96 0,017 0,0090 0,0002
(Флория) Англия Geranium oil / Гераниевое масло 44-0209705 0,038 ~ 5 0,4208 0,0002
1,96 0,072 0,0115 0,0002
(Флория) Индонезия Patchouli oil / Пачулиевое масло 49-01 1031610 0,038 ~ 2,5 0,4594 0,0002
1,96 0,028 0,0115 0,0002
(Евро
ресурс)
Patchouli oil / Пачулиевое масло 22282 0,078 0,6 0,5975 0,0005
1,96 0,01 0,0077 0,0002
(Флория) Германия Clove leaf oil / Гвоздичное масло 49-01 1021410 0,038 ~ 5 0,5824 0,0002
1,96 0,086 0,0205 0,0004
(Флория) Германия Tea tree oil /

Чайного дерева масло

E 49-01 1022010 0,038 3,6 0,5851 0,0002
1,96 0,1 0,0226 0,0004
(Флория) Ylang-ylang oil /

Иланг-иланговое масло

PK 49-02 0,038 ~ 5 0,4865 0,0002
1,96 0,047 0,0379 0,0007
(Флория) Clove leaf oil / Гвоздичное масло 3041 0,078 1,15 0,8313 0,0006
1,96 0,04 0,0170 0,0003
(Флория) Можжевельниковое масло 0 0,038 ~ 5 0,4526 0,0002
1,96 0,056 0,0433 0,0008
(Евро
ресурс)
Пальморозовое эфирное масло 21979 0,078 1,5 1,0401 0,0008
1,96 0,013 0,0138 0,0003
(Флория) Англия Grepefruit oil / Грейпфрутовое масло PK 49-02 0,038 ~ 5 0,6096 0,0002
1,96 0,063 0,0441 0,0009
(Евро
ресурс)
Orange sweet oil / Апельсина сладкого масло 0,078 0,58 0,3277 0,0003
1,96 0,06 0,0443 0,0009
(Флория) Россия Fir needle oil /Пихтовое масло 0,038 ~ 5 0,6495 0,0002
1,96 0,064 0,0455 0,0009
(Евро
ресурс»)
Grepefruit oil / Грейпфрутовое масло 5016 0,078 0,83 0,4184 0,0003
1,96 0,05 0,0419 0,0008
(Флория) Испания Bergamot oil/ Бергамотное масло D49-03 820-688 0,038 ~ 4 0,3689 0,0001
1,96 0,12 0,0523 0,0010
(Евро
ресурс)
Orange bitter oil / Апельсина горького масло 3042 0,078 0,82 0,6063 0,0005
1,96 0,06 0,0358 0,0007
(Флория) Россия Pinus silvestris oil / Сосновое масло L49-04 01078-06 0,038 ~ 4 0,2947 0,0001
1,96 0,078 0,0564 0,0011
(Флория) Германия Cinnamon oil / Корицы масло 812-16093 0,038 ~ 5 0,9126 0,0003
1,96 0,058 0,0448 0,0009
(Флория) Германия Bazil oil / Базиликовое масло 0,038 ~ 5 0,5846 0,0002
1,96 0,076 0,0515 0,0010
DDF/PL Австралия Sandal wood oil (Santalium spicata) / Сандалового дерева масло 0,33 0,22 0,1740 0,0006
9,79 0,01 0,0075 0,0007
(Флория) Бразилия Orange sweet oil / Апельсина сладкого масло T44-01 5479 0,038 ~ 5 1,0693 0,0004
1,96 0,077 0,0515 0,0010
(Евро
ресурс)
Lemon oil / Лимонное масло 24269 0,078 0,88 0,7470 0,0006
1,96 0,055 0,0430 0,0008
(Евро
ресурс)
Германия Tea tree oil / Чайного дерева масло 1,96 0,096 0,0329 0,0006
0,078 1,29 1,0187 0,0008
DDF/PL Австралия Lemon mirtle oil (Backhousia citriodora) / Лимонное масло 0,59 0,26 0,1266 0,0007
10,47 0,008 0,0075 0,0008
(Евро
ресурс)
Масло неролиевое 23191 0,078 ~3 1,4954 0,0012
1,96 0,13 0,0435 0,0009
(Евро
ресурс)
Ylang-ylang oil / Иланг-иланговое масло 23568 0,078 1,9 1,4503 0,0011
1,96 0,16 0,0456 0,0009
DDF/PL Австралия Austalian mandarin oil (Citrus mandurensis) / Мандариновое австралийское масло 0,51 0,31 0,1958 0,0010
9,95 0,034 0,0159 0,0016
(Евро
ресурс)
Bergamot oil / Бергамотное масло 22337 0,078 1,08 0,7916 0,0006
1,96 0,15 0,1092 0,0021
(Флория) Германия Mint oil 50% /

Мятное масло 50%

E49-01 1051320 0,038 ~ 5 0,4982 0,0002
1,96 0,24 0,1333 0,0026
(Евро
ресурс)
Лаймовое масло 3087 0,078 1,15 0,7639 0,0006
1,96 0,17 0,1296 0,0025
DDF/PL Австралия Lemon scented tea tree oil (Leptospermum petersonii) 0,54 ~1 0,4196 0,0023
11,45 0,01 0,0080 0,0009
(Флория) Парагвай Petit Grain oil / Петигреневое масло 34-01 1498200 0,038 ~ 5 0,4743 0,0002
1,96 0,26 0,1546 0,0030
(Евро
ресурс)
Clary sage oil

/ Шалфея мускатного масла

0,078 ~3 0,9805 0,0008
1,96 0,23 0,1383 0,0027
(Флория) Германия Anis oil / Анисовое масло 812-16091 0,038 ~ 5 0,6495 0,0002
1,96 0,64 0,1659 0,0033
(Флория) Испания Clary sage oil

/ Шалфея мускатного масла

S450-238 0,038 ~ 5 0,3932 0,0001
1,96 0,24 0,1743 0,0034
(Флория) Германия Rosemary oil / Розмариновое масло D49-03 743-075 0,71 ~ 10 0,3689 0,0026
1,96 0,061 0,0490 0,0010
(Флория) Болгария Lavander natural / Лавандовое масло L35-01 0,038 ~5 0,6175 0,0002
1,96 0,27 0,1826 0,0036
(Флория) Аргентина Lemon oil / Лимонное масло E 49-01 1012645 0,024 ~ 10 0,8893 0,0002
0,195 ~ 2 0,5645 0,0011
1,56 0,21 0,1561 0,0024
12,5 0,049 0,0376 0,0047
(Евро
ресурс)
Lavender essential oil / Лавандовое эфирное масло 0,078 1,7 1,1416 0,0009
1,96 0,23 0,1726 0,0034
(Флория) Германия Eucalyptus oil

/ Эвкалиптовое масло

E49-01 1050580 0,038 ~ 5 0,6223 0,0002
1,96 0,33 0,2069 0,0041
DDF/PL Австралия Tea tree oil (Melaleuca alternifolia) / Чайного дерева масло 0,43 1,21 0,4550 0,0020
10,42 0,095 0,0239 0,0025
(Евро
ресурс)
Eucalyptus oil

/ Эвкалиптовое масло

3012 0,078 ~3 2,2766 0,0018
1,96 0,27 0,2149 0,0042
(Евро
ресурс)
Mint oil 56% /

Мятное масло 56%

0,078 5,02 4,5195 0,0035
1,96 0,26 0,1482 0,0029
ООО «Сибирский завод экстрактов и биотехнологий» Россия Пихты сибирской экстракт углекислотный (ТУ 9151-001-589084-03) 26,44 0,045 0,0141 0,0037
DDF/PL Австралия Australian rosalina (Oil of Melaleuca ericifolia) / Розалины австралийской масло 0,51 1,07 0,8578 0,0044
9,31 0,19 0,0420 0,0039
Красноярский торгово-экономический институт Россия Листьев смородины эфирное масло SM-2

 

8,95 ~2 0,1400 0,0125

 

Обращает на себя внимание, что для всех исследованных образцов эфирных масел растений интервал изменений и абсолютные значения ПДКкос невелики (от 0,0001 до 0,0044%) что отражает высокую цитотоксическую активность препаратов. Несколько выпадает из этого ряда опытный образец эфирного масла листьев смородины, предоставленный сотрудниками кафедры товароведения непродовольственных товаров Красноярского торгово-экономического института — требуется дополнительная проверка.Рассмотрим полученные данные применительно к задачам, которые ставят разработчики, включая эфирные масла растений в составы косметических средств. К таким задачам, в первую очередь, следует отнести использование эфирных масел растений в качестве:ароматизаторов (отдушек);биоцидных консервирующих добавок;добавок, обладающих лечебным действием.Последнее (очевидно, очень важное) направление их использования можно определить как кратковременное, определяемое длительностью лечебного процесса, и не имеющее прямого отношения к косметологии. В данном случае,  концентрация эфирного масла в препарате также будет определяться потребностью процесса лечения (например, лечения угревой сыпи).В отличие от этого, два первых направления предусматривают обычное (повседневное) применение косметических средств, не ограниченное по времени. Поэтому вопрос о концентрации эфирных масел в косметических препаратах и результатах их взаимодействии с клеточными системами кожи приобретает особое значение.Приведенные в таблице величины ПДКкос могут быть использованы для целенаправленного подбора безопасных концентраций эфирных масел при их использовании в качестве ароматизаторов (отдушек). Причем вопрос об оценке предельно допустимых концентраций ароматических веществ должен ставиться во главу угла, перед тем как человек начнет практиковать регулярные контакты с ароматизирующими субстанциями. Цитируем фрагмент рассуждений маркетологов о том, что некоторые компании рассматривают возможность использования эфирных масел (без добавления химикатов)  для ароматизации воздуха во время приготовления пищи —  «Ваш дом наполнится ароматами сандалового дерева, гвоздики и экзотического зверобоя в сочетании с ароматом мускуса. Стоит только попробовать — и вместе со шлейфом волнующих ароматов к вам придут гармония, признание, успех». Чувствуется рука опытного сладкоречивого маркетолога (продавца). Не знаю как с «гармонией, признанием и успехом», но хорошо бы подумать, прежде чем подвергать себя и своих домочадцев регулярным процедурам бесконтрольной ароматерапии. О примитивной рекламе мы уже говорили. Вместо этой пустопорожней болтовни, рассчитанной на необразованных домохозяек, которые, может быть, вам и поверят — эмоции превыше всего, необходимо получить надежную информацию о безопасности (ПДК, в сочетании с длительностью воздействия) используемых ароматизирующих систем. Но рекламист рассчитывает на эмоции и сам не знает, что он рекламирует. А вы, поддавшись на его красноречие, может быть, способствуете сокращению жизни домочадцев. В отличие от ваших бабушек, которые если и пользовались ароматами, но от растений, а не их концентратами. Такие рассуждения касаются и бытовых спреев. Я с ужасом слышу, как жена их использует в ванной комнате и в туалете — ведь большая химия вошла в нашу жизнь прочно и, по-видимому, надолго. Но привычка — вторая натура. Источники ароматов обычно не указываются на этикетках. Так компания «За безопасную косметику» опубликовала результаты исследований, которые проводилось в независимой лаборатории на 17 самых продаваемых косметических продуктах, в результате было обнаружено, что в среднем 14 химических веществ не перечислены на этикетках. Также обнаружили, что действие присутствующих в каждом продукте четырех (в среднем) химических веществ, разрушительно для гормонов, препятствуют эстрогенам щитовидной железы. Вот вам ещё случай бездумного использования токсических ароматов.На наш взгляд, более понятным является тот факт, что попытки введения эфирных масел в косметические средства для блокировки развития микрофлоры (биоцидное консервирующее действие), снова (см. выше) с неизбежностью приводят разработчиков к “биоцидному концентрационному тупику”.Рассмотрим это обстоятельство на примере эфирного масла чайного дерева, антибактериальные, фунгицидные и противовирусные свойства которого интенсивно изучаются в последние годы. Так, например, это масло зарегистрировано в Австралийском Национальном Совете по Медицинским Исследованиям, Американской и Европейской фармакопеях как противогрибковое и бактерицидное средство. Благодаря этим свойствам и способности быстро проникать в кожу, оно, как и многие другие эфирные масла, используется в составах препаратов многочисленных фирм – производителей косметических средств. А упоминаемая ранее тенденция замены химически синтезированных консервирующих биоцидных агентов в составах косметических препаратов с целью выхода из «биоцидного концентрационного тупика» на системы растительного происхождения делает эфирное масло чайного дерева привлекательным для этой цели.Известно, что минимальная ингибирующая активность по отношению к различным видам микроорганизмов у масла чайного дерева проявляется при концентрациях от 0.1 до 0.75% — среднее значение по 11 видам микроорганизмов составляет ~0.36% (см., например, [35]). Из этого следует, что для достижения эффекта ингибирования  микроорганизмов в косметических средствах необходимо превысить экспериментально установленные для образцов эфирных масел чайного дерева  величины ПДКкос:в 164 раза для образца фирмы DDF (Австралия) – табл. №42;в 514 раз для образца, поставленного фирмой ЗАО «Евроресурс» (производство – Германия) – табл. №24;в 1200 раз для образца № Е49-01 1022010, поставленного фирмой «Флория» (Россия) – табл. №7.Ожидаемым результатом такого превышения, может быть, только ухудшение состояния клеток эпидермиса, вплоть до их полного уничтожения. Оно может проявляться в виде отшелушивания верхнего слоя кожи (пилинг)  под действием эфирных масел растений. Процедуры такого рода, использующие особые свойства клеточных систем восстанавливать повреждения, относятся к реконструкционной косметологии [4]. Такие воздействия не соответствуют предъявляемому к косметическим средствам по уходу за кожей основному требованию, «сохранения кожи в хорошем состоянии» и не могут использоваться повседневно. Это несоответствие с позиций теории мягких косметологических воздействий составляет суть упоминаемого ранее «биоцидного концентрационного тупика», из которого следует, что эфирное масло чайного дерева не может быть использовано в косметических препаратах в качестве биоцидной консервирующей добавки. Аналогичный вывод может быть сделан практически для всех приведенных в таблице препаратов и, по-видимому, для других подобных субстанций. В настоящее время отсутствуют сведения о существовании образцов эфирных масел растений, которые обладали бы широким спектром антибактериального действия в концентрациях более низких, чем установленные для них ПДКкос.Следует учитывать, что ранее мы обнаружили наличие  «биоцидного концентрационного тупика» для химически синтезированных консервантов [37]. Поэтому  теперь можно полагать, что ни одна из существующих консервирующих систем, используемых в качестве биоцидных добавок к  любым, обладающим питательной ценностью             препаратам, не способна блокировать развитие микрофлоры  без урона для клеток  живых организмов.  С большой долей вероятности,  можно полагать, что исследования, направленные на поиск биоцидных консервирующих добавок, не обладающих токсичностью по отношению к клеточным системам, вообще являются тупиковым направлением в научной косметологии. В соответствие с этим, разработчикам косметических средств более целесообразно сосредоточиться на разработках, связанных с созданием технологических приемов и подходов, позволяющих исключать биоцидные консервирующие добавки из составов косметических средств. В работе [37] приведена классификация, из которой следует, что препараты, не содержащие консервирующих добавок, приближаются к IV поколению косметических средств. В этой же работе рассмотрена возможность существования препаратов такого рода, а движение в направлении их создания иллюстрируется предпринятым недавно Научным косметологическим обществом анализом составов производимых в мире косметических средств [38].Авторы статьи: Децина А.Н.*, Беланов Е.Ф.**, Балахнин С.М.**, Петров А.П.*. *) Некоммерческое партнерство «Научное косметологическое общество»; **) Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор».  ПРИЛОЖЕНИЕ 10. Биологическая активность плодов черноплодной рябины (Aronia melanocarpa Elliot)

Активность Модель Форма, (дозировка) Результат воздействия Ссылка
Противовоспалительное действие Крысы — искусственный воспалительный процесс при введ. гистамина и серотонина Антоциановые флавоноиды из сока Действие более сильное в сравн. с рутином Acta Physiol Pharmacol Bulg. 1994; 20(1):25-30;. Borissova P, Valcheva S, Belcheva A.
Профилактика рака Самцы крыс — введение аминопирина и нитрита натрия в качестве источника нитрозаминов (мутагенов) Натуральный сок и мякоть ягод Ингибирует образование нитрозаминов; положительное влияние на кровь и предотвращение деструкции печени Br J Nutr. 1997 Aug; 78(2):335-345;Atanasova-Goranova VK, Dimova PI, Pevicharova GT  
Антиоксидантный (АО) эффект Человеческие раковые клетки HT29 clone 19A Экстракт плодов и его ингредиенты Сильное АО действие (выше, чем у витамина С и Тролокса); предотвращение индуцированного перекисью разрушения ДНК Eur J Nutr. 1999 Oct; 38(5):227-234; Pool-Zobel BL, Bub A, Schroder N, Rechkemmer G. 
Снижение вероятности панкреатита Крысы с искусственно вызываемым панкреатитиом Антоцианиновые красители, выделенные из плодов Блокируют развитие  искусственного панкреатита Pol Merkuriusz Lek. 2000 Jan; 8(48):395-398; Jankowski A, Jankowska B, Niedworok J.
Влияние на качество спермы мужчин Мужчины с oligospermia: опыт — 22;плацебо — 16;контроль — 25. Антоцианины, выделенные из плодов Контролируют окислительный стресс, повышают уровень фруктозы в сперме мужчин Ginekol Pol. 2001 Dec; 72(12):983-988; Pawlowicz P, Stachowiak G, Bielak A, Wilczynski J.
Влияние на процессы, вызываемые отравлением солями свинца Крысы, хронически отравляемые ацетатом свинца Антоцианины, выделенные из плодов Снижают окислительный стресс (снижение концентрации ненасыщенных жирных кислот и продуктов ПОЛ в крови) Pol Merkuriusz Lek. 2002 Mar; 12(69):221-223; Kowalczyk E, Jankowski A, Niedworok J, Smigielski J, Jankowska B
Защита животных от вводимого в организм кадмия Крысы Антоцианины, вводимые с хлоридом кадмия Снижают концентрацию билирубина и мочевины в сыворотке крови; уменьшают накопление кадмия в печени и почках Acta Biochim Pol. 2003; 50(2):543-548; Kowalczyk E, Kopff A, Fijalkowski P, Kopff M, Niedworok J, Blaszczyk J, Kedziora J, Tyslerowicz P
Влияние на организм больных раком печени в процессе радиационной послеоперац. терапии 42 женщины(от 19 до 65 лет) Концентрат  плодов (20 мл) и пектины яблок (15 г) дважды в день в процессе радиационной обработки Хорошие иммунномоделирующ. свойства в ходе постоперационного облучения больных Folia Med (Plovdiv). 2002; 44(1-2):22-25; Yaneva VP, Botushanova AD, Grigorov LA, Kokov Jl, Todorova EP, Krachanova MG. 
Снижение сахара в крови у больных  инсулин независимым сахарным диабетом 41 пациент в возрасте от 3 до 62 лет Сок плодов(200 мл ежедневно в теч. 3 месяцев) Достоверное снижение сахара в крови; благоприятное влияние на конц. HbA1c, холестерина и липидов; хорошая пищевая добавка Folia Med (Plovdiv). 2002; 44(3):20-23; Simeonov SB, Botushanov NP, Karahanian EB, Pavlova MB, Husianitis HK, Troev M.
Ингибирование деления раковых клеточных линий Нормальные и раковые клеточные линии Экстракт плодов, обогащенный антоцианинами (50 мг/мл — 24 час) Значительное угнетение роста раковых клеток по срав. с нормальными клетками Nutr Cancer. 2003; 46(2):186-96; Malik M, Zhao C, Schoene N, Guisti MM, Moyer MP, Magnuson BA
Острое поражение слизистой оболочки желудка, под действием этанола Крысы Экстракт плодов (2г/кг веса) Защитный эффект против поражения слизистой желудка J Agric Food Chem. 2004 Apr 21; 52(8):2226-9; Matsumoto M, Hara H, Chiji H, Kasai T.
Защита поражений печени, возникающих под влиянием четыреххлористого углерода Крысы Сок плодов Дозо-зависимая блокировка некротических изменений в печени, индуцируемых СCI4; препятствует образов. продуктов ПОЛ; снижает содержание глутатиона в печени Exp Toxicol Pathol. 2004 Dec; 56(3):195-201. Valcheva-Kuzmanova S, Borisova P, Galunska B, Krasnaliev I, Belcheva A.
Защита поражений слизистой оболочки желудка, возникающих под влиянием индометацина Крысы Сок плодов Снижает вероятность поражения слизистой оболочки желудка; блокирует развитие оксидативного стресса Exp Toxicol Pathol. 2005 Apr; 56(6):385-92. Valcheva-Kuzmanova S, Marazova K, Krasnaliev I, Galunska B, Borisova P, Belcheva A.
Кардиоваскулярные нарушения Люди Плоды (включение в диету) Кардиопротективная активность Pol Merkuriusz Lek. 2005 Jul; 19(109):108-10. Kowalczyk E, Krzesinski P, Fijalkowski P, Blaszczyk J, Kowalski
Противовоспалительн. эффект на сосудистой оболочке глаза Крысы — индукция воспаления эндотоксином Экстракт плодов Противовоспалительный эффект; зависит от дозы Invest Ophthalmol Vis Sci. 2005 Jan; 46(1):275-81. Ohgami K, Ilieva I, Shiratori K, Koyama Y, Jin XH, Yoshida K, Kase S, Kitaichi N, Suzuki Y, Tanaka T, Ohno S
Воздействие на некоторые параметры оксидативного стресса 16 человек от 20 до 34 лет Антоцианины из плодов (240 мг в сутки в течение 30 дней) Существенное увечение активностей глутатионпероксидазы и каталазы; содерж. свинца, алюминия и меди в эритроцитах понижалдось, а концентрация цинка увеличивалась Pol Merkuriusz Lek. 2005 Nov; 19(113):651-3. Kowalczyk E, Fijalkowski P, Kura M, Krzesinski P, Blaszczyk J, Kowalski J, Smigielski J, Rutkowski M, Kopff M.

Обратите внимание на приведенный в таблице  перечень проявлений биологической активности ягод черноплодной рябины и полученных на их основе препаратов, которые выделены автором жирным шрифтом. Они имеют прямое или косвенное отношение к раковым заболеваниям. Кроме этого нам известна доза ягод, обладающая 80%-ной защитой от некоторых вирусных инфекций. Поэтому имеет смысл принимать (с целью профилактики) по одной столовой ложке ягод (~20 г — ложка с верхом) во время еды — три раза в день. Это не повредит — проверено автором.ПРИЛОЖЕНИЕ 11. Вариант профилактики и возможного лечения онкологических заболеваний — зелёный чай. Другие виды его биологической активности (текст и ссылки по [6])Далее следует представить результаты проведённых нами исследований цитотоксической активности некоторых видов китайского  растительного сырья.  Цель —  выявление потенциальных ингредиентов  для косметических и бальнеологических препаратов. Кроме этого.  также для их использования в качестве профилактических и лечебных средств (против развития онкологических заболеваний, воспалительных процессов и других подобных аномальных состояний человеческого организма). Таблица 6. Результаты изучения цитотоксической активности некоторых видов китайского растительного сырья

Наименование сырья ТС50
Чай китайский хризантема белая (Хуан Шань) 3,5
Чай китайский Черный дракон Жень Шень У Лун (Фу Цзянь) 4,1
Чай китайский из цветов
Цянь Жи Хун (Юн нань)
5,5
Чай китайский зеленый
Ху Нань Ми Цзян
6,2
Чай китайский Черный дракон
Гао Шань Ча
1, 6
Чай из цветов хризантемы белой
(Хуан Шань)
7,1
Чай китайский Черный дракон
Те Гуань Инь (Фу Цянь)
8,1
Чай китайский зеленый
(Хай Нань)
8,2
Чай китайский Черный дракон Жень Шень У Лун (Фу Цзянь) 8,2
Чай китайский Си Хуан Цао
(Гуан Дун)
8,3
Чай китайский  Черный дракон Тэ Гуань Инь (Юн Нань) 8,3
Чай китайский красный
Ци Мэнь Хун Ча (Юн Нань)
8,3
Чай китайский зеленый
Ху Нань Ми Цзян
12,4
Чай из травки Цзяо Гу Лань (Гуан Си) 15,9
Чай китайский зеленый 16,0
Чай китайский черный дракон – Те Гуань Инь
(Фу Цянь)
16,2
Чай китайский Черный дракон Жень Шень У Лун
(Фу Цзянь)
16,36
Чай китайский зеленый
(Хай Нань)
16,4
Чай китайский черный дракон
Гао Шань Ча
16,4
Чай китайский  Черный дракон Тэ Гуань Инь (Юн Нань) 16,5
Чай китайский Си Хуан Цао (Гуан Дун) 16,6
Чай китайский красный Ци Мэнь Хун Ча
(Юн Нань)
16,7
Чай китайский черный
(Хай Нань)
19,1
Чай китайский горький Чан Луо
(Хай Нань)
19,1
Чай зеленый Ху Нань Ми Цзян 24,8

Надеюсь, что приведенная в таблице информация может оказаться полезной как для фитотерапевтов и исследователей в области создания противораковых препаратов, так и для обычных людей. Нужно знать, что нас с вами окружает, и не уподобляться нашим предкам, которые пробовали всё на вкус – «метод проб и ошибок». Тем более, ни в коем случае нельзя полагаться на мнение производителей (они не знают подобных параметров оценки качества различных сортов чая), а тем более торгашей и прочей «мышкующей» братии. Эти наговорят!По сравнению с некоторыми нашими достаточно цитотоксическими растениями (например, с экстрактами почек тополя — ТС 50 = 0.0062% или Ветреницы алтайской — ТС 50 = 0.0051) можно считать, что экстракты зелёного чая обладают средней цитотоксической активностью. Но в отличие от приведенных выше растений они используются во всём  мире, и хорошо изучены. Это подтверждается многочисленными исследованиями, результаты которых суммированы в таблицах, приводимых в работе [5].Прошу извинения за английский вариант заполнения таблицы — это вынужденное цитирование первоисточников. Но разобраться легко со словарём или используя любую систему перевода в интернет.Таблица 7. Онкологические заболевания и зелёный чай

Заболевание

Объект (доза)

Эффект

Ссылка

esophageal cancer 1016 patients aged 30-74 years old\ green tea a protective effect of green tea drinking on esophageal cancer [11]
cancer 8,552 individuals over 40 years of age\ than 10 cups the 9 years

 

associated with later onset of cancer; green tea has a potentially preventive effect against cancer among humans [12]
Cancer 38,540 people (14,873 men, mean age 52.8 years; 23,667 women, mean age 56.8 years), of green tea using precoded answers (never, once per day, twice to four times per day, and five or more times per day). Our findings do not provide evidence that regular green tea consumption is related to reduced cancer risks. [13]
breast and prostate cancers in humans, in animal models\ green tea extract (GTE) (100 microg/ml) and one of its polyphenolic components, epigallocatechin (EGC; 100 microM), a regulatory role for green tea in tumor inhibition.

 

[14]
Prostate cancer in cell culture systems and in animal models \ green tea  that people who consume tea regularly have a lower risk of prostate cancer -related deaths. Second, the incidence of prostate cancer in China, a population that consumes green tea on a regular basis, is lowest in the world. [15]
benign prostatic hyperplasia, baldness, and acne, as well as androgen-dependent and -independent prostate cancers Green tea extracts, (-)Epigallocatechin-3-gallate can modulate the production and biological actions of androgens and other hormones [16]
prostate cancer Green tea the use of green tea for prostate cancer chemoprevention [17]
metastatic prostate carcinoma take 6 g of green tea per day orally in 6 divided doses. Each dose contained 100 calories and 46 mg of caffeine. Green tea toxicity, limited antineoplastic  activity [18]
prostate cancer in mice\ green tea The combination of SPC and green tea synergistically inhibited final tumor weight and metastasis and significantly reduced serum concentrations of both testosterone and DHT in vivo. [19]
prostate cancer that oral infusion of a polyphenolic fraction isolated from green tea (GTP) at a human achievable dose (equivalent to 6 cups of green tea/d) The cancer-chemopreventive effects of green tea. [20]
prostate cancer 130 incident drinking tea over 40 years for than 3 cups (1 litre) daily that green tea is protective against prostate cancer [21]
breast cancer Rate\ laboratory studies using (-)-epigallocatechin gallate (EGCG) or crude green tea extract (5 cups or < or = 4 cups per day), in a seven-year consumption of green tea was correlated with decreased recurrence of stage I and II breast cancer.  Modifying effect of green tea on the clinical characteristics of the cancer. [22]
breast cancer volunteers who took 15 green tea tablets per day (2.25 g green tea extracts, 337.5 mg EGCG, and 135 mg caffeine) for 6 months. (10 cups of green tea per day). high consumption of green tea was closely associated with decreased numbers of axillary lymph node metastases among premenopausal Stage I and II breast cancer patients [23]
breast cancer human subjects, in mice, human lung cancer cell line PC-9 cells\ green tea with 3H-EGCG. high daily consumption of green tea was associated with a lower recurrence rate among Stages I and II patients.

 

[24]
breast cancer breast cancer cell line, MDA-MB-468\ extract of green tea GTE-TP91 to 45% of the metaphases were observed to exhibit this behavior [25]
breast cancer 8000 individuals\ daily consumption of at least ten Japanese-size cups of green tea; consuming over five cups per day cancer onset; a follow-up study of breast cancer patients conducted at our Hospital found that stages I and II breast cancer patients consuming over five cups per day experienced a lower recurrence rate and longer disease-free period than those consuming fewer than four cups per day. [26]
breast cancer 133 subjects were documented to suffer recurrence of breast cancer\ green tea regular green tea consumption may be preventive against recurrence of breast cancer in early stage cases.

 

[27]
mammary tumor in rats\ green tea green tea had significant chemopreventive effects on carcinogen-induced mammary tumorigenesis in female S-D rats. [28]
breast cancer in vitro assays (human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) and in human breast cancer cells MDA-MB231) and in animal models\  mixed green tea extract (GTE) as well as its individual catechin components (that 40 microg/ml GTE or EGCG). Since cancer is angiogenesis dependent, this may partially explain the antineoplastic effects associated with green tea consumption. [29]
breast cancer green tea extract (GTE) , its individual catechin \ MDA-MB231 breast cancer cell and human umbilical vein endothelial cell (HUVEC) antiangiogenic effects of green tea, which may contribute to its potential use for breast cancer treatment and/or prevention.

 

[30]
breast cancer 501 breast cancer patients and 594 control subjects\ green tea green tea drinkers showed a significantly reduced risk of breast cancer. Risk of breast cancer was not related to black tea consumption [31]
colonic carcinogenesis Rat\ injection of 1,2-dimethylhydrazine and green tea extract (GTE) previously showed inhibited carcinogenesis and oxidative DNA damage in the gastrointestinal tract. [32]
gastrointestinal cancer in hamsters\ green tea extract (0.5 mg/L) in their drinking water/24 weeks GTE has an inhibitory effect on the process of pancreatic carcinogenesis and on tumor promotion of transplanted pancreatic cancer.

 

[33]
familial polyposis seven patients\ treated with 5-fluorouracil suppositories and green tea extract after surgery. Some regression of the polyps in the preserved rectal segment was observed, and no rectal cancer developed in any of these patients. [34]
colonic mucosa

cancer

Wistar rats\ aqueous solutions of green tea extracts (GTE; 0.02%, wt/vol) plus azoxymethane (15 mg/kg i.p.)  the majority (80%) of the remaining aberrant foci contained only one or two preneoplastic crypts. [35]
colorectal tumours F344 rats\ polyphenolic extracts from black tea, green tea or red wine that black tea and wine extracts, but not green tea extracts, can protect against AOM-induced colon carcinogenesis.

 

[36]
gastric cancer 419 cases of gastric cancer (in 296 men and 123 women) Green-tea consumption was not associated with the risk of gastric cancer. [37]
aberrant crypt foci in Wistar rats\2% green tea water extract plus 1,2-dimethylhydrazine (20 mg/kg s.c.) — Week 16 that green tea drinking inhibited ACF formation in rats, and such effects may be related to the suppression of cell proliferation in the intestinal crypts. [38]
intestinal tumor formation — adenocarcinoma in Min mice\ green tea extract and sulindac that green tea extract inhibited tumor growth in Min mice almost as potently as sulindac itself did. Combination cancer chemoprevention with green tea, looking at the goal of truly effective cancer prevention. [39]
stomach cancer Fractionation of green tea extract against human stomach cancer (MK-1) cells guided by antiproliferative activity [40]
stomach and prostate cancers Human, experimental animals \green tea anti-cancer activities of green tea and/or EGCG. [41]
stomach cancer 30 370 men and 42 481 women aged 40-79 We found no inverse association between green tea consumption and the risk of stomach cancer death [42]
Gastrointestinal cancer (stomach or intestine) Human\ green tea a protective effect of green tea on adenomatous polyps and chronic atrophic gastritis formations [43]
stomach cancer 157 incident cases and 285 controls aged 40-79 years\ drinking one or two, three or four, five to nine, and 10 or more cups of green tea per day. We found no inverse association between green tea consumption and the risk of stomach cancer [44]
oral leukoplakia 64 humans\Two dosages of green tea were utilized: 3.6 g per day and 5.4 g per day 6-month .Overall compliance was excellent, with participants consuming approximately 80% of prescribed packets. [45]
oral cancer green tea extracts, green tea polyphenols, epigallocatechin-3-gallate (EGCG\ on normal human keratinocytes and oral carcinoma cells Regular consumption of green tea could be beneficial in the prevention of oral cancer [46]
oral cancer Humans\ After holding either green tea leaves (2 g) or brewed black tea (2 g of black tea leaves in 100 ml) in the mouth for 2-5 min and thoroughly rinsing the mouth, high concentrations of catechins (C(max) = 131.0-2.2 micro M) and theaflavins (C(max) = 1.8-0.6 micro M) were observed in saliva in the 1st hour. possible use of tea in the prevention of oral cancer and dental caries.

 

[47]
lung carcinoma in rat\ drinking 2% green tea extract The mortality ratio (0.5047) was smaller in the experimental group than in the positive control group, and the survival curve of the experimental group significantly raised up, in comparison with the positive group.

 

[48]
Lewis lung cancer C57/BL6J mice, green tea green tea had obvious inhibition in Lewis lung cancer and protective effects. [49]
tobacco smoke-induced lung tumorigenesis strain A/J mice\ green tea extract Green tea extract did not reduce lung tumor multiplicity in animals treated with a single dose of carcinogen 4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone (NNK). [50]
lung cancer human lung cancer cell line, PC-9 cells with G2/M arrest.

Humans\10 cups of green tea per day was 8.7 years;

main constituent of green tea and tea polyphenols. EGCG and other tea polyphenols inhibited growth of cancer cell line.

Cancer onset of patients who had consumed over 10 cups of green tea per day was 8.7 years later among females and 3.0 years later among males, compared with patients who had consumed under three cups per day.

[51]
lung cancer A/J mice \green tea, administered as drinking water, inhibits lung tumor development in that support green and black tea and caffeine as potential preventive agents against lung cancer. [52]
lung cancer nonsmoking women The inconsistency in the association between drinking tea and the risk of lung cancer.

 

[53]
lung cancer in human lung cancer cell line PC-9\ green tea extract combination cancer chemoprevention with green tea, looking at the goal of truly effective cancer prevention. [54]
lung cancer 12 healthy subjects\ the green tea extract the chemopreventive effects of green tea extract on BPDE-induced DNA damage [55]
tumors of the lung, the gastrointestinal tract and the liver Humans\ green tea By inactivation of proteolytic enzymes they inhibit the development of metastases, the protective effects of green tea constituents. [56]
hepatocarcinogenesis Male F344 rats \black tea extract and oolong tea extract black tea extract and oolong tea extract have a chemopreventive action against hepatocarcinogenesis. [57]
liver carcinogenesis male Fischer 344 rats\ GTE at doses of 0, 0.01 and 0.1% in the drinking water from week 2 for 10 weeks GTE may be a possible chemopreventive agent for nitrosamine-initiated hepatocarcinogenesis in the absence of chronic hepatocyte damage, it does not significantly inhibit lesion development in hepatocarcinogenesis associated with the CDAA diet, a cirrhosis-associated model. [58]
skin cancer in hairless mice\ Black tea or green tea. Consumption of either green or black tea resulted in significantly fewer skin papillomas and tumours induced by UVA + B light, however black tea provided better protection against UVB-induced tumours than green tea. [59]
skin hyperplasia and hyperkeratosis SKH-1 mice \ that oral administration of a standardized green tea extract (SGTE) and black tea extracts demonstrated that green tea, black tea and constituent polyphenols protect against chemical- and ultraviolet B (UVB)-induced carcinogenesis and reduce the growth of established tumors in skin [60]
epithelial neoplasms Pretreatment with the topically applied green tea extract (1 mg/cm2) largely abrogated the acute Cyclooxygenase -2 response to UVB in mice or humans assess the anti-inflammatory and anticarcinogenic effects of green tea extracts, potent anticarcinogenic effects in UVB-induced skin cancer.

 

[61]
cancer Human\ GTE corresponding to a daily intake of 18.6 mg catechins/d. The overall effect of the 10-week period without dietary fruits and vegetables was a decrease in oxidative damage to DNA, blood proteins, and plasma lipids, concomitantly with marked changes in antioxidative defence. [62]

ПРИМЕЧАНИЕ: К сожалению все ссылки, приведенные в таблиц 7, цитируются по работе автора [5]. Они могли бы слишком перегрузить учебное пособие. Но по запросу могут быть предоставлены заинтересованным лицам.В таблице 7 были представлены многочисленные ссылки на результаты исследований, направленных на изучение образцов китайского чая и отдельных его ингредиентов на развитие онкологических процессов. В работе [5] приведены также свидетельства их антибактериальных и противовирусных свойств, а также влияние на сердечно — сосудистую систему и другие заболевания человека. Авторы указанных работ в качестве модельных систем использовали в основном животных, привлекая наблюдения за изменениями в протекании заболеваний главного  «объекта исследований» — человека. Приведенные в таблице 7 данные  свидетельствуют о том, что экстракты зелёного чая обладают способностью блокировать неконтролируемое деление клеток в человеческом организме и у животных (противораковая активность). В работе [5] показано, что имеются свидетельства их положительного влияния на сердечно — сосудистую систему. Наряду с этим мы показали, что его экстракты способны достаточно мягко тормозить развитие бактериальной микрофлоры и существенно снижать концентрацию различных вирусных объектов. Эти обстоятельства подтверждены в наших экспериментах на модельных бактериальных и вирусных культурах. Поэтому нам просто грешно пренебрегать зелёным чаем даже, если он горький на вкус и кому-то может не нравиться запах этого чая.  Ведь именно этот пищевой продукт при постоянном применении может служить в качестве профилактического и даже лечебного средства от заболеваний, ответственных за наш  ранний уход из жизни.Согласитесь что, несмотря на получение достаточно  убедительных результатов, использование таких подходов на стадии скрининга является достаточно затратным  и даже в определённом смысле не всегда поддающимся интерпретации делом. Ну как, например, объяснить результат, опубликованный всего в одной работе  (статистическое исследование более 37 тысяч человек), которое не подтвердило наличие  какого-либо влияния чая на опрашиваемых людей? Именно поэтому мы и предприняли попытку установить наличие противовирусной активности у экстрактов образцов китайского чая. Клетка — либо делится, либо уничтожается под влиянием присутствующих в системе вирусных агентов.  В приведенной ниже таблицы 5 приводятся титры вирусных частиц (верхние значения) и процент ингибирования вирусного агента (нижние значения). Совершенно очевидно, что находится в атмосфере, которая содержит уменьшенное количество вирусных частиц, значит уменьшать вероятность собственного заражения. Представленные в таблице 8 данные отчётливо свидетельствуют о том, что разбавление некоторых  спиртовых экстрактов чая в 80 раз (остаточная концентрация спирта менее 1%) может снижать титр вируса в 10000 раз (процент ингибирования 99.99%). Таблица 8. Противовирусная активность некоторых экстрактов (спирт 60 — 70 %) китайского чая

Шифробразца Разведение (титр вируса и процент ингибирования)
1/5 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640
Чай

Ци Мэнь Ху Ча

<103

(>99.9)

5х102 (99.95) 3.0х103

 (~99.9)

3.2х105

(~90)

4.4х105 (~90) 7.0х105 (~90) 3.6х106
Чай

Гуань Инь

<103

(>99.9)

<102

(>99.99)

2.0х102 (~99.99) 3.0х103 (~99.9) 5.0х104 (~99) 2.1х105 (~90) 2.3х105
Зелёный чай

(провинция Хай Нань)

<103

(>99.9)

<10

(>99.999)

7.0х102 (~99.95)

<102 (>99.99)

3.3х103 (~99.9) 2.5х104

~99)

1.9х105 (~90) 1.0х106
Чай

Гао Шань Ча

<103

(>99.9)

<102

(>99.99)

2.0х102

(99.99)

0.9Х102 (99.99)

<103 (>99.9)

2.0Х102 (99.99) 8х103 (99) 1.2Х105 (90)
Зелёный чай

Ху нань Ми Цзян

<103

(>99.9)

<102

(>99.99)

<101

(>99.999)

<102

(>99.99)

8.0х102

(99.95)

2.0х103 (99.9)
Контроль
Этанол (70%) 1.5х106
Этанол (96%) <102

(>99.99)

2.1х106 1.3х106 2.1х106

 

Отдельно подчеркнём результаты наших исследований по противовирусной активности некоторых видов китайского чая (таблица 8). На наш взгляд за этим направлением исследований большое будущее. Действительно, в периоды опасности естественно или искусственно  возникающих вирусных пандемий и эпидемий (большие коллективы людей в театрах, кинозалах, на транспорте, например, в метро) можно защищать от воздействия  инфекций, и препятствовать их распространению с помощью специальных аэрозолей с содержанием разбавленных водой экстрактов зелёного чая.  Аналогичные препараты могут использоваться для противовирусной защиты в быту (природные аэрозоли) и для обработки офисных и других помещений, посредством введения аэрозолей в систему приточной вентиляции. Результаты экспериментов получены сотрудниками ГНЦ ВБ «Вектор» с использованием модельных вирусных объектов (ортопоксвирусы — осповакцина) на культуре клеток почки зеленой мартышки — Vero. Они отчётливо свидетельствуют о перспективных для дальнейших испытаний препаратов зелёного чая в качестве вирулицидных средств.   Экстракты зелёного чая в весьма разбавленном виде при непосредственном контакте с вируссодержащими системами ингибируют вирусные частицы, снижая их активность в сотни и  десятки тысяч раз. При этом, полученные значения величин ТС50, характеризующих цитотоксическую активность экстрактов, могут служить указанием для подбора предельно допустимых доз в процессе их использования. Следует также подчеркнуть возможность использования экстрактов зелёного чая в животноводстве. Деловые люди, имеющие к животноводству отношение, должны согласиться с тем, что использование разбавленных растворов экстрактов чая более выгодно, чем уничтожение всего поголовья животных. Вот вам, уважаемые читатели, основания для развития симпатичного и очень востребованного инновационного проекта. У нас для этого имеются чёткие указания и доказательства. Ищем, и ждём инвесторов.Вот и автор этого профилактического  эссе утром выпил две чашки крепкого чая (две чайные ложечки сухого зелёного чая «с горкой» на две чашки кипятка) и в обед  (добавив дополнительно ещё одну ложечку сухой заварки и 2-3 чашки кипятка), повторяет эту процедуру. Домочадцы к этому привыкли. Так продолжается уже несколько лет, и я не собираюсь останавливаться — мне это нравится. Но недавно мне предоставила ссылку на научную статью, одна из моих читательниц. В статье приводятся данные, свидетельствующие о том, что профилактическое влияние зелёного чая на развитие искусственно вызываемого у животных онкологического процесса, усиливается  добавками к чаю сухого красного вина. Но так как статья написана и опубликована на грузинском языке, то мне пришлось смешивать эти два компонента по наитию (чай-вино ~ 4-1). Ничего, получается вполне пристойный напиток. Такой вариант разнообразит моё потребление жидкости. Может быть, кто-то и здесь может увидеть отблески рекламы? Я таких прощаю, так как мои рассуждения направлены в первую очередь на получение знаний! А нам с вами, уважаемые читатели, особенно в моём (так не хочется использовать слово «преклонном») возрасте, после всего прочитанного, предстоит решать — неужели по утрам будем принимать только кофе для бодрости? Правда, в последнее время в СМИ появляются сведения и о его положительном действии на человеческий организм, однако такого количества не рекламных, а научных статей, применительно влияния кофе на блокировку онкологических процессов, авторы не зафиксировали. Давайте вместе подумаем над всем тем, что является целью предоставляемого вашему вниманию учебного пособия.Пишите. Будем вместе радоваться жизни. Каждый по- своему!ПРИЛОЖЕНИЕ 12. Содержание биологически активных веществ в крови и плазме крово человека.Таблица. Данные по содержанию гормонов и других биологически активных веществ (БАВ) в крови, сыворотке и в плазме крови человека (суммарно или отдельно для мужчин и женщин)

Наименование гормонов и некоторых других биологически активных веществ, присутствующих  в плазме крови человека ед. изм. Человек

М – мужчины;

Ж — женщины

Аденозиндифосфат (АДФ) мкмоль/л 260.8-263.2 кровь
Аденозинмонофосфат (АМФ) мкмоль/л 2.8-5.4 кровь
Аденозинтрифосфат (АТФ) мкмоль/л 723.6-728.4 кровь
Азот аминокислот (21 наименование аминокислот) ммоль/л 2.9-4.3
Азот небелковых соединений ммоль/л 14.3–21.4
Аланин мкмоль/л 359-628
Альфа-кетоглутарат ммоль/л 0.02-0.07
Альфа-макроглобулин г/л М 1.5-3.5 сыворотка; Ж 1.75-4.2 сыворотка
Альфа-фетопротеин (АФП) Е/мл 0-10.0;<30 сыворотка
Аммиак мкмоль/л 19-43
Апобелок (А1) г/л 1.1-2.05 сыворотка
Апобелок В-100 (АПО В) г/л 0.8-1.1;
М 0.7-1.6 кровь; Ж 0.6-1.5 кровь
Аргинин мкмоль/л 91.8-172.2;
Аспарагин мкмоль/л 50-150;
Аспарагиновая кислота мкмоль/л 2-30
Ацетон мг%
г/л
0.2-0.3;
1.15-2.2 сыворотка
Ацетоуксусная кислота ммоль/л

мг%

0.05-0.19
0.5-2.0
Бикарбонат анион (НСО3) мЭкв/л

 

ммоль/л

М 23.6-27.2 кровь; Ж 21.8-27.2 кровь;

М 22.5-25.9;
Ж 21.8-26.2

Билирубин общий мкмоль/л

ммоль/л

мг%

4-26;

8-20

0.25-1.5

Бор мг (сд)     моль

мкг/л

3(сд);1-2(сд);
0.278 (сд) ???50-210 (130)
Бром мкмоль/л

ммоль/лмг/л

20-150 (85) http://www.krugosvet.ru/enc/nauka_i_tehnika/himiya/BROM.html?page=2,0&2

17; 1500;

Валин мкмоль/л 188.1-273.6;
Ванадий мкмоль/л плазма — 0,054—0,136

кровь

0,470— 1,160 (0.82)

Витамин F (ненасыщенные жирные кислоты – линолевая, линоленовая, арахидоновая) мг/л 4-8
Витамин U (S-метилметионин) мг/л 1-1.5
Витамин А (ретинол) мг/л 0.1-0.2; не выше 0.25
Витамин В1 (тиамин) мг/л 0.1-0.2
Витамин В12 (цианокобаламин) пг/мл 180-900 кровь
Витамин В12(кобаламин, цианокобаламин) мкг/л

нг/мл

0.4-0.6

180-900 кровь

Витамин В2 (рибофлавин) мг/л 0.1-0.2
Витамин В3 (пантотеновая кислота) мг/л 0.5-1.0;

не выше 1.4-1.6

Витамин В5 (ниацин, витамин РР, никотиновая кислота) мг/л 1.5-2.5
Витамин В6 (пиридоксин) мг/л 0.2-0.4
Витамин В9 (фолиевая кислота, фолацин) мкг/л

нг/мл

нмоль/л

2.5-5.0;  ???

3–17 кровь;

3.9-28.6

Витамин Вс (кислота птероилглутаминовая)
Витамин группы В — холин мг% 18-30
Витамин Д (кальциферол) мкг/л 1-1.5; макс.1.5
Витамин Е (четыре формы: альфа-, бета-, гамма- и сигма — токоферолы) мг/л 1.5-2.0; не выше 3-4
Витамин К (филлохиноны, антигеморрагический фактор) мг/л 1.5-2.5
Витамин Н (биотин) мкг/л 15-30
Витамин Р (биофлавоноиды, фактор проницаемости) мг/л 1-2 (на юге);

5-10(на севере)

не выше 3-5

Витамин С (аскорбиновая кислота) мг/л 4-6
Галактоза ммоль/л Следы; 0,11-0,94 сыворотка
Ганглиозиды
Гексоза плазмы моль/л 3.58-6.05
Гемоглобин (Hb) ммоль/л М 8.56-10.8 кровь; Ж 7.50-9.36 кровь
Гистидин г/л
мкмоль/л
0.2-0.3;
109.7-135.5
Гликоген мг/л 100-150
Гликокол мг% 2.8-3.0
Гликопротеиды г/л 1.2-1.6 сыворотка
Глицин мкмоль/л 100-400;
Глобулины % 2.0-3.0
Глутамин мкмоль/л 516.8-568.6;
Глутаминовая кислота г/л
мкмоль/л
1.3-2.1;

54.4-174.8;

Глутатион Следы
Глюкоза ммоль/л

 

мг%

3.0-6.0; 3.3-5.6

3.8-5.8 кровь

80-120

Глюкозамин ммоль/л 3.9-5.0
Гомоцистеин мкмоль/л М 11.2 до 50 лет
Ж – ниже;
М и Ж старше 60 лет – не выше 11.9
Гонадотропин
Гормон 17-гидроксипрогистерон (17-ОН-∆4 Р) нг/мл М 0.15-3.10;  0.2-3.1;

Ж фолликуляр. фаза 0.4-1.51; постменопауза
0.2-0.9

Гормон АКТГ (Адренокорт и котропный гормон) пг/мл 0-50
Гормон альдостерон (Aldo) пг/мл

 

нмоль/л

 

пмоль/л

 

34.0-273.0; Ж 212,5±123,9; М 148,9±82,5;

М 0.17-0.6 сыворотка;
Ж 0.14-0.8 сыворотка;

новорожденные – 1060-5480;
дети до 6 мес.
500-4450;

взрослые 100-400

Гормон ангиогенин мг/л 250-360; наблюдаются различия для М и Ж
Гормон ангиотензин I нг/л 11-88
Гормон ангиотензин II нг/л 1.2-3.6 кровь
Гормон ангиотензиноген Мг/л 2.0-2.8 кровь
Гормон вазопрессин–антидиуретический гормон (АДГ) нг/л 1-12 зависит от осмотич. активности
Гормон гастрин пг/мл 0-130 сыворотка
Гормон гидрокортизон мкмоль/л 0.084-0.64 изменения по часам
Гормон глюкагон нг/л 30-210 сыворотка
Гормон грелин
Гормон дофамин нмоль/л <0.888
Гормон инсулин (ИРИ) пмоль/л

мкЕ/мл

36-180 сыворотка;

2.1-15.0

Гормон кальцитонин пмоль/л М 0-4.1 сыворотка;      Ж 0-8.2 сыворотка;
Гормон кортизол нмоль/л 82-635 изменения по часам
Гормон кортикостерон нмоль/л 3.8-66.5 сыворотка;
Гормон лютеинизирующий (ЛГ) мЕ/мл 0.9-8.7
Гормон паратгормон пг/мл 10.0-62.0
Гормон пролактин (Прл) нг/мл

мкг/л

мкг/л

2.8-14.4

М 100-265;

Ж 230-540

Гормон роста соматотропный (СТГ) мЕ/л

нг/мл

0-20.0

0-10

Гормон секретин нг/л 29-45 сыворотка;
Гормон С-пептид мкг/л 1.4-2.2 сыворотка;
Гормон стресса — адреналин пг/мл нмоль/л М 112-658;

<0.480

Гормон стресса – норадреналин пг/мл       нмоль/л меньше10;

0.615-3.239

 

Гормон тестостерон (Т) нмоль/л М 11-33

Ж 0.24 – 2.7

Гормон тиреотропный (ТТГ) мМЕ/л 0.32-5сыворотка;
0.17-4.05 сыворотка
Гормон тироксин общий (Т4) нмоль/л 39-155 сыворотка
Гормон тироксин свободный пмоль/л 13-30 сыворотка
Гормон трийодтиронин (Т3) нмоль/л 1.2-3.1 сыворотка
Гормон фолликулостимулирующий (ФСГ) мЕ/мл 1.1-11.3
Гормоны 17-оксикортикостероиды (ОКС) мкмоль/л 0.14-0.55
Гормоны ангиотензины I и  II пг/мл 1 – 11.88
Гормоны стресса — катехоламины
Гормрн ренин нг/мл/час 0.9-3.3;
Гуанидин мг% 0.3-0.5
Дегидроэпиандростерон (ДЭА-s) мкг/100мл 5.0-338.0
Ди-, олиго- и полисахариды
Диольные липиды
Железо мг/л

 

мкмоль/л

М 0.9-1.1(1.0)
Ж 1.8-2.0(1.9)
Старше 14 лет

30.4 кровь
Ж 8.9-30.4 кровь?
М 12.5-32.2кровь?  Ж 10.7-32.2 сыв. Общее 9-31.3 кровь

Железосвязывающая способность мкмоль/л 44.8-80.6 сыворотка
Желчные кислоты (суммарно) мкмоль/л 2.5-6.8 сыворотка
Жирные кислоты неэтирифицированные (свободные) ммоль/лмкмоль/л 0.30-0.90 сыворотка;  0.3-0.8
Жиры нейтральные г/л

мг%

9-12

100-250

Изолейцин мкмоль/л 121.1-152.6
Иммуноглобулины A г/л М 1.0-4.0 сыворотка;   Ж 0.5-3.4 сыворотка
Иммуноглобулины G г/л М 6.64-14сыворотка;   Ж 5.87-16 сыворотка
Иммуноглобулины М г/л М 0.55-1.4 сыворотка; Ж 1.37-1.95 сыворотка
Индикан мкмоль/л

мг%

1-4

0.03-0.1

Инсулин (ИРИ) мкЕ/мл 2.1-15.0
Йод мкг/л
нмоль/л
10-20;
275—630 (452.5);
Калий г/л

ммоль/л
экв/л

0.2-0.4;3-8; 3.48-5.3;       3.5-5.5 кровь;

М 4.15±0.12 кровь Ж 4.17±0.13 кровь 3.4-5.1 сыворотка; 3.5-5 сыворотка

Кальций ммоль/л

 

мг/л

ммоль/л

2.25-2.7;2.5-2.75; 3.48-5.3;
2.15-2.5 кровь;
2,25-3,0 сыворотка;
70-80; М 2.43±0.04 кровь;
Ж2.45±0.03 кровь
Кальций общий ммоль/л 2.23-2.57 кровь;
2,12-2,2 кровь
Кальций свободный ммоль/л 1.15-1.27 кровь(1.21)
Кардиолипин Оценка присутствия по уровню антител
Керазин
Кетоглутаровая кислота мг% 0.8
Кетоновые тела (в пересчёте на ацетон) ммоль/л

мг%

0.2-0.6
0.8-3.0
Кинины мг% 1-20
Кобальт мкг/л
мкмоль/л
от 1 до 40 (20.5)
0.373;
Кортизол  (гормон стресса) нмоль/л 260-720.0
Креатин ммоль/лмг% мкмоль/л 0.08-0.11;
1-1.5;
М 13-53 сыворотка; Ж 27-71 сыворотка
Креатинин ммоль/л мкмоль/л мкмоль/л

 

0.06-0.16;
44-106;
М 70-127 сыворотка;
М 44-150 сыворотка; Ж 60-100сыворотка; Ж 44-97 сыворотка
Кремний мг  20-30 (суточная доза в виде SiO2)
Лактат ммоль/л 0.5-2.2;
0.3-1.3 кровь
Лактоза следы
Лейцин г/л
мкмоль/л
0.2-0.3;
129.7-251.8
Лецитин мг% 100-200
Лизин г/л
мкмоль/л
0.1-0.2;
143.9-363.1
Лимонная кислота ммоль/л

мг%

0.10-0.15
2.0-3.0 (25 мг/л)
Липиды общие ммоль/л 4.0-8.0; 4.6-9.4
Липопротеиды низкой плотности г/л 2.2 кровь
Липопротеиды высокой плотности г/л М 1.25-4.25;
Ж 2.5-5.5
Литий мкмоль/л 0.5-1.5 кровь;
0,5-2 кровь;
0.8-1.6 кровь;0,14-1,4 (0.77) сыворотка

0,24 — 84 .

Магний г/л
ммоль/л
0.025-0.030;
0.66-1.05 кровь(0.855)
0.65-1.1кровь (0.875)         0.89±0.03 кровь;
0.65-1.05 сыворотка; 0,7-0,99 сыворотка
Мальтоза следы
Манноза следы
Марганец мг/л мкг/л?

нмоль/л

0.5-1.0 (0.75)
от 40 до 200 (120)72-255 (163.5)
Медь мг/л
мкмоль/л
0.2-0.3 (0.25)
1.1-24.3 кровь    М 10,99 — 21,98 (15.49) Ж 12,56- 24,34

(18.49)

Беременные 18,53 — 47,41

Метионин мкмоль/л 20.1-33.6;
11,0-22,0 сыворотка
Молибден мкг/л
нмоль/л
от 3 до 70 (36.5)
30-700 (365);
Молочная кислота ммоль/л ммоль/л ммоль/л 1.035±0.072;
1.1-1.2;
0,99-1,78 кровь
Мононенасыщенные жирные кислоты г/л 2-4
Мочевая кислота ммоль/л

мкмоль/л

 

 

ммоль/л

0.24-0.29; М 0.1-0.4 кровь; М 210-420 кровь; М 200-430 сыворотка
Ж 140-380 сыворотка; Ж 145-350 кровь; 179-476 кровь; 0.24-0.5 кровь  старше 60 лет –М 0.25-0.47кровь; Ж 0.19-043кровь
Мочевина ммоль/л

 

3.3-6.6; 2.5-8.3;      3.0-8.0;
2.5-8.32 сыворотка;           старше 60 лет        2.9-7.5 сыворотка
Мукополисахариды
Насыщенные жирные кислоты г/л 2-3
Натрий г/л ммоль/л ммоль/л

 

0.3-0.5 ???
130-150; 130,5-156,6;
135-145 сыворотка; М 139.7±1 кровь
Ж 141±1.08 кровь
Никель мкг/л 1.0-28.0 сыворотка
Нервон
Окситоцин
Орнитин мкмоль/л 30-100
Пара — оксимасляная кислота ммоль/л 0,43—1,033 кровь
Пентозы ммоль/л 0.13-0.26
Пипопротеиды высокой плотности г/л М 1.25-4.25;
Ж 2.5-6.5
Пировиноградная кислота (пируват) ммоль/л

 

мкмоль/л

 

0.114;
0-0.11кровь
0.07-0.14;
45,6—91,2 кровь
Плевромукопротеины
Полиненасыщенные жирные кислоты г/л 1.1-2.0
Прогестерон (∆4 Р) нг/мл 0.6-25.0
Пролин г/л
мкмоль/л
0.4-0.7;
50-200
Протромбин мкмоль/л 1.4-2.1 сыворотка
Рибоза и дезоксирибоза мг/л 20-30
Сахароза следы
Селен мкг/л 3-10; (сд 55 мкг)          15 — 45 кровь;
Серин г/л
мкмоль/л
0.8-1.3;
70-150
Серомукоиды общие (серогликоиды) г/л 0.22-0.28 сыворотка;
Серотонин мкмоль/л 0.22-2.05 кровь;          0.28-1.7
Сиаловые кислоты (производные нейраминовой кислоты) ммоль/л 2-2.36 сыворотка;
С-пептид мЕ/л 32.6-1458
Сульфаты ммоль/л 0.3-1.5
Сфингомиелины
Тирозин мкмоль/л 77.3-82.8;
Тироксин общий (Т4 общ.) моль/л 53.0-158.0
Тироксин свободный (Т4 св.) моль/л 10.0-23.2
Трансферрин (сидерофилин) г/л 2.0-4.0 сыворотка;         Ж/М=1.1;
М 2.3-4.0 сыворотка;     Ж 3.0-3.8 сыворотка
Треонин г/л
мкмоль/л
0.1;
159.6-176.4
Триглицериды ммоль/л 0-2.3;
<2.2 кровь;
М 0.45-1.81 кровь; Ж 0.40-1.53 кровь; 20-25лет
М 0.5-2.27 кровь Ж 0.4-1.48 кровь
40-45лет
М 0.62-3.61 кровь
Ж 0.5-2.16 кровь65-70лет
М 0.6-2.64 кровь
Ж 0.68-2.7 кровь
Трийодтиронин общий (Т3 общ.) нг/мл 0.8-2.0
Трийодтиронин свободный (Т3 св.) моль/л 2.5-5.8
Триптофан г/л
мкмоль/л
0.04-0.06;
30-90
Тропонин 1 нг/мл 0.2 кровь
Тропонин Т нг/мл 0.0-0.07 кровь;
<0.1 кровь
Углеводы г/л 30-50
Углекислота (СО2) ммоль/л 22-31
Уромукопротеины
Факторы клеточного роста
Фенилаланин мкмоль/л 84.7-114.9
Фермент
Фермент гамма-глутамиламинотрансфераза (гамма-АТ) Ед/л М до 49 кровь;
Ж до 32 кровь;М <55 сыворотка;    Ж <40 сыворотка
Фермент аланинаминотрансфераза (АлАТ) Ед/л

 

МЕ/л

М до 41 кровь;             Ж до 31кровь;

7-53 сыворотка;

Фермент альдолаза МЕ/л 0-11 сыворотка;
Фермент альфа2-антитрипсин ммоль/л 37.0-74.1 сыворотка;
Фермент амилаза МЕ/л 3.5-11.8 сыворотка;
Фермент антигиалуронидаза МЕ/л <250
Фермент антистрептолизин О МЕ/л <250
Фермент аспартатаминотрансфераза (АсАТ) Ед/л

МЕ/л

М до 41 кровь;
Ж до 31 кровь;
11-47 сыворотка;
Фермент гамма-глутамилтранспептидаза МЕ/л М 20-76 сыворотка;    Ж 12-54 сыворотка
Фермент гликогенфосфорилаза МЕ/л 0-20 сыворотка
Фермент креатинкиназа (КК) МЕ/л 0-24кровь;
М ≤195 сыворотка;                     Ж ≤170 сыворотка   М 30-220 сыворотка;  Ж 20-170 сыворотка
Фермент лактатдегидрогеназа МЕ/л 250 кровь;
90-270 сыворотка
Фермент лизоцим мкг/мл 8-12 сыворотка
Фермент липаза Ед/л 0-190 в крови
Фермент нуклеотидаза -5* МЕ/л 2-16 сыворотка
Фермент пепсиноген мкг/л 124-142 сыворотка
Фермент плазминоген мг/л 409-559
Фермент трипсин мкг/л 10-60 сыворотка
Фермент фосфатаза кислая МЕ/л 0-0.7 сыворотка
Фермент фосфатаза щелочная МЕ/л М до 270 кровь;       Ж до 240 кровь;      38-126 сыворотка
Фермент холинэстераза Ед/л 5300-12900 в крови
Ферритин мкг/л М 20-250 кровь;
Ж 10-120 кровь;
М 81-590 кровь;
Ж 23-349 кровь
Фибриноген % 0.2-0.4
Фибронектин (по В.Н. Титову и соавт., 1985) мкг/мл 246-399 кровь
Фосфатидилхолины ммоль/л 1.5-3.0
Фосфоинозитид
Фосфолипиды (сложные эфиры липидов, содержащие фосфорную кислоту) г/л
мг%
2.2-4.0
220-400
Фосфолипиды общие ммоль/л 2.52-2.91 сыворотка;  1.95-4.9
Фосфор   неорганический ммоль/л 0.87-1.45 кровь;   0.81-1.45 кровь;    0.65-1.29 сыворотка; 0,65-1,30 сыворотка;       старше 60 лет         М 0.74-1.2 кровь       Ж 0.90-1.3 кровь
Фруктоза мкмоль/л ммоль/л 2.77-27.75;

0,56-2,77 кровь (1.67)

Фруктозамин (сумма гликозилированных белков сыворотки крови) ммоль/л

мкмоль/л

М 2.1-2.8; Ж 1.68±0.27;
0-285.0
Фтор мг/л 0.1-0.2
Хлор/хлориды г/л

ммоль/л

0.7-0.9;

95-110;98-107 кровь М 103.1±0.73 кровь Ж 102.8±0.65 кровь;    96-108 сыворотка;      <5.18 кровь;
95,9-109,9 кровь

Холестерин общий ммоль/л 3.0-6.2; 3.9-6.5;
2.6-6.7
Холестерин липопротеинов высокой плотности ммоль/л М 0.7-1.82; 0.7-1.83
Ж 0.8-2.2; 0.86-2.28
Холестерин липопротеинов низкой плотности ммоль/л М 2.25-4.82;

Ж 1.91-4.52;

1.92-4.51

Хориогонический гонадотропин (хгч) мЕ/мл 0-15.0
Хром мкг/мл

нг/дл

нмоль/л

0,05-0,5 в крови

70

 

13,4.

 

Цереброн
Церулоплазмин  (почти вся медь плазмы крови) мг/л ммоль/л  г/л 300-380;

1.3-3.3 кровь; 0,27±0,014 кровь

Циклический аденозин 3′,5′-монофосфат
Циклолейцин
Цинк мг/л мкмоль/л 1.0-1.5 (сд 5-20);        10.7-22.9 кровь (16.8) референт. значения
Цистеин мкмоль/л 166.6-249.9;
Цистин мкмоль/л 84-125
Цитруллин мкмоль/л 10-50
Эндорфины
Эритропоэтин
Эстрадиол (Е2) пг/мл 20-250
Янтарная кислота ммоль/л

мг%

0.01-0.04
0.5

Данные, прведенные в таблице требуют  уточнения. ПРИЛОЖЕНИЕ 13.  Некоторые механизмы старения кожи. Коллаген и другие биополимеры, карусель защиты [4].. В настоящее время известны сотни гипотез о биологической сущности старения организма. Можно полагать, что в любых научных дисциплинах количество гипотез, описывающих то или иное явление, обратно пропорционально ясности вопроса о механизме этого явления. Современная наука не может предотвратить старость, однако имеющиеся данные позволяют формулировать подходы к предупреждению преждевременной старости.

Кожа, представляющая самый большой орган человека, посредством которого осуществляется воздействие окружающей среды на организм, непосредственно подвержена процессам, сопровождающим старение.

Существуют генетические теории старения, в которых ген расценивают как первичный участок, в котором могут возникать изменения, индуцирующие процесс старения. В противовес этим теориям указывается на то, что такие факторы окружающей среды, как температура, влажность, питание и стресс, также способны влиять на скорость процесса старения. Однако можно полагать, что такие (как бы противоположные) подходы в действительности могут быть взаимосвязанными.

Имеются гипотезы, основанные на изменении содержания ферментов и гормонов, распространены версии, учитывающие образование сшивок в макромолекулах (включая нуклеиновые кислоты, коллаген, полисахариды и т.д.), изменение проницаемости мембран, строения различных органелл типа лизосом и митохондрий. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что все перечисленные выше изменения, сопровождающие процесс старения организма, подтверждаются экспериментально. Более того, есть основания полагать, что большая часть этих изменений связана между собой и, очевидно, с теми процессами, которые регистрируются на генетическом уровне.

Таким образом, мы имеем дело с гигантским клубком взаимосвязанных событий, сопровождающих процесс старения организма. Поэтому любые попытки объяснить процесс старения, принимая во внимание только отдельные факторы, на наш взгляд, заранее обречены на неудачу. Однако имеется еще несколько ключевых факторов, сопровождающих процесс старения, информация о которых к настоящему времени накоплена, и которые, с теоретической точки зрения, могут иметь определяющее значение на протекании всего процесса в целом. Одним из таких факторов является перекисное окисление липидов. 9.1. Перекисное окисление липидовВсе живое на земле состоит из клеточных систем. Особенностью любой клетки организма животного является наличие внешней и внутренних бислойных мембран. На рис.9.1 представлено схематическое изображение молекулы лецитина и фрагмента бислойной мембраны, составленной из молекул лецитина.

Наличие двойных связей в жирнокислотных «хвостах» молекулы лецитина определяет реакционную способность бислойных мембран по отношению к окислителям различного типа (О2, О3, Н2О2, ионы переходных металлов и т.д.), излучениям, радиации и т.п.

Кислород воздуха, необходимый для существования всего живого на Земле, участвует в процессе перекисного окисления липидов (ПОЛ), в результате которого образуются активные высокореакционноспособные частицы. Эти частицы способны продолжать процесс ПОЛ, который обычно протекает по цепному механизму. Кроме этого, они могут взаимодействовать с биополимерами, меняя их структуру и свойства. Рисунок 9.1 Схематическое изображение молекулы лецитина и фрагмента бислойной мембраны

На рис.9.2 представлена брутто-схема ПОЛ, завершающаяся образованием реакционноспособных альдегидов. Рисунок 9.2 Схема перекисного окисления липидов

Образующиеся в процессе ПОЛ альдегиды легко (даже при комнатной температуре) вступают в реакцию с аминогруппами аминокислот, пептидов и белковых фрагментов, протеогликанов, липопротеидов, мукополисахаридов и с нуклеиновыми кислотами. На рис.9.3 представлена схема модификации белкового фрагмента под влиянием альдегидов, образующихся в процессе ПОЛ.

Реакция альдегидов с аминокислотами, пептидами и белковыми фрагментами, называемая реакцией неферментативного покоричневения, реакцией меланоидирования или реакцией Майяра (Майларда), интенсивно изучаемая во второй половине XX века [1], осуществляется по достаточно сложной схеме с промежуточным образованием парамагнитных частиц (свободных радикалов). Также было показано, что процесс может замедляться в присутствии антиоксидантов. В основном используемые антиоксиданты относились к неорганическим соединениям типа диоксида серы, солей сернистой и азотной кислот. Имеются сведения о возможности ингибирования реакции Майяра меркаптоэтанолом.

Установлено, что некоторые продукты реакции альдегидов и восстанавливающих сахаров (например, глюкозы) с аминокислотами обладают мутагенным действием и проявляют токсичность.

Совершенно очевидно, что по мере развития процесса ПОЛ (см. рис.9.2), образующиеся альдегиды могут вступать в реакцию Майяра (см. рис.9.3). В свою очередь, по мере накопления изменений в структуре белковых фрагментов биологических полимеров последние могут прекращать осуществление своих биологических функций или, в конце концов, превращаться в белковые образования, не узнаваемые иммунной системой организма. Появление таких чужеродных белковых молекул может провоцировать развитие аллергических реакций. Рисунок 9.3 Схема модификации белкового фрагмента под влиянием альдегидов

Взаимодействие продуктов ПОЛ с нуклеиновыми кислотами может вызывать изменения в их структуре и при соответствующем накоплении повреждений — изменения в генетическом аппарате клетки (мутагенное действие продуктов ПОЛ).

Взаимодействие продуктов ПОЛ с мукополисахаридами типа гиалуроновой кислоты будет вызывать изменения в её структуре, которые могут приводить к снижению проницаемости геля гиалуроновой кислоты с водой, заполняющего межклеточное пространство в эпидермисе и в дерме, и тем самым влиять на проницаемость кожи.

Таким образом, продукты ПОЛ могут быть ответственными за аллергические проявления, мутации и снижение проницаемости кожи.

Вообще, именно в силу особенностей строения клеток, ПОЛ всегда сопровождает животных в обычных условиях (в норме). Есть основания считать, что ПОЛ заметно усиливается при неблагоприятных воздействиях. 9.1.1. Оценка склонности липидов к перекисному окислениюСодержание продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в тканях при хронических заболеваниях (см., например, [2-7]) и при других неблагоприятных воздействиях на организм возрастает по сравнению с нормальным проявлением процесса ПОЛ. В большинстве случаев при этом в жирнокислотных составах липидов наблюдаются изменения, характеризующиеся снижением содержания ненасыщенных жирных кислот [8]. Есть основания полагать, что именно ПОЛ является процессом, определяющим направление и глубину наблюдаемых изменений в жирнокислотных составах липидов тканей организма при неблагоприятных воздействиях. Поэтому при оценке степени ненасыщенности липидов или при выявлении их склонности к перекисному окислению (в качестве отклика на неблагоприятные воздействия) целесообразно пользоваться обобщенным индексом, учитывающим суммарную ненасыщенность липидов и/или их реакционную способность в процессах ПОЛ.

Обычно для выявления суммарной ненасыщенности или для оценки склонности липидов к окислению используются индексы ненасыщенности, определяемые отношением суммарных количеств полиненасыщенных жирных кислот (две двойные связи и более) к насыщенным [9], суммой произведений процентного содержания кислот на число двойных связей с каждой из них [8] и т.д. Однако использование этих индексов в редких случаях является достаточно обоснованным и, самое главное, может таить возможность ошибочных выводов и заключений, связанных с тем, что они не учитывают истинную реакционную способность жирнокислотных фрагментов липидов в процессах ПОЛ.

В табл.9.1 представлены относительные скорости окисления индивидуальных жирных кислот в зависимости от количества двойных связей (по данным, приведенным в работе [10]).

При расчете коэффициентов реакционной способности применялись относительные скорости окисления жирных кислот при 37°С. Однако из-за отсутствия сопоставимых данных для жирных кислот, не имеющих С=С связей, переход к насыщенным системам осуществлялся с учетом относительных скоростей окисления стеариновой и олеиновой кислот при 110°C. Из данных, представленных в табл.9.1, видно, что повышение температуры процесса окисления приводит к сглаживанию различий в относительной реакционной способности исходных соединений. Поэтому можно ожидать, что соотношение склонностей к окислению стеариновой и олеиновой кислот при 37°C будет более высоким, чем 1:11. Однако, учитывая их весьма низкие абсолютные скорости окисления, которые при наличии полиненасыщенных жирных кислот вносят незначительный вклад в общую реакционную способность липидов, ожидаемыми различиями можно пренебречь. Таблица 9.1 Относительная реакционная способность жирных кислот в процессах перекисного окисления и коэффициенты реакционной способности

В соответствии с выше изложенным, индексы реакционной способности к ПОЛ (ИРСПОЛ) предлагается рассчитывать по следующей формуле:ИРСПОЛ=∑CiKi, (1)где Ci — относительное содержание индивидуальных (насыщенных и ненасыщенных) жирных кислот, а Ki — коэффициент реакционной способности.
Для проверки наличия связи между ИРСПОЛ и традиционно используемыми индексами ненасыщенности был проведен расчет их значений для 52 наборов жирнокислотных составов липидов, приведенных в работах [11-17], а также изучено наличие зависимостей между полученными величинами. Оказалось, что для большинства вариантов расчетов индексов ненасыщенности их корреляция с ИРСПОЛ является достоверной, хотя и не очень высокой (коэффициент корреляции ниже 0.77) . Для индекса ненасыщенности, определяемого по формуле (2): ИН=∑Cini, (2)коэффициент линейной корреляции оказался несколько более высоким (0.83). Здесь ni — число двойных связей в индивидуальной жирной кислоте, а Ci- её относительная концентрация. Однако и в этом случае расхождения между величинами индексов ненасыщенности, рассчитанными по формуле (2) и предложенному нами регрессионному уравнению (3).ИН=52.6+0.00165 ИРСПОЛ (3),могут оказаться достаточно высокими и достигать в отдельных случаях 40-50%. В качестве примера, свидетельствующего о практической важности адекватного выбора критерия оценки, можно сослаться на результаты работы [12], авторы которой изучали действие радиации на культуру клеток LDV, меняя жирнокислотный состав клеточных липидов посредством добавления в питательную среду олеиновой (С18:1) и линолевой (С18:2) кислот. Зафиксированное при этом увеличение содержания в клеточной мембране соответствующих кислот (см. табл.9.2) рассматривалось как повышение степени ненасыщенности. Таблица 9.2 Сопоставление индексов ненасыщенности и индексов реакционной способности липидов цитоплазматических мембран клеток

*) Индексы ненасыщенности и ИРСПОЛ рассчитывались по формулам (1) и (2) для всего набора жирных кислот, приведенных в [12].

Обнаружив отсутствие заметных различий в склонности клеток с разным содержанием жирных кислот С18:1 и С18:2 к радиационному воздействию, авторы сделали вывод о том, что вызываемое радиацией ПОЛ цитоплазматических мембран не является определяющим в процессе клеточного радиационного повреждения. Проведенный нами расчет ИРСПОЛ по данным этой работы (см. табл.9.2) показал, что, несмотря на увеличенное содержание некоторых жирных кислот при введении в питательную среду их эндогенных аналогов, существенного изменения значений индексов не происходит в связи со снижением общего количества других полиненасыщенных (более реакционноспособных) кислот. Следует подчеркнуть, что использование индексов ненасыщенности, рассчитываемых по формуле (2), наиболее близких к ИРСПОЛ, также приводит к аналогичным результатам (см. табл.9.2). Таким образом, вывод авторов работы [12] мог претерпеть существенные изменения, если бы они воспользовались индексами, в большей степени отражающими реакционную способность липидов в процессах ПОЛ.

Другие примеры свидетельствуют о наличии различий между ИРСПОЛ и разнообразными вариантами индексов ненасыщенности. Так, в работе [8] приводятся индексы ненасыщенности липидов печени при её хронических поражениях, определяемые по формуле (2). На основании величин этих индексов авторы делают вывод о том, что наиболее значительные изменения ненасыщенности наблюдаются при портальном и билиарном циррозах печени (см. табл.9.3) Таблица 9.3 Сопоставление индексов ненасыщенности и индексов реакционной способности липидов печени в норме, а также при хронических гепатитах, циррозах и жировом гепатозе (по данным работы [8])

Однако,  величины ИРСПОЛ, которые также могут характеризовать глубину изменений ненасыщенности и направление этих изменений, свидетельствуют о том, что, если для портального цирроза и наблюдается некоторое снижение ИРСПОЛ, сопоставимое с ошибкой определения (примерно 20%)*), то для билиарного цирроза эта величина практически не отличается от соответствующих значений для других заболеваний печени (см. табл.9.3).

*) Индексы ненасыщенности и ИРСПОЛ рассчитывались по формулам (1) и (2) для всего набора жирных кислот, приведенных в [8].

Если рассмотреть данные, полученные в работе [9], характеризующие изменения состава жирных кислот мембран эритроцитов, тромбоцитов и липидов плазмы крови при заболевании гиперлипопротеидемией, то вывод, который можно было бы сделать на основании значений индексов ненасыщенности (увеличение степени ненасыщенности при заболевании), оказался бы некорректным, так как значения ИРСПОЛ у больных и у здоровых людей практически не отличаются (см. табл.9.4).

Число подобных примеров может быть значительно увеличено, так как изучение связи между неблагоприятными воздействиями на организм и усилением процессов ПОЛ привлекает пристальное внимание исследователей (см., например, [2-4, 9]). Отметим также, что использование любых индексов, отражающих относительную ненасыщенность (реакционную способность) липидов, без учета их общего содержания в клетках, органах и т.п., не всегда является методически оправданным.

Таким образом, мы предложили новые индексы реакционной способности (ИРСПОЛ), характеризующие склонность липидов к ПОЛ, а также глубину и направление изменений ненасыщенности липидов. Использование этих индексов может иметь определенное преимущество по сравнению с традиционно применяемыми в таких случаях индексами ненасыщенности. Таблица 9.4 Сопоставление индексов ненасыщенности и индексов реакционной способности липидов плазмы крови, мембран эритроцитов и тромбоцитов здоровых людей и больных гиперлипопротеидемией II типа (по данным работы [9])

*)Индексы ненасыщенности рассчитывались по формуле (4): (4)где Сi соответствует относительной концентрации полиненасыщенной кислоты (n=2), а ni — количество двойных связей в её молекуле; Сj — относительная концентрация насыщенной кислоты.

В дальнейшем мы используем значения ИРСПОЛ для оценки склонности различных жировых систем к прогорканию. 9.1.2. Уровень карбонильных соединений при культивировании клетокПредложенные индексы реакционной способности ИРСПОЛ характеризуют склонность липидов к перекисному окислению. Однако, насколько далеко заходит процесс перекисного окисления, например, при культивировании клеточных систем, и, вообще, является ли образование продуктов ПОЛ величиной осязаемой? Для решения этих вопросов мы предприняли специальное исследование.

Следует заметить, что продукты ПОЛ (альдегиды и кетоны) в большинстве случаев в разбавленных растворах являются достаточно устойчивыми соединениями, и поэтому можно ожидать их накопления в системе клетка — питательная среда при проведении процесса культивирования в неблагоприятных условиях.

Эти обстоятельства позволяли надеяться, что, по крайней мере, для некоторых клеточных линий, используемых в производстве вакцинных препаратов, может существовать зависимость между качеством культивирования (оптимальность условий культивирования, ростовые характеристики питательных сред, неблагоприятные воздействия) и уровнем карбонильных соединений в питательной среде в процессе клеточной жизнедеятельности. Целью данной работы являлось изучение динамики изменения уровня карбонильных соединений в процессе клеточного роста и выявление связи этого уровня с качеством культивирования клеток на примере фибробластов почек сирийского хомячка (ВНК-21).

В качестве опытных питательных сред использовали препараты, приготовленные во ВНИИ молекулярной биологии на основе индивидуальных аминокислот, гидролизата протеинов миражного яйца, рыбного гидролизата и автолизата пекарских дрожжей разной степени очистки.

Для проведения анализа применяли соляную кислоту и едкий натр квалификации х.ч., а также 2,4-динитрофенилгидразин (ДНФГ) марки ч.
Оптические плотности поглощения растворов определяли на спекрофотометре СФ-26 в кварцевой кювете с толщиной поглощающего слоя 1 см. В качестве раствора сравнения использовали дистиллированную воду.
Культуру клеток ВНК-21 (с.13) в соответствие с паспортными данными получали в музее клеточных культур ВНИИ молекулярной биологии.
Клетки выращивались на исследуемых питательных средах в монослое с посадочной концентрацией 100 тыс. кл./мл Продолжительность одного пассажа составляла 72 часа. Индексы пролиферации и количество клеток оценивали по известной методике (см., например [18]).

Уровень карбонильных соединений в надклеточной жидкости и в исходных питательных средах определяли в соответствии с методикой [19] с небольшой её модификацией. Для этого к 0.6 мл надклеточной жидкости или питательной среды добавляли 0.5 мл насыщенного раствора ДНФГ в 1Н растворе соляной кислоты. Пробы выдерживали 10-20 минут при комнатной температуре, затем приливали 2 мл 0.4 Н раствора едкого натра и после выдерживания в течение 10-20 минут при комнатной температуре измеряли оптическое поглощение растворов при длине волны 505 нм (Д505).
В качестве контроля,  при определении Д505 использовали пробы, приготовленные по аналогичной методике, в которой изменяли порядок добавления растворов к исследуемому образцу (вначале добавляли раствор щелочи, а затем — раствор ДНФГ).
Для решения поставленной задачи вначале был проведен анализ содержания карбонильных соединений в некоторых исходных питательных средах, содержащих сыворотку крови крупного рогатого скота и выдержанных при 37°C в течение 72 часов (см. табл.9.5). Полученные данные свидетельствуют о довольно низких уровнях карбонильных соединений в исходных питательных средах.*) Этот уровень несколько повышается в процессе обработки при 37°C (обычная продолжительность одного пассажа). *) Низкий уровень карбонильных соединений связан с незначитеьлным содержанием этих соединений в исходных составах питательных сред (пиридоксаль и др.). Следует заметить также, что более богатая карбонильными соединениями сыворотка добавляется к среде в количестве 10%.

Однако наблюдаемые изменения оказываются незначительными по сравнению с повышением уровня карбонильных соединений в процессе культивирования клеток ВНК-21 (см. табл.9.6) Таблица 9.5 Уровень карбонильных соединений в некоторых питательных средах*)

*)Образцы  сред в разных опытах отличались между собой датами изготовления,  как питательных сред, так и сывороток. В опытах со средой Игла МЕМ использовались различные партии эмбриональной сыворотки (фирма «Flow») и один образец сыворотки КРС, обработанной полиэтиленгликолем.
Данные, приведенные в табл.9.6, свидетельствуют о значительных колебаниях абсолютных значений Д505 в процессе выращивания клеток. Особенно контрастными эти колебания оказались в опытах с посевной концентрацией клеток 200 тыс. кл./мл Здесь на вторые сутки наблюдается достоверное снижение Д505 (в 2 раза) с последующим резким повышением этой величины на третий день культивирования. В отличие от этого, для посевной дозы 50 тыс. кл./мл наблюдается некоторое повышение Д505 на вторые сутки с последующим снижением, а для посевной дозы 300 тыс. кл./мл — более или менее монотонное увеличение этой величины к концу пассажа. Таблица 9.6 Изменение уровня карбонильных соединений в процессе культивирования клеток ВНК-21 (по суткам) в зависимости от посадочной концентрации клеток

*) Опыт проведен в трехкратной повторности; + М соответствует среднеквадратичному отклонению.

Наблюдаемые изменения свидетельствуют о том, что карбонильные соединения могут не только накапливаться в питательной среде, но и расходоваться в процессе культивирования. Устойчивость образующихся карбонильных соединений в условиях культивирования была доказана в ходе контрольного эксперимента, который заключался в том, что питательную среду после проведения культивирования освобождали от клеток и выдерживали в условиях стерильности при 37°C в течение 72 часов. Оказалось, что величины Д505, определяемые до и после культивирования, практически не отличались. Это указывает на то, что наблюдаемое снижение уровня карбонильных соединений (см. табл.9.6) может осуществляться только за счет их утилизации клетками.

Однако абсолютные значения величины прироста оптической плотности являются недостаточно показательными. На наш взгляд, более информативной является оценка изменений оптической плотности в пересчете на одну клетку. Поэтому был предложен индекс изменения уровня карбонильных соединений под влиянием одной клетки (Икс), рассчитываемый по формуле , (1)где Nt является величиной, характеризующей количество клеток в 1 мл культуральной жидкости в момент времени t.

Значения этих индексов, рассчитанные по данным табл.2, представлены на рис.9.4 в зависимости от времени культивирования. Обращает на себя внимание то обстоятельство, что после первых суток культивирования величина Икс обратно пропорциональна величине посевной дозы. Причем в этот момент величины Икс для посадочных доз 50 и 300 тыс. кл./мл отличаются в 12 раз. Так как снижение посевной дозы клеток ухудшает условия клеточного роста, увеличивая лаг-период [20], и, очевидно, приводя к изменениям метаболических процессов, можно полагать, что предложенные индексы могут служить показателями культивирования. Рисунок 9.4 Зависимость величины индексов карбонильных соединений от продолжительности культивирования клеток ВНК-21 с различной посевной концентрацией

Если это предположение является верным, то наблюдаемая к концу культивирования нивелировка значения Икс может означать выравнивание условий культивирования. Более того, направление и интенсивность изменений индексов в течение последних двух суток для посевных доз 50 и 300 тыс. кл./мл могут свидетельствовать о том, что качество культивирования, проявляющееся в потенции клеток к размножению, для клеточного пула с низкой посевной дозой является повышенным. Повышение потенции пула клеток можно зарегистрировать на следующих пассажах культивирования. Поэтому был проведен опыт, результаты которого подтверждают это предположение (см. табл.9.7) Таблица 9.7 Изменение ростовой активности клеток ВНК-21 и уровня карбонильных соединений в надклеточной жидкости в зависимости от посадочной концентрации

Действительно, в этом опыте на первые сутки культивирования наблюдалось различие величин Икс для посевных доз 50 и 300 тыс. кл./мл, хотя и не такое существенное, как в предыдущем опыте. По истечении трех суток (конец первого пассажа) величины этих индексов сблизились. Это давало основание полагать, что характер изменений величин Икс аналогичен предыдущему опыту. Последующий пересев этих клеточных пулов с использованием стандартной посадочной концентрации клеток (100 тыс. кл./мл) выявил повышенную ростовую активность тех клеток, которые предварительно культивировались с посадочной концентрацией 50 тыс.кл./мл. Об этом свидетельствовали как величины достигаемой клеточной плотности, так и значения Икс .

Необходимо отметить, что аналогичные изменения ростовой активности клеток довольно часто наблюдаются при проведении биологического контроля путем культивирования клеток в течение 4-6 последовательных пассажей в тех случаях, когда не точно выдерживается или специально на одном из пассажей снижается посевная доза.

Из данных,  приведенных в табл.9.7, следует, что качество культивирования на втором пассаже для любой из использованных посадочных доз было более высоким, по сравнению с предыдущим пассажем. Можно было полагать, что такое адаптационное улучшение качества культивирования наблюдается не всегда. Для выяснения этого вопроса культивирование клеток ВНК-21 проводилось на питательных средах, обладающих как хорошими, так и плохими ростовыми характеристиками в течение четырех последовательных пассажей. Посадочная доза клеток во всех этих случаях составляла 100 тыс. кл./мл. Результаты экспериментов, приведенных в табл. 9.8 могут свидетельствовать о том, что среды, обладающие достаточно высокой ростовой активностью, оцениваемой по средней величине индексов пролиферации (ИП1-4) имеют тенденцию к снижению Икс . В токсичных питательных средах наоборот, эта величина резко повышается уже на втором пассаже, вслед за которым начинается дегенерация клеток.

Обращает на себя внимание то обстоятельство, что в питательных средах с низкой ростовой активностью величины Икс оказываются относительно высокими уже после первого пассажа. Эти наблюдения легли в основу серии экспериментов, предпринятых для выявления возможной количественной связи между величинами ИП1-4 и Икс, определяемыми после проведения первого пассажа (И1кс). Результаты экспериментов представлены на рис.9.5. Было получено регрессионное уравнение  ИП1-4=14,3 — 57,3 И1кс·106, (2)Рисунок 9.5.  Зависимость средней величины индексов пролиферации клеток ВНК-21 по четырем пересевам от индексов карбонильных соединений на первом пассаже

Уравнение (2) позволяет предсказывать величину ИП1-4, являющуюся ростовой характеристикой питательной среды, без проведения всех четырех последовательных пассажей культивирования. Среды, для которых И1кс·106>0,25, могут быть отнесены к токсичным. Ошибка измерений по ИП1-4 по уравнению (2) при уровне вероятности 95% составляет ±2.5 единиц ИП. Многократная проверка подтвердила справедливость этого уравнения, которое может использоваться в качестве основы экспрессной методики биоконтроля с применением клеток ВНК-21. Таблица 9.8 Изменения индексов карбонильных соединений в питательных средах, обладающих различными ростовыми характеристиками, при культивировании клеток ВНК-21 в течение четырех последовательных пассажей

*) Дегенерация клеток

Таким образом, на основании изучения динамики изменения уровня карбонильных соединений в питательной среде при культивировании клеток ВНК-21 предложен новый индекс (Икс), позволяющий количественно оценивать ростовые характеристики питательных сред. Наличие связи между этими параметрами, а также результаты экспериментов с варьированием посевной дозы клеток позволяют предположить, что предлагаемый индекс может служит критерием качества культивирования клеток ВНК-21.

Представлялось интересным проверить возможность применения этого индекса к другим типам клеточных культур. Можно было полагать, что для однотипных культур, например, для клеток почки зеленой мартышки (Vero) или для клеток почки собаки (МДСК), будут наблюдаться аналогичные зависимости, и использование индекса Икс для оценки качества культивирования в данных случаях будет оправдано. 9.1.3. Выбор клеточной тест-системыС позиций теории мягких косметологических воздействий главным критерием оценки качества косметических средств и их ингредиентов является результат воздействия на клеточные системы кожи и, в первую очередь, на клетки базального слоя эпидермиса. Эти клетки, расположенные в верхнем слое кожи, кроме того, что не являются дифференцированными (постоянно участвуют в делении), в отличие от любых внутренних клеточных структур организма, испытывают на себе прямое действие кислорода воздуха. На наш взгляд, это обстоятельство является принципиально важным.

Известно, что в любой клеточной системе в нормальных условиях реализуется процесс ПОЛ. Каждая клетка имеет несколько уровней защиты как от развития цепного процесса, каким является ПОЛ, так, по-видимому, и от продуктов ПОЛ. На молекулярном уровне в качестве антиоксидантных веществ, блокирующих развитие процесса ПОЛ, выступают аскорбиновая кислота (витамин С), α-токоферол (витамин Е) и глутатион. К ферментам, обладающим антиоксидантным действием, относится, например, супероксиддисмутаза. Антиоксидантным действием обладают также белки, содержащие связи S-H. Так, при повышении температуры культивирования на 1-2°C многие клетки начинают синтезировать белки, названные «белками теплового шока». В структуре этих белков содержится большое число сульфгидрильных (S-H) групп. Недавно было показано [21], что клетки начинают синтезировать белки теплового шока не только при повышении температуры культивирования, но и при воздействии ионов тяжелых (переходных) металлов и УФ-облучения. Это означает, что результатом и повышения температуры культивирования, и обработки клеток микроэлементами, и УФ-облучения клеток является ПОЛ, для блокировки которого клетки синтезируют белковые антиоксиданты — белки теплового шока.

Что же касается защиты клеточных систем от образовавшихся продуктов ПОЛ (альдегидов и кетонов), то информация об этом в литературе отсутствует. В действительности для того, чтобы изучать этот вопрос, необходимо было установить наличие эффекта. Соответственно, нужно было найти критерий оценки. Наши рассуждения сводились к тому, что наиболее вероятными клеточными системами, обладающими защитой от образующихся продуктов ПОЛ, являются клетки, непосредственно контактирующие с кислородом воздуха. Как уже отмечалось ранее, такой системой являются клетки эпидермиса.

В принципе, нужно было показать, что базальные клетки эпидермиса отличаются по отношению к продуктам ПОЛ от других клеточных линий. Мы полагаем, что для этих клеток не будет наблюдаться обратная зависимость между величиной Икс на первом пассаже и значениями ростовых характеристик, усредненных по четырем пассажам (см. п.9.1.2). Таким образом, наличие или отсутствие такой зависимости, на наш взгляд, может являться критерием существования отличий клеточных культур по отношению к продуктам ПОЛ.

Однако базальные клетки эпидермиса не существуют в виде паспортизованной перевиваемой линии. Их можно было выделять в виде первичной культуры, способной выдерживать ограниченное количество пересевов (пассажей), характеризующейся постепенным снижением ростовой активности от первого к последнему пассажу. Это обстоятельство приводило бы к увеличению ошибки экспериментов, и не позволяло бы делать однозначные выводы. По этой причине первичная культура базальных клеток эпидермиса оказалась неприемлемой не только для решения конкретной задачи, но возникал вопрос о возможности ее использования в качестве подходящей клеточной тест-системы для оценки качества ингредиентов косметических средств.

Одним из важнейших требований к клеточным линиям, претендующим на использование в качестве тест-систем, является их бесконечная перевиваемость и возможность культивирования в большом масштабе без существенных изменений морфологии и кариотипа. Это  позволяет нарабатывать необходимое количество клеток  для обеспечения всех контрольно-аналитических лабораторий и исследовательских косметологических центров клеточным материалом с идентичными параметрами (номер пассажа, морфология, кариотип и т.п.)
В этой связи мы обратили свое внимание на имеющуюся в ГНЦ ВБ «Вектор» клеточную линию ЛЭЧ (легкие эмбриона человека). Эта паспортизованная стабильная перевиваемая линия фибробластов с отработанной технологией культивирования, позволяющей получать нужное количество клеточного материала с идентичными параметрами.

Клетки легких, подобно клеткам базального слоя эпидермиса, напрямую взаимодействуют с кислородом воздуха, поэтому можно было полагать, что для их существования необходимо наличие особых механизмов защиты от повреждающего воздействия продуктов ПОЛ. Из этого следует, что наблюдаемая для клеток ВНК-21 зависимость ИП1-4 от Икс для клеток ЛЭЧ должна иметь иной вид или вообще не наблюдаются.

Действительно, в ходе многочисленных экспериментов оказалось, что какая-либо зависимость ростовых характеристик клеток от количества карбонильных соединений, выделяемых клетками на первом пассаже, отсутствует.

Полученные данные свидетельствуют о том, что клеточная линия ЛЭЧ принципиально отличается от линии внутренних клеток ВНК-21 (С-13) по отношению к продуктам ПОЛ. Можно полагать, что клетки ЛЭЧ имеют особый механизм защиты от продуктов перекисного окисления. На наш взгляд, аналогичными свойствами должны обладать базальные клетки эпидермиса. Поэтому, в соответствии с теорией мягких косметологических воздействий, на данном этапе исследований, на наш взгляд, целесообразно использовать клеточную линию ЛЭЧ в качестве тест-ситсемы для оценки качества ингредиентов косметических средств.

Необходимо подчеркнуть, что попытки найти подходы к созданию тест-систем, наиболее приближенных по своим характеристикам к базальным клеткам эпидермиса (кератиноцитам), продолжаются. Например, описаны методики выращивания кератиноцитов в качестве альтернативной системы для оценки качества косметических продуктов [22]. Системы усложнялись, например, посредством введения в клеточную популяцию кератиноцитов таких клеток, как меланоциты и даже клеток Лангерганса [22]. При этом, из-за большой сложности культивирования клеток Лангерганса, исследователи идут на целый ряд ухищрений, в значительной степени усложняя систему (введение в питательную среду колониестимулирующего фактора макрофагов гранулоцитов, фактора некроза опухолей и т.д.). Этот прием можно назвать процедурой реконструирования эпидермиса.

Однако, как уже отмечалось ранее, ни один из приведенных вариантов клеточных систем не может рассматриваться в качестве тест-системы, так как не удовлетворяет очевидным требованиям, предъявляемым к практическим тест-системам: простота и легкость получения стандартного пула и стандартность процесса культивирования.

Остаются клетки ЛЭЧ. Но даже имея одну и ту же клеточную систему можно изучать и измерять различные параметры в качестве отклика на то или иное воздействие. Так в сообщении [24] говорится о том, что большинство известных способов выявления токсичности парфюмерно-косметических средств с использованием культур тканей млекопитающих «недостаточно эффективны, поскольку они не выявляют ранние изменения метаболизма, а регистрируют конечный этап — гибель клеток в культуре, не позволяют выявлять разную степень неблагоприятного воздействия ксенобиотиков на метаболизм клеток мишеней:» Авторы с целью обнаружения ранних этапов токсического действия ксенобиотиков на одних и тех же клетках оценивают активность ферментов в качестве индикаторов нарушения клеточных мембран (лактатдегидрогеназа) и детоксикационной защиты (ДТ-диафораза), а также уровень индуцированного перекисного окисления в качестве показателя устойчивости к стрессу на клеточном уровне.

В качестве клеточных систем авторы использовали фибробласты кожи и клетки легких эмбриона человека.

В целом подход авторов цитируемого сообщения [24] понятен. Однако возникает вопрос о том, действительно ли использование в качестве критерия токсичности и не токсичности веществ ростовых характеристик клеточной тест-системы чем-то не устраивает токсикологов? Почему нужно стремиться к обнаружению ранних этапов токсического действия?

Давайте зададим себе вопросы. Могут ли ростовые брутто-характеристики клеточной системы не меняться в том случае, когда нарушается целостность клеточных мембран? Могут ли эти брутто-характеристики клеточных систем не зависеть от пониженной или повышенной активности фермента ДТ-диафоразы?

Ответы на эти вопросы, на наш взгляд, однозначны — при достаточно длительном воздействии токсичных веществ на клеточные культуры (например, при культивировании клеток в течение 4 — 5 пассажей) эффект должен быть обнаружен.

Теперь зададим себе вопрос о том, может ли отразиться уровень индуцированного ПОЛ на ростовых характеристиках клеточных культур?

В соответствие с проделанными нами исследованиями (см. п.9.1.2) можно полагать, что утвердительный ответ возможен для клеточных систем внутренних органов, прямо не контактирующих с кислородом воздуха. Не очень понятно, как поведут себя фибробласты кожи, расположенные в дерме, а вот для клеток ЛЭЧ такой зависимости не обнаружено (см. выше).

Но даже, если по двум критериям из трех будет наблюдаться корреляция с ростовыми характеристиками клеточной тест-системы, на наш взгляд, является целесообразным использование одного обобщающего критерия. Использование ростовых характеристик клеточной тест-системы позволит одномасштабно проранжировать брутто-эффекты разнообразных веществ, как это мы сделали при оценке предельно допустимых концентраций (Ciдоп) питательных ингредиентов (см.гл.5). В противном случае (при измерении нескольких параметров) мы вынуждены будем решать задачи следующего типа — какое вещество более токсично: то, которое увеличивает выход из клеток фермента лактатдегидрогеназы или то, которое вызывает ухудшение детоксикационной защиты клеток? Не следует также забывать, что в рамках теории мягких косметологических воздействий именно ростовая активность базальных клеток эпидермиса является определяющей в осуществлении динамического равновесного процесса формирования эпидермиса (см. гл.2).
Вне всякого сомнения, перечисленные выше и другие критерии могут быть использованы для изучения деталей механизма токсического действия.
Зададим себе ещё один вопрос — может ли возникнуть такая ситуация, когда испытуемое вещество при проверке его токсичности на клеточной тест-системе в течение 4 — 5 пассажей не меняет ростовых характеристик, морфологии и кариотипа клеток, а при введении его в аналогичной концентрации в организм возникают какие-либо отклонения? На наш взгляд, с очень большой долей вероятности можно полагать, что подобная ситуация не может быть реализована.
Подозреваю, что в этом вопросе у меня найдется много оппонентов. Поэтому предлагаю сформулировать очередной парадокс. Назовём его методологическим парадоксом. Остается проверить наличие этого парадокса с помощью специально поставленных экспериментов, которые предполагают проведение многочисленных параллельных опытов,  как на клеточной культуре, так и на животных.

К сожалению, в настоящее время нам неизвестны попытки проранжировать качество разнообразных компонентов косметических средств на одной и той же клеточной культуре. Можно полагать, что необходимость таких исследований является неоспоримой. Так, например, на наш взгляд, чрезвычайно важной при конструировании косметических композиций является оценка действия на клеточную тест-систему различных консервирующих добавок. Решение только этого вопроса может оказать существенное влияние на безопасность косметических средств.

Совершенно очевидно, что для быстрого накопления данных в указанной области исследований необходимо решение ряда организационных вопросов, включающих:

— выбор стандартной клеточной тест-системы;

— разработка унифицированной лабораторной методики контроля, позволяющей получать сопоставимые результаты в разных лабораториях;

— бесперебойная поставка клеточных пулов в любые исследовательские лаборатории и организации;

— проведение комплексных исследований одних и тех же образцов на клеточной тест-системе и на животных.

Полагаем, что приведённые в данном разделе рассуждения и результаты некоторых экспериментов позволяют сделать выбор в пользу клеточной линии ЛЭЧ в качестве тест-системы.

Мы полагаем также, что ГНЦ ВБ «Вектор» — основной держатель музейного штамма клеток ЛЭЧ, заинтересован в поставке необходимого количества клеток по требованию любых исследовательских лабораторий и организаций. Таким образом будут созданы условия для координации исследований в указанном направлении в России и за рубежом.

Обсудим возможные ограничения применения метода контроля, основанного на применении клеточных тест-систем.

Во-первых, следует подчеркнуть, что метод пригоден для оценки качества веществ, растворимых в водных системах. При этом совершенно не обязательно, чтобы вещество растворялось в воде в значительных концентрациях. Так, в своё время, перед нами стояла задача определения растворимости в воде более 30 пространственно-затрудненных фенолов, включая токоферолацетат, ионол и т.п. Оказалось, что все они растворяются в водных системах в концентрации 10-4-10-5 М, что для токоферолацетата соответствует примерно 4 мг/л. Для многих токоферолацетат является маслорастворимым в воде продуктом. Однако и той концентрации, которую можно достичь при его растворении в воде, достаточно для того, чтобы существенным образом повлиять на функционирование клеточных систем. Однако, недавно появилось сообщение [25], свидетельствующее о том, что нерастворимые в воде вещества могут использоваться для оценки их токсичности и мутагенности в экспериментах in vitro, если они вводятся в водную систему в виде наноэмульсий. Авторам этого сообщения удалось даже определить влияние липидов на различные клеточные системы. Таким образом, ограничения, связанные с плохой растворимостью веществ в водных системах, могут быть устранены.

Во-вторых, существенное ограничение метода in vitro заключается в необходимости стерилизации исследуемых образцов, так как появление посторонней микрофлоры в процессе культивирования может отразиться на качестве клеточной тест-системы и на воспроизводимости результатов измерений. Для термостабильных веществ с целью их стерилизации можно использовать термообработку. Растворимые в водных системах образцы можно стерилизовать с помощью мембранной технологии. Этот же способ стерилизации пригоден для оценки качества готовых ПРИЛОЖЕНИЕ 14 косметических композиций вне зависимости от типа использованной основы. При этом для желе- и гелеобразных препаратов стерилизующая фильтрация позволит отделиться от высокомолекулярных полимеров, используемых для гелеобразования, что, в общем, не противоречит процессу взаимодействия косметического средства с кожей, так как при его впитывании высокомолекулярные полимерные молекулы также остаются на поверхности и не участвуют во взаимодействии с клеточными системами кожи.
Для косметических композиций на жировой основе перед стадией стерилизующей фильтрации потребуется разрушить масляную эмульсию, добавляя, например, легко летучие органические растворители типа этилового эфира с последующим отделением водной фазы. Однако возможны и иные модификации процесса стерилизации (см. ниже).

На наш взгляд, движение в указанном направлении может привести к удивительным результатам и, по-видимому, к существенной переоценке «косметологических ценностей». 9.2. Коллагеновый путь старения кожиШирокое распространение получила гипотеза о том, что полипептидные цепи коллагена в старческом возрасте имеют повышенное содержание сшивок. Наблюдения, лежащие в основе этой гипотезы, привели к созданию коллагеновой теории старения [26]. В соответствии с теорией, накопление числа ковалентных сшивок в коллагене при увеличении возраста животного переводит белок в нерастворимое состояние. Вследствие чего он накапливается в тканях в ущерб клеткам, вызывая нарушение в функционировании органов и всего организма. Не вдаваясь в детали этой теории на уровне организма в целом, рассмотрим некоторые детали строения коллагеновых фибрилл и их взаимопревращения в коже животных.

Однако предварительно следует заметить, что причиной сшивок в молекуле коллагена могут быть совершенно разные химические процессы. Так, образование поперечных сшивок в коллагеновых фибриллах возможно за счёт модификации оксилизиновых остатков исходных α-цепей с участием такого внеклеточного фермента как лизилоксидаза. Образованные таким образом поперечные сшивки могут иметь тип лизинонорлейцина (-(СН2)4-NH-(CH2)4) или оксилизинонорлейцина (-(СH2)4-NH-CH2-CHOH-(CH2)2). Кроме этого, возможно появление сшивок за счёт образования связей S-S между цепями с участием цистеиновых остатков, которые присутствуют в молекулах коллагена любого типа. Следует также напомнить о возможности возникновения сшивок за счёт взаимодействия белковых молекул с продуктами ПОЛ (см. рис.9.3). Поэтому можно полагать, что и отношение вновь возникающих связей такого рода к внешним воздействиям будет различным. По-видимому, различным будет и участие этих связей в модификации общей структуры белка. 9.2.1. Строение коллагенаКоллагеновые фибриллы состоят из мономеров (скорее из отрезков), а каждый отрезок представляет собой три полипептидные цепи, свернутые относительно друг друга в виде спирали. Полипептидные цепи имеют несколько вариантов строения: α1(I), α1(II), α1(III), α1(IV) и, аналогично, варианты цепей α2, которые отличаются последовательностью аминокислот и поэтому, по-видимому, их синтез кодируются разными генами. Каждая α-цепь состоит приблизительно из 1050 аминокислот и имеет молекулярную массу около 100 кDа. Центральная часть α-цепи состоит из примерно 1000 аминокислотных фрагментов, соединённых через чередующиеся последовательности Гли-x-y. Таким образом, глициновый фрагмент занимает каждое третье положение в цепи. У глицина нет боковых заместителей — это самая маленькая (по размеру) аминокислота. Азот аминогруппы глицина одной цепи связан водородной связью с карбонильным кислородом глицина другой цепи. И таких водородных связей между тремя свитыми в спираль цепями может быть образовано более 600. Несмотря на то, что энергия таких связей составляет всего 3-5 ккал/моль, существование большого числа индивидуальных связей (две связи на три пептидные цепи) обеспечивают прочное удерживание трёх цепей в спиралевидном состоянии.

Остальные два положения «X» и «Y» в упоминаемой выше триаде Гли-x-y, могут занимать другие аминокислоты. Часто встречаются пролин и гидроксипролин. Чем выше суммарное содержание пролина и гидроксипролина, тем выше стабильность и температура плавления. Так, коллаген в коже телёнка содержит 232 фрагмента этих аминокислот, и температура его плавления равняется 39°C, в то время как коллаген кожи трески содержит 155 фрагментов пролина и гидроксипролина, что приводит к снижению температуры плавления коллагена до 16°C. Следует также подчеркнуть, что не только суммарное количество пролина и гидроксипролина определяет стабильность коллагена, но и соотношение указанных аминокислот в его молекуле. Так коллаген, в котором содержится только пролин, имеет температуру плавления в интервале от 20 до 25°C. Если же вместо пролина содержится гидроксипролин, температура плавления повышается до 37°C. Эти изменения объясняются возможностью гидроксипролинового фрагмента образовывать дополнительные водородные связи. Таким образом, сформулированный отрезок (проколлаген), состоящий из трёх пептидов, скрученных в спираль, сшивается с другими аналогичными отрезками, образуя коллагеновую фибриллу.

Коллагеновые фибриллы, в зависимости от места локализации в организме и от возраста, имеют разное строение. Например, кожа зародыша содержит больше коллагена типа III, чем типа I, а у взрослых это соотношение меняется на обратное. 9.2.2. Изменения строения коллагена, связанные с возрастомОтдельные фрагменты коллагеновых фибрилл диссоциируют в щелочных или кислых растворах, а также в растворах мочевины, тиоцианата и гуанидингидрохлорида. При нагревании до 40°C водородные связи между пептидными цепями разрушаются, и часть коллагена переходит в раствор. Этим обстоятельством пользуются для оценки соотношения количества нативного (растворимого) и сшитого (нерастворимого) коллагена, так как при наличии поперечных ковалентных сшивок в структуре коллагена переход его фрагментов в раствор оказывается затруднённым, а в пределе и невозможным.

Имеются отчётливые экспериментальные подтверждения того обстоятельства, что в процессе старения организма в коже снижается содержание растворимого с одновременным повышением содержания нерастворимого коллагена. Так, при экстракции водным солевым раствором из кожи крыс возрастом от 1,5 до 24 месяцев обнаружено, что количество экстрагируемых одиночных α-цепей с возрастом быстро уменьшалось, а количество тримеров α-цепей увеличивалось, а вот количество димеров во всех возрастных группах оставалось постоянным. Одновременно с этим неуклонно нарастало количество нерастворимого коллагена (см. рис.9.6) Рисунок 9.6 Изменение с возрастом суммарного содержания различных видов коллагена в сухожилии хвоста крысы (по данным работы [27])

Результаты экспериментов, представленные на рис.9.6, также однозначно свидетельствуют о протекании процессов, ведущих к образованию сшивок между индивидуальными α-пептидными цепями в молекуле коллагена.

Однако имеются и другие сведения. При измерении числа сшивок в сухожилии коров трёх- и двенадцатилетнего возраста после расщепления коллагена цианогенбромидом никакой разницы в количестве ковалентных сшивок не обнаружили [28]. С другой стороны, было показано, что число сшивок, образованных пиридинолином, в коллагене рёберных связок и ахиллесова сухожилия крыс после наступления зрелости растёт, а у человека после 30 лет — снижается [29]. А вот один из основных типов сшивок в коже — оксилизинонорлейциновый с возрастом не меняется [30]. На основании этих данных можно было бы прийти к выводу о том, что образование поперечных сшивок в коллагене не является первичной причиной старения. Однако все эти исследования относятся к вполне определённым видам поперечных сшивок и не учитывают возможность изменения структуры коллагеновых фибрилл, например, за счёт модификации поверхности молекулы коллагена и/или посредством межфибрилльных сшивок, протекающих в ходе взаимодействия с высоко реакционноспособными продуктами ПОЛ.

Поэтому, на наш взгляд, для дальнейших рассуждений нет необходимости в сопоставлении весьма неоднородного массива экспериментальных данных. Например, как сопоставить данные о количестве поперечных сшивок в сухожилии коров после расщепления коллагена цианогенбромидом с результатами, полученными посредством экстракции коллагена из кожи крыс солевым раствором.

Предлагаем принять за основу приведённые выше данные о том, что в процессе старения организма в коллагене увеличивается количество сшивок. 9.2.3. Изменение содержания количества коллагена в коже животных в процессе старенияВозвращаясь к рассмотрению графика, представленного на рис.9.6, отметим, что в сухожилии хвоста крыс в процессе старения общее количество коллагена возрастает. Однако это обстоятельство находится в противоречии с более поздними данными [31] и с широко распространённым среди косметологов-профессионалов мнением о том, что общее количество коллагена в коже в процессе старения наоборот снижается. Так в работе [31] в графическом виде (см. рис.9.7) приводятся данные, свидетельствующие о том, что концентрация коллагена в коже человека снижается в процессе старения.

Не обсуждая гигантский разброс значений содержания коллагена в коже после 50 лет, авторы приходят к мнению о том, что для поддержания кожи в нормальном состоянии необходимо ингибировать процесс ферментативной деградации коллагена. С этой целью предлагается использовать специфические ингибиторы коллагеназы, предназначенной для расщепления коллагеновых фибрилл. На особенностях этого процесса мы остановимся в дальнейшем. А сейчас попробуем сформулировать очередной парадокс, вытекающий из сопоставления данных, приведённых на рис. 9.6 и 9.7. Назовём его парадоксом деградации и синтеза коллагена. Рисунок 9.7 Зависимость содержания коллагена в пересчете на единицу площади кожи от возраста человека

Мне могут возразить, так как на рис.9.6 представлено увеличение суммарного веса коллагена в сухожилии хвоста крысы, а на рис.9.7 — снижение содержания коллагена в коже человека. Однако не следует делать скоропалительных выводов. Во-первых, фермент коллагеназа всегда находится в зоне расположения «своего» субстрата. Не важно, в каком органе животного находятся коллагеновые фибриллы — в сухожилии хвоста или в коже. Предназначение коллагеназы в том и состоит, чтобы «расшивать» коллагеновые нити, способствуя процессу их обновления, так как коллагеназа совместно с протеолитическими ферментами деструктурирует коллагеновую молекулу до низкомолекулярных пептидов, которые вновь в качестве исходного материала возвращаются в фибробласты, в которых и происходит синтез новых предшественников коллагена. Как отмечают авторы работы [31], за счёт этого процесса коллаген постоянно обновляется с полупериодом жизни (τ1/2) около 15 суток. И теперь для разрешения ситуации, представленной в виде парадокса, следует предположить, что по каким-то причинам в процессе старения организма коллагеназа крысы замедляет расщепление коллагена, сдвигая динамическое равновесие в сторону увеличения его синтеза, а человеческая коллагеназа наоборот усиливает свою активность, сдвигая равновесие в сторону снижения концентрации коллагена. Можно было, конечно, объяснить последнее обстоятельство увеличением скорости синтеза коллагена в фибробластах кожи. Однако ряд косвенных данных позволяет считать такое объяснение маловероятным.

Так как причины различного реагирования систем синтеза и деструкции коллагена в хрящике крысиного хвоста и в коже человека не ясны, и, более того, кажутся маловероятными, следует обратить особое внимание на данные, представленные на рис.9.7.

Авторы работы [31] приводят также график, свидетельствующий о том, что в процессе старения организма снижается толщина дермы (см. рис. 9.8) Рисунок 9.8 Изменение толщины кожи человека в процессе старения
( — женщины, — мужчины)

На наш взгляд, график в первую очередь демонстрирует, насколько сложны для интерпретации биологические (биохимические) эксперименты. Вне всякого сомнения, можно было провести соответствующие линии с гораздо большим или меньшим наклоном без существенного ухудшения качества корреляции.

Но, даже оставаясь на позиции авторов цитируемой работы, для ответа на вопрос о том, насколько изменится содержание коллагена в коже, целесообразно относить его не к единице площади кожи, а к единице объёма. Приняв (вместе в авторами) за основу приведённую на рис.9.8 линию, характеризующую снижение толщины дермы в процессе старения (для женщины и мужчины), мы провели перерасчёт графика, представленного на рис. 9.7.

Полученные результаты, приведённые на рис. 9.9, на наш взгляд, не позволяют говорить о каком-либо существенном снижении количества коллагена в коже человека в процессе старения. Более того, как мы уже отмечали выше, однозначность приведённой на рис.9.8 корреляции может вызывать сомнение. Поэтому, если увеличить угол наклона приведённой на этом рисунке линии, то на рис.9.11 можно получить зависимость, аналогичную той, которая характеризуется накоплением коллагена в сухожилии хвоста крыс (см. рис.9.6) Вот и весь парадокс! Рисунок 9.9 Изменение концентрации коллагена на единицу объёма кожи человека в зависимости от возраста

Однако для окончательной ликвидации парадокса деградации и синтеза коллагена необходимо провести дополнительные тщательные исследования. Во всяком случае, необходимо в обязательном порядке разобраться в причинах аномального разброса точек на рис.9.7 и 9.9 (после 50 лет) и провести детальный регрессионный анализ данных, приведённых на рис.9.8. В настоящее время следует признать, что в вопросе о том, накапливается коллаген в коже в процессе старения организма или, наоборот, его концентрация снижается, ясности нет. А значит существует сформулированный нами парадокс.

Более того, расположение точек на рис. 9.9 позволяет сформулировать «крамольное» предположение о том, что суммарное количество коллагена в пересчете на единицу объема кожи в течение всей жизни человека фактически не меняется. Следствия, которые вытекают из этого предположения, как будет показано в дальнейшем, могут поколебать некоторые «устойчивые» на данный момент косметологические постулаты.

Для объяснения изменений, происходящих с коллагеном в коже человека, можно привлекать многочисленные данные о влиянии ферментов и продуктов перекисного окисления липидов, способствующих образованию поперечных сшивок, и обсуждать возможное влияние на этот процесс изменений, протекающих на генетическом уровне (см., например, [31]). Однако, при этом можно «утонуть» в разнообразных взаимосвязанных фактах и проявлениях, не добравшись до сути изучаемого (весьма сложного) процесса. На наш взгляд, в таких случаях является целесообразным использование в определённой степени упрощённых логических построений, которые опираются на имеющиеся экспериментальные данные и справедливость которых может быть проверена опытным путём.

В данном случае предлагаем обсудить процесс синтеза и деструкции коллагена с учётом наличия динамического равновесия между скоростями этих реакций. 9.2.4. Равновесный процесс синтеза и деструкции коллагенаДля обсуждения этого вопроса нам потребуется вспомнить сведения о коллагене и о его локализации в коже.
Коллаген вместе с эластином и ретикулином является опорно-структурным белком, локализованным в дерме. Он составляет основную массу дермы (до 70% в пересчёте на сухой вес) и является главным структурным компонентом соединительной ткани. Этот специфический по аминокислотному составу и по строению белок не растворяется в воде в обычных условиях (только набухает). Протеолитические ферменты (пепсин, трипсин, папаин) расщепляют лишь растворимые фрагменты коллагеновых нитей. Ферментом, который способен перевести коллагеновую нить (фибриллу) в растворимое состояние за счёт частичного гидролиза, является коллагеназа.

В целом, в упрощённом виде процесс синтеза и деструкции представлен на рис.9.10. Рисунок 9.10 Схема процесса синтеза и деструкции молекул коллагена

Для такого рода процессов в норме характерно обязательное наличие равенства скоростей:Vсинт = Vдестр.Равенство скоростей синтеза и деструкции коллагена определяет наличие устойчивого динамического равновесия. Естественно предположить, что при увеличении скорости синтеза или снижении скорости деструкции коллагеновых фрагментов может наступать состояние организма, связанное с излишней коллагенизацией дермы и, наоборот, при снижении скорости синтеза и увеличении скорости деструкции может наступить деколлагенизация ткани дермы.

На наш взгляд, существует заблуждение, связанное с тем, что полагают, будто бы синтез коллагена осуществляется быстрее, чем его деградация. Так в монографии [32] в разделе «Обмен коллагеновых белков» сообщается следующее: «В нормальных условиях коллаген синтезируется со скоростью сравнимой с темпом образования других белков. Но разрушается коллаген очень медленно (период полураспада 50-60 дней, что является особенностью его обмена. Преобладание синтеза коллагена над его деструкцией обусловлено тем, что вновь образованные молекулы этого белка слишком ригидны и недоступны для действия протеолитических ферментов». Возникает интересная ситуация. С одной стороны, многие полагают, что количество коллагена в коже в процессе старения организма снижается (см. п. 9.2.3). А с другой стороны, снижение скорости деструкции коллагена при нормальной скорости синтеза должно приводить к его накоплению.

Пусть извинят меня уважаемые читатели, но мне придётся использовать примитивную аналогию из арсенала школьных задач о бассейне, в который через одну трубу вливается вода, а через другую — более узкую — выливается. Бассейн переполнится. Логика требует накопления коллагена в коже. Весь вопрос только в том, когда произойдёт переполнение этого «бассейна». Следует заметить, что автор цитируемого высказывания отчётливо формулирует это обстоятельство: «Преобладание синтеза над распадом определяет значительное накопление коллагена во внеклеточном пространстве в виде волокон». И вопрос заключается в том, какими темпами идёт накопление коллагена и какова, всё-таки, истинная причина его накопления.

Нам кажется, что автор вышеприведённых высказываний слишком драматизирует различия в скоростях синтеза и деструкции коллагена. Визуально и в 20, и в 30 лет и даже в более старшем возрасте изменения в состоянии кожи являются быстрыми, затрагивая только самые «слабые места» поверхности нашего тела (обычно первые морщинки появляются в уголках глаз, где самая тонкая кожа). Таким образом, процесс накопления визуальных изменений в состоянии кожи человека растянут на несколько десятков лет. А ведь если бы действительно коллаген разрушался «очень медленно», то мы были бы вправе ожидать появления этих изменений в гораздо более молодом возрасте (не приведи, Господи!).

Можно было бы, конечно, предположить, что по каким-то причинам скорость деградации коллагена, достаточно высокая в раннем периоде развития организма, замедляется в последующие годы, например, за счёт снижения активности фермента коллагеназы. К сожалению, у нас нет информации об изменении активности коллагеназы в процессе старения организма.

Таким образом, наиболее приемлемым вариантом описания состояния системы, связанной с синтезом и деструкцией коллагеновых нитей при нормальном состоянии организма, является обязательное равенство скоростей Vсинт. и Vдестр.  При этом,  величины абсолютных значений должны определять время жизни коллагеновой нити (τ). Чем выше равновесные скорости синтеза и деструкции, тем ниже значение  и наоборот.

Как уже отмечалось ранее (см. п. 9.2.2), в процессе старения организма в коже снижается содержание растворимого коллагена с одновременным повышением концентрации его нерастворимых форм, что свидетельствовало об увеличении числа межмолекулярных сшивок и возможном изменении структуры коллагена. Все это не могло не отразиться на процессе взаимодействия коллагеназы с коллагеновыми нитями, так как ферменты зачастую обладают значительной специфичностью. Поэтому при накоплении сшивок в молекуле коллагена коллагеназа в определенный момент могла потерять свою активность по отношению к видоизмененному под влиянием сшивок коллагеновому субстрату. То есть, фактически фермент мог потерять способность «узнавать» молекулу коллагена и реагировать с ним. Действительно, обнаружилось, что сшитый (нерастворимый) коллаген является устойчивым по отношению к коллагеназе [33], а измеряя количество коллагена, не реагирующего с эндогенной коллагеназой организма, можно определять возраст человека.

Таким образом, процесс старения организма сопровождается накоплением нерастворимых форм коллагена, которые не реагируют с коллагеназой. Это может означать только одно — некоторое количество коллагенового субстрата выводится из рассмотренного выше равновесного процесса синтеза и деструкции коллагеновых нитей, и время жизни (τ) этих молекул увеличивается до бесконечности. В результате количество сшивок в молекулах нереакционноспособного по отношению к коллагеназе коллагена продолжает увеличиваться, и коллагеновый матрикс кожи становится все более жестким, что приводит к снижению эластичности кожи и появлению (фиксации) морщин. Жесткий коллаген накапливается в коже, неотвратимо способствуя проявлениям ее старения. Оставшиеся без изменения коллагеновые фрагменты или фрагменты, количество сшивок в которых оказалось недостаточным для того, чтобы заблокировать деструкцию коллагена, продолжают участвовать в циклическом равновесном процессе, приводя к синтезу новых немодифицированных (если хотите — «молодых») коллагеновых структур. Вообще, такого рода циклические равновесные процессы есть не что иное, как естественная система защиты структуры биополимеров от возможных изменений, способствующая увеличению стабильности биологических структур и организмов. К этим процессам с участием других биополимеров мы еще вернемся. А сейчас попробуем сформулировать важные с точки зрения косметологов последствия участия коллагеновых структур в обсуждаемом равновесном процессе.

Примем за основу высказанное ранее предположение (см. п.9.2.3) о том, что суммарная объемная концентрация коллагена (растворимого и нерастворимого или коллагена, не взаимодействующего с эндогенной коллагеназой) в течение всей жизни человека остается величиной постоянной, о чем свидетельствует рис.9.11. Такое предположение нам представляется в достаточной степени обоснованным, так как, если существует механизм регулировки скорости синтеза пептидных предшественников коллагеновых нитей в фибробластах дермы, то основой такой регулировки, на наш взгляд, должна быть именно объемная концентрация коллагенового матрикса кожи.

Тот факт, что в процессе старения организма часть коллагеновых структур выводится из рассматриваемого динамического равновесия (синтез-деструкция), может служить косвенным доводом в пользу существования механизма регулировки синтеза коллагеновых предшественников фибробластами кожи. В противном случае мы должны были неизбежно столкнуться с явлением избыточной коллагенизации структур кожи. Такой механизм регулировки напоминает обсуждаемый нами ранее (см. гл.1) процесс контактного торможения деления клеток, в соответствии с которым при формировании монослоя в процесс деления вовлекаются только клетки, не имеющие соседей, а при полном формировании монослоя деление большинства видов клеток полностью прекращается!

Высказанное предположение слишком серьезно, чтобы не сформулировать очередной парадокс, который можно обозначить парадоксом регулировки синтеза коллагена.

Интересным представляется также, то обстоятельство, что скорость деструкции коллагена при наличии механизма регулировки синтеза, в свою очередь, может регулироваться автоматически. Действительно, если в зоне действия эндогенной коллагеназы накапливаются сшитые коллагеновые структуры, а количество «молодых» или не очень модифицированных коллагеновых нитей, с которыми фермент может взаимодействовать, постепенно снижается, то снижается и общая скорость деструкции, зависящая от концентрации реакционноспособного субстрата. Наряду с этим увеличивается время жизни коллагеновых структур, вовлекаемых в процесс динамического равновесия, что, в свою очередь, увеличивает вероятность накопления сшивок, и ускоряет процесс старения.

Имеются сведения о том, что обмен коллагена с возрастом постепенно замедляется, так как развитие сопровождается уменьшением скорости синтеза и разрушения коллагена. Отмечается также, что коллагеназа, когда в ней нет необходимости, существует в неактивной форме (М.Канунго, 1982). Эти факты, по нашему мнению, соответствуют высказанному ранее предположению, сформулированному в виде парадокса.

А теперь обратимся к возможным следствиям высказанного выше предположения. Если суммарное количество коллагена в единице объема кожи в течение всей жизни человека постоянно, то можно поставить под сомнение необходимость использования и полезность косметических препаратов, содержащих в своем составе ингредиенты коллагеновой природы.

Допустим, мы используем кремовую композицию, содержащую коллаген, извлекаемый из соединительной ткани или хрящей молодых животных. Естественно полагать, что молекулы такого коллагена практически не имеют внутри- и межмолекулярных сшивок и поэтому достаточно эластичны. Очевидным результатом нанесения такого крема на поверхность кожи окажется сиюминутное повышение ее эластичности. Однако, учитывая наличие предела проницаемости кожи (см. гл.4), можно полагать, что эффект применения такой композиции в большинстве случаев исчезнет сразу после процедуры удаления крема с поверхности кожи. В достаточной степени высокомолекулярные коллагеновые структуры не могут проникнуть в глубь кожи, оставаясь на ее поверхности. Совершенно иная ситуация возникает при использовании коллагеновых структур с молекулярными массами ниже 100 кDa. Обладая способностью преодолевать трансэпидермальный барьер, эти структуры, с одной стороны, более эффективно повышают эластичность кожи, влияя не только на ее поверхность, но и затрагивая более глубокие слои. Однако, с другой стороны, попадая в зону действия коллагеназы, коллагеновые фрагменты способны отвлекать фермент от взаимодействия с собственным коллагеновым матриксом кожи и, в результате, скорость основной реакции снижается — наступает известное в биохимии состояние, называемое конкурентным торможением основного процесса. Такое торможение увеличивает время жизни собственных коллагеновых структур и, соответственно, вероятность образования внутри- и межмолекулярных сшивок. Все это неотвратимо ведет к ускорению старения кожи. Таким образом, если наши предположения верны, то с позиций теории мягких косметологических воздействий использование кремовых композиций, содержащих коллагеновые фрагменты, способные преодолевать трансэпидермальный барьер, при кажущейся сиюминутной полезности может иметь отрицательные последствия, ускоряя процессы старения коллагеновых структур кожи.

Ранее (см. п.7.2.1) мы намеревались сформулировать парадокс, суть которого сводится к тому, что можно подвергнуть сомнению целесообразность использования в косметологии любых сырьевых источников коллагенового происхождения, способных отвлекать фермент коллагеназу от основной реакции. Предлагаем назвать это обстоятельство парадоксом отвлекающих связей и будем надеяться, что специальные эксперименты подтвердят или, наоборот, позволять отбросить сделанные нами предположения, которые (следует подчеркнуть) появились не на пустом месте.

Ну, а пока нам придется отложить в сторону рекламный лист ООО НПФ «ЛитА-Цвет», в котором красивыми словами описывается «уникальный биологический стимулятор тканей…, который по своему аминокислотному составу близок к фармакопейному коллагену, однако во многом превосходит его уже тем, что содержит биокомпоненты как высокой, так и низкой молекулярной массы…» Авторам этой разработки, в свете всего вышеизложенного, можно посоветовать убрать из состава гидролизата «среднюю фракцию» с молекулярными массами компонентов от 500 до 100000 Da.

И еще одно следствие, вытекающее из предыдущих рассуждений, нужно иметь в виду. Оно связано с необходимостью тщательной проверки исходного сырья для производства косметических препаратов на совместимость с ферментами кожи и, в частности, с коллагеназой. 9.2.5. Биохимическая тест-система для оценки качества сырья для производства косметических препаратовКак уже указывалось ранее (см. гл.2), теория мягких косметологических воздействий определяет подходы, позволяющие влиять на биохимические процессы и взаимопревращения клеточных систем кожи с целью замедления ее старения. В этой связи выводы, которые были сделаны выше, точно соответствуют положениям сформулированной нами теории. Поэтому вполне естественным выглядит предложение о необходимости контроля исходного сырья для производства косметических препаратов на совместимость с ключевыми ферментами кожи.

Все началось с образцов глицерина, которые находились в наших руках: два образца разного качества производства Новосибирского масложиркомбината, глицерин квалификации «хr», образец химически синтезированного глицерина, полученного на предприятии Алтайхимпром (г.Славгород), и образец фирмы «Сигма». Оказалось, что все образцы без исключения полностью инактивировали коллагеназу, содержащуюся в физиологическом растворе. В результате длительных экспериментов по очистке глицерина и его облучению ускоренными электронами с применением ИK-спектрометра с фурье-преобразованием, позволяющего суммировать (накапливать) и вычитать спектральные характеристики образцов, было показано, что неочищенные образцы глицерина в микроколичествах содержат примесь, характеризующуюся поглощением в области 1650 см-1. Естественным было предположить, что в глицерине присутствует акролеин, образующийся из глицерина в процессе протекания следующей реакции:

молекула которого имеет характеристическое поглощение в указанной области ИK-спектра. Следует заметить, что в соответствии с техническими условиями глицерин не должен содержать акролеин в заметных количествах. Однако и микроколичеств акролеина оказалось достаточно, чтобы инактивировать фермент — коллагеназу. Так как акролеин способен образовываться из глицерина при комнатной температуре в присутствии кислорода воздуха, возникла технологическая проблема, решение которой оказалось очень простым. Исходя из предположения, что наиболее реакционноспособной в акролеине является альдегидная группа, способная взаимодействовать с аминогруппами белков, пептидов и аминокислот, мы предложили [34] способ обработки глицерина, включающий приготовление смеси глицерина с биологически активными реагентами пептидно-белковой природы с их общей концентрацией в глицерине от 0,05 до 1 мг/мл с последующим выдерживанием смеси в течение времени, достаточном для полной нейтрализации реакционноспособных примесей в глицерине. Проще говоря, мы вначале инактивируем акролеин с помощью вещества белково-пептидной природы, а затем уже показываем, что активность фермента в присутствии модифицированного глицерина (глицерин марки «Экстра») полностью сохраняется.

На наш взгляд, применение модифицированного глицерина является оправданным в тех случаях, когда его содержание в косметических препаратах составляет заметную величину, например, при производстве «душистых» глицеринов, средств для смягчения рук и т.п.

В описанной выше ситуации с глицерином вначале была выявлена причина инактивации фермента. А как быть с многокомпонентными сырьевыми системами?

Нас заинтересовали отдушки и эфирные масла. Следует заметить, что в большинстве рассмотренных нами составов (см.Приложение 1) типы, составы отдушек и даже их обозначения просто не приводятся. Это очень симптоматично, так как разработчики косметических препаратов просто считают, что влияние этих систем на кожу не является существенным. Главной задачей такого рода ингредиентов, естественно, является маскировка запахов основного технологического сырья и, возможно, придание привлекательности косметическому препарату посредством запаха. Не зря у потребителя косметических средств первым делом возникает желание понюхать содержимое флакона.

Таким образом, компоненты отдушек, используемых в качестве ингредиентов косметических средств, испаряясь с поверхности нанесенного на кожу косметического средства, создают над поверхностью тела разнообразные ароматы. Однако, являясь ингредиентами косметических средств и обладая обычно малыми молекулярными массами, они легко преодолевают трансэпидермальный барьер, попадая в зону действия клеточных и ферментативных систем кожи.

К моменту начала работы у нас в руках было двадцать образцов отдушек, любезно предоставленных нам фирмами «Роберте» (Франция) и «Драгоко» (Австрия). Перечень образцов отдушек приведен в табл. 9.14.

Испытания проводились при концентрации фермента не менее 0,05 мг/мл, времени выдержки опытного образца с ферментом при комнатной температуре в течение 24 часов и концентрации отдушки равной 1%. В качестве положительного контроля использовали раствор фермента в физиологическом растворе при рН7.2. В качестве отрицательного контроля использовали 1% раствор формалина, смешанный с раствором фермента. Таблица 9.14 Перечень образцов отдушне, проверенных на совместимость с коллагеназой

При пятнадцатиминутном экспонировании полученных после суточного выдерживания растворов образцов только пять отдушек (2 образца фирмы «Robertet» и 3 образца фирмы «Dragoco») показали результат, близкий к положительному контролю, то есть оказались совместимыми с коллагеназой. Соответственно, пять образцов из двадцати испытанных подобно формалину в указанных условиях подавили активность фермента (три образца фирмы «Robertet» и два образца фирмы «Dragoco»).

Для остальных десяти образцов получены промежуточные результаты, свидетельствующие о частичном подавлении активности фермента.

Мы специально не указываем конкретные образцы отдушек, проявивших совместимость и несовместимость с коллагеназой, так как использованная методика имеет некоторые особенности, которые требуют детализации и уточнения*). Сегодня мы готовим «плацдарм» для дальнейшего продвижения в данном направлении. Но факт остается фактом — отдушки, используемые в качестве ингредиентов косметических средств, не являются нейтральными для кожи веществами, и в соответствии с положениями теории мягких косметологических воздействий возникает необходимость их тестирования как с применением описанного выше биохимического подхода, так и на клеточных тест-системах. Перед исследователями открывается совершенно нетронутое поле деятельности. Однако, следует отчетливо понимать, что пройдет еще немало времени, прежде чем разработчики косметических препаратов начнут указывать в составах типы используемых отдушек и, тем более, избегать применения препаратов, не совместимых с ферментами кожи. *) Информация может быть передана фирмам — производителям отдушек и разработчикам косметических средств на определенных условиях с обязательным соблюдением конфиденциальности. 9.2.6. Фермент коллагеназа в качестве ингредиента косметических препаратовИмеется еще одно интересное для косметологов следствие функционирования рассмотренного динамического равновесного процесса синтеза и деструкции коллагеновых волокон. Оно сводится к тому, что если собственная (эндогенная) коллагеназа, расположенная в зоне коллагенового матрикса кожи с возрастом начинает «пропускать» некоторые модифицированные сшивками коллагеновые структуры, которые, накапливаясь в коже снижают ее эластичность, то возникает желание помочь организму за счет введения дополнительных количеств фермента. При этом необходимо, чтобы были выполнены следующие основные условия:

— молекулярная масса фермента должна обеспечивать реальный доступ к внутренним структурам кожи;

— вводимая коллагеназа должна обладать меньшей специфичностью действия по сравнению с эндогенной коллагеназой кожи человека или взаимодействовать с более широким набором субстратов;

— взаимодействие с клеточными системами должно быть в достаточной степени щадящим.

Существует большое количество ферментов, обладающих коллагенолитическим действием.

Внимание косметологов привлекает коллагеназа, выделенная из печени дальневосточных крабов, технология производства которой освоена в Тихоокеанском институте биоорганической химии.

По данным работы [35], очищенный препарат коллагеназы содержит набор веществ с молекулярными массами от 16 до 32 кDa. Доминирующей (до 80%) является молекулярная масса 23,5 кDa.

Этот препарат обладает способностью разрушать пептидные связи в природном коллагене. В зависимости от степени очистки коллагенолитическая активность препарата может сопровождаться трипсиноподобной, химотрипсиноподобной, карбогидразной и ДНКазной активностями.

Имеющиеся данные позволяют полагать, что коллагеназа, выделенная из печени дальневосточных крабов, отличается специфичностью действия, например, от препаратов коллагеназ, выделяемых микроорганизмами рода Clostridium.

Коллагенолитический фермент из печени краба проявляет высокую активность по отношению к различным типам природного коллагена. Так он, в отличие от микробных коллагеназ, расщепляет коллаген III типа из кожи теленка и коллаген IV типа из хрусталика глаза быка. Являясь ферментом, относящимся к классу сериновых протеаз, коллагеназа гидролизует специфические субстраты для трипсина, химотрипсина и эластазы.

Показано также [35], что очищенная коллагеназа, выделяемая из печени крабов, в определенных концентрациях совместима с многими клеточными системами. Так, обработка монослоя таких перевиваемых клультур клеток, как L68, SV1, MDCK, Hep2 и ЛЭЧ приводит к достаточно быстрому отслоению клеток от твердого субстрата с сохранением их морфологии и низким процентом мертвых клеток при концентрации фермента от 0,0001 до 0,01%.

Таким образом, рассмотренные выше характеристики коллагенолитического препарата позволяли полагать наличие потенциальной возможности его эффективного использования в качестве добавки к косметическим композициям, предотвращающим или тормозящим механизм старения кожи, связанный с накоплением сшивок в молекулах коллагена. Действительно, молекулярная масса фермента позволяет ему с определенной степенью вероятности достигать зоны локализации коллагеновых нитей (сосочковый слой дермы). Те немногочисленные сведения об особенностях специфичности действия ферментативного препарата позволяли надеяться на реализацию своеобразной «помощи» эндогенной коллагеназе человека. Так, например, для косметологов чрезвычайно важным является вовлечение в реакцию гидролиза тех коллагеновых нитей, с которыми уже не может взаимодействовать собственная коллагеназа. Если бы такой процесс в действительности был запущен с помощью добавляемой экзогенной коллагеназы, то это, образно говоря, напоминало бы эффект дополнительного дворника, вычищающего «мусор» из тех углов, куда не дотягивается метла основного уборщика. Однако, мы должны признать, что для окончательных утверждений о реализации такого рода процесса у нас нет достаточных оснований. Как обычно в таких случаях, при отсутствии информации можно сформулировать парадокс эффекта дополнительного дворника.

Тем не менее, введение в косметические средства коллагеназы, выделенной из печени крабов, кажется оправданным с той точки зрения, что воздействуя на коллагеновые нити совместно с эндогенной коллагеназой и ускоряя тем самым скорость их деградации, препарат будет способствовать снижению времени жизни коллагеновых нитей и, соответственно, снижению вероятности накопления сшивок. А щадящее действие препарата на клеточные культуры с позиций теории мягких косметологических воздействий разрешает движение разработчиков косметических средств в указанном направлении.

По информации Тихоокеанского института биоорганической химии, в НПО «Косметология» (г.Москва) было проведено экспериментальное изучение безвредности, биохимических механизмов действия, а также влияния на структуру кожи комплекса ферментов «коллагеназа крабов». На основании этих исследований рекомендовано использовать этот препарат в концентрации 0,75% в косметических препаратах, предназначенных для ухода за увядающей кожей лица. К сожалению, мы не имеем информации об активности и качестве используемой в этих экспериментах коллагеназы. Однако несколько смущает то обстоятельство, что рекомендуемая концентрация превышает щадящую для клеток концентрацию в 75-7500 раз [35]. Причины такого превышения могут быть связаны с различиями в активностях (чистоте) испытуемых препаратов. Однако нам это представляется маловероятным. Скорее всего, мы снова имеем дело с косметологическими парадоксами, связанными с безоглядным использованием аномально высоких концентраций биологически активных веществ. И в этом случае разработчикам косметических средств нет никакого дела до того, что будет происходить с клетками базального слоя эпидермиса при воздействии ферментов в «рекомендуемых» концентрациях. Если же подобный вопрос задать цитологу, клеточному биотехнологу («культуральщику»), то в ответ можно получить любопытные высказывания. Складывается такое впечатление, что косметологи скорее уподобляются «кожевенных дел мастерам», так как сопоставимые концентрации препарата «Коллагеназа краба» используются при выделке шкур животных (информация Тихоокеанского института биоорганической химии) для получения одежных кож, кож для верха обуви из сырья крупного рогатого скота и особо эластичных кож из свиного сырья. Технология выделки кож с использованием коллагеназы масштабирована на Московском кожевенно-обувном комбинате и кожевенном заводе им.Тельмана (АО «Роскон», г.Москва), и получаемая продукция по физико-химическим характеристикам вполне соответствует нормам. Любопытнейшая аналогия!

Возвращаясь к основной задаче косметологии, предусматривающей противодействие процессу старения кожи (см. гл.1), и к теории мягких косметологических воздействий, позволяющей влиять на биохимические процессы и взаимопревращения клеточных систем кожи, для реализации этой основной задачи (см. гл.1) необходимо подчеркнуть, что даже те концентрации фермента, которые использовались авторами работы [35] для достижения своих целей (отделение монослоя от субстрата, диспергирование животных тканей), по-видимому, не могут служить ориентиром для конструирования «щадящих» косметических средств. Наиболее приемлемые концентрации коллагеназы в косметических средствах, на наш взгляд, не должны значительно превышать содержание коллагеназы в структуре кожи человека. По крайне мере, клеточные тест-системы должны выдерживать действие фермента больший период времени, чем 5-15 минутное воздействие, используемое авторами работы [35]. Этот вопрос требует детального рассмотрения и, возможно, экспериментальной проверки. И нас не должно «убаюкивать» то обстоятельство, что при концентрации 0,75% препарат «Коллагеназа краба», добавляемый в косметическое средство, благотворно влияет «на морфологическую структуру кожи». Детальное обоснование концентрации потребовало бы от экспериментаторов постановку специальных экспериментов для выявления отдаленных последствий.

Следует однако заметить, что при обсуждении этого вопроса мы сознательно выпустили из рассмотрения проблему стабильности коллагеназы и ее совместимость с технологией производства косметических средств. По данным Тихоокеанского института биоорганической химии, фермент должен храниться при температуре — 20-0°C. Срок хранения при этом составляет 3 года. К сожалению, мы не имеем информации об условиях приготовления опытных образцов кремовых композиций, используемых НПО «Косметология» в эксперименте, также как и о том, проверялась ли конечная активность фермента в опытных образцах в процессе его проведения, и в каких условиях хранились эти образцы. Однако на основании собственных исследований [36] мы можем утверждать, что коллагенолитическая активность фермента сохраняется при выдерживании косметического препарата, содержащего 0,05% специально очищенной коллагеназы, выделенной из печени дальневосточных крабов, облепиховое или пихтовое масло, экстракт прополиса и гель полиэтиленоксида (в качестве основы) при +7°C в течение шести месяцев. Наряду с этим, при +37°C активность препарата снижается практически до нулевых значений в течение нескольких суток. Таким образом, это тот самый случай, когда хранение косметического средства требует пониженных температур. 9.3. Пути старения кожи, связанные с модификацией других биополимеровВ структуре и функциях кожи существенную роль играют мукополисахариды (гликозаминогликаны), к которым следует отнести гиалуроновую кислоту. Она обнаруживается в зернистом и более низких слоях эпидермиса, а также в сосочковом слое дермы. Молекулярная масса гиалуроновой кислоты может превышать 100 млн.Dа. Повторяющимся фрагментом этого биополимера является соединение глюкуроновой кислоты и аминосахара, у которого один из атомов водорода аминогруппы замещен на ацильный фрагмент (остаток уксусной кислоты). Замечательным физическим свойством гиалуроновой кислоты является ее способность образовывать стабильный гель с молекулами воды, обладающий высокой вязкостью. Это обстоятельство определяет функции гиалуроновой кислоты, связанные с поддержанием влажности эпидермиса и внутренних структур кожи, а также ее роль в качестве цементирующего вещества, связывающего клетки, коллагеновые пучки и фибриллы между собой.

Как и любой биополимер, гиалуроновая кислота находится в определенных взаимоотношениях с соответствующим ферментом — гиалуронидазой. Совершенно очевидно, что эта пара субстрат (гиалуроновая кислота) — фермент (гиалуронидаза), по аналогии с коллагеном и коллагеназой, участвует в динамическом равновесном процессе, основная роль которого заключается в предотвращении накопления внутри и межмолекулярных сшивок в молекуле гиалуроновой кислоты. Скорости реакции синтеза и деструкции гиалуроновой кислоты, по-видимому, зависящие от возраста организма и других параметров, характеризуются периодами полураспада от 1,9 до 7,7 суток, что примерно соответствует времени жизни молекулы гиалуроновой кислоты от 4 до 16 суток.

Гиалуронидаза кожи преимущественно взаимодействует с гиалуроновой кислотой, имеющей высокую молекулярную массу, а последующая деградация фрагментов гиалуроновой кислоты завершается другими ферментами. Деполимеризация гиалуроновой кислоты ведет к увеличению проницаемости кожи и, наоборот, высокая степень полимеризации, достигаемая, в том числе, и за счет возможных дополнительных сшивок, например, под влиянием продуктов ПОЛ, приводит к снижению проницаемости кожи. Это обстоятельство представляется очень важным, хотя бы потому, что все метаболиты плазмы крови на пути к базальным клеткам вынуждены преодолевать гелевую систему гиалуроновой кислоты и скорость их поступления к клеткам будет зависеть от состояния ее молекулы. Аналогичным образом продукты клеточного метаболизма удаляются в лимфатическую и венозную системы.

Таким образом, регулировка вязкости геля, образуемого полисахаридами с водой, является весьма существенным процессом.

Как уже отмечалось ранее (см. п.4.6), наличие барьера проницаемости кожи делает бессмысленными попытки введения гиалуроновой кислоты с высокими молекулярными массами в косметические препараты с целью влияния на рассматриваемое динамическое равновесие, поддерживающее вязкость геля на определенном уровне. Единственно достижимым результатом введения индивидуальной гиалуроновой кислоты в косметические средства является увлажнение поверхности кожи. При этом, естественно, нельзя исключать воздействия на внутренние структуры кожи биологически активных низкомолекулярных фрагментов, которые могут быть связаны (включены в гель) с гиалуроновой кислотой. Что же касается низкомолекулярных фрагментов гиалуроновой кислоты, способных преодолевать трансэпидермальный барьер, то, по аналогии с системой коллаген-коллагеназа, можно предположить их негативное влияние за счет отвлечения гиалуронидазы от основной реакции (конкурентное торможение). Во всяком случае, при введении низкомолекулярных субстратов гиалуроновой кислоты, мы можем ожидать увеличения вязкости геля, образованного гиалуроновой кислотой, снижения скорости доставки питательных веществ к базальному слою клеток эпидермиса и повышения концентрации продуктов клеточного метаболизма в зоне расположения этих клеток. В соответствии с основными постулатами теории мягких косметологических воздействий реализация такого рода событий будет нарушать динамическое равновесие формирования эпидермиса, ускоряя процессы, ведущие к старению кожи.

Естественным образом, по аналогии с коллагеназой, можно рассматривать варианты создания косметических композиций, содержащих гиалуронидазу (см., например, [37]). При этом возникают фактически те же самые вопросы, на которые мы пытались ответить в предыдущем обсуждении коллагенового пути старения кожи:

— величина молекулярной массы молекулы гиалуронидазы;

— величина оптимальной концентрации фермента;

— стабильность фермента в процессе приготовления косметического препарата и его хранения.

Все эти вопросы также требуют детального обсуждения.

Собственно говоря, коллагеназа и гиалуронидаза являются важнейшими ферментами, требующими особого внимания косметологов. Это вытекает хотя бы из того, что оба фермента и их субстратные пары (коллаген и гиалуроновая кислота) локализованы в межклеточном пространстве кожи, и влияние компонентов косметических средств на динамические равновесные процессы синтеза и деструкции биополимеров может носить характер прямого взаимодействия. Несколько иначе обстоит дело, например, с такими парами как нуклеиновые кислоты и нуклеазы. Основные события, связанные с синтезом и деструкцией нуклеаз разворачиваются во внутриклеточном пространстве, отделенном от межклеточного бислойной липидной мембраной. Поэтому, только в случае проникновения ингредиентов косметического средства во внутриклеточное пространство возможно их прямое влияние на динамическое равновесие между брутто-скоростями синтеза и деструкции нуклеиновых кислот, существование которого из общих соображений, несмотря на всю сложность рассматриваемых процессов, не должно вызывать сомнений. В противном случае реализовались бы варианты, связанные либо с накоплением, либо с дефицитом субстрата.

На этом этапе мы можем ограничиться приведенными выше весьма общими соображениями в надежде на более полновесное и плодотворное обсуждение функционирования ферментативных систем кожи в дальнейшем с целью реализации основной задачи косметологии — поддержание хорошего состояния кожи максимально длительный период времени. Предлагаем вначале все-таки разобраться с допустимыми концентрациями ферментов. И, конечно, основным критерием качества косметических средств должна быть оценка влияния их ингредиентов на процесс формирования эпидермиса (в зависимости от возраста потребителя), являющийся ключевым вопросом теории мягких косметологических воздействий (см. гл.2). ПРИЛОЖЕНИЕ 14.  Микро- и ультрв — микроэлементы.  Изучение влияния на клеточные культуры [4]В данном исследовании (с участием сотрудников ГНЦ ВБ «Вектор») предпринята попытка изучения влияния микроэлементов (Cu2+, Zn2+, Fe2+) и некоторых двухвалентных ультра — микроэлементов (Co2+, Ni2+) на ростовые характеристики клеточных культур.Учитывая то обстоятельство, что перечисленные выше микро — и ультра — микроэлементы являются жизненно необходимыми для функционирования клеточных систем, участвуя в составах многих ферментов и биологически активных белков, можно было полагать, что для каждого элемента существует некая минимально допустимая концентрация, ниже которой клетки начинают ощущать его недостаток и снижать ростовые характеристики. На первом этапе исследований можно принять, что минимально допустимые концентрации элементов, соответствуют их содержанию в питательных средах, используемых в клеточной биотехнологии. А, так как основным источником микро — и ультра — микроэлементов в большинстве питательных сред является сыворотка крови животных, добавляемая в количестве от 5% до 20%, то естественно предположить, что минимально допустимые концентрации микро — и ультра — микроэлементов составляют примерно 1/20 – 1/5 часть от их содержания в сыворотке крови животных.Таблица 1. Содержание микро — и некоторых ультра — микроэлементов в сыворотке крови человека

Элементы Содержание, мг/л
Медь 1,05 – 1,14
Цинк 1,2
Железо 1.0 – 1.6
Кобальт 0,012
Никель 0,022
Марганец 0,013
Хром 0,047

С другой стороны, имеются основания полагать (см., например, [12]), что избыточные количества ионов переходных металлов, которыми и являются микро — и ультра — микроэлементы, могут вызывать нарушение целостности клеточных мембран, интенсифицировать процесс перекисного окисления липидов и проявлять цитотоксическое действие. Эти соображения в полном соответствии с выводами, сделанными в работе [13], подтверждают необходимость определения максимально допустимых концентраций микро — и ультра — микроэлементов для расчета питательной ценности косметических препаратов. В указанной работе использовали следующие соли металлов: никель сернокислый (4), железо(II) сернокислое 7-водное (4), медь сернокислая 5-водная (чда), цинк сернокислый 7-водный (осч), кобальт хлористый 6-водный (чда). Необходимую концентрацию элемента в сыворотке крови или в питательной среде создавали добавлением рассчитанного объема раствора его соли. Добавление проводили медленно, по каплям, при перемешивании. Растворы солей перед введением в питательную среду или сыворотку подвергали стерилизующей фильтрации через мембранные фильтры с диаметром пор 0,22 мкм. Для приготовления растворов использовали деионизированную воду с удельным сопротивлением 12-15 Мом/см.Перевиваемые клеточные культуры ВНК-21 (с.13) – клетки почек сирийского хомячка и клетки легких эмбриона человека (ЛЭЧ) получали из музея клеточных культур ГНЦ ВБ «Вектор». Клетки культивировали на питательных средах ПС-1 (для ВНК-21) и ПС-3 (для клеток ЛЭЧ) с добавлением 10% сыворотки крови крупного рогатого скота. Клеточные культуры выращивали в культуральных флаконах на 50 мл с посевной концентрацией для клеток ВНК-21 1,0 * 105 кл./мл и для клеток ЛЭЧ 1,5 * 105 кл./мл. Счет клеток производили в камере Горяева.Таким образом, получали линейную зависимость пробит-величины от концентрации металлов Z=A+Bx. Неизвестные коэффициенты А и В определились с помощью взвешенного метода наименьших квадратов, причем вес точки Zi брался обратно пропорциональным величине Рi2/2 = (1/Yi2 / Y02 ).Для решения поставленной задачи нам представлялось целесообразным использовать клеточные культуры, полученные от различных видов животных и из различных тканей. Таким условиям удовлетворяли фибробластоподобные клетки почек сирийского хомячка (ВНК-21) и эпителиоподобные клетки легких эмбриона человека (ЛЭЧ), которые, как было показано ранее [13], в значительной степени отличаются друг от друга и по отклику на неблагоприятные воздействия в процессе культивирования.Получены экспериментальные данные, отражающие изменения пролиферативной активности клеток ВНК-21 (с.13) и ЛЭЧ в зависимости от содержания цинка в питательной среде. Они свидетельствуют о наличии отчетливой тенденции снижения склонности клеток к делению по мере увеличения концентрации элемента. Однако интенсивность влияния цинка на отмеченное снижение ростовой активности различна для используемых клеточных культур.Одним из возможных вариантов сопоставления интенсивности влияния элемента на снижение пролиферативной активности клеток является сравнение величины ее концентрации, ведущей к снижению прироста клеток на 50%, в сопоставимых условиях культивирования.Для оценки этой величины (ТС50) пользуются методом, заключающимся в аппроксимации экспериментального набора точек на участке концентраций с интенсивным снижением ростовой активности клеток в некоторую линейную функцию.Во многих случаях, описанных в литературе, авторы определяют величину ТС50 графически, предварительно проводя линию, огибающую экспериментальный набор точек на графиках. Однако такой прием не позволяет статистически определять достоверность оценки этой величины, что, соответственно, отражается на достоверности сопоставления значений ТС50.Для статистической оценки величины ТС50 мы использовали пробит-преобразования полученных экспериментальных данных [14], которые позволяют оценить влияние добавок микроэлементов на клеточную систему, как при больших, так и при малых концентрациях. Наряду с предложенным алгоритмом, основанном на пробит-преобразовании, была предпринята попытка использования логит-преобразования, однако в этом случае точность аппроксимации экспериментальных данных оказалась неудовлетворительной.Непрерывные кривые, полученные посредством пробит-преобразования экспериментальных данных, описывают всю совокупность точек. Коэффициенты пробит-преобразования Аи В характеризуют интенсивность влияния элемента на пролиферативную активность клеток и продолжительность начального (горизонтального) участка кривой.Концентрация элемента, ведущая к снижению прироста клеток на 50%, находится как отношение коэффициентов А и В (ТС50 = -А / В). Полученные результаты свидетельствуют о принципиальной возможности использования пробит- преобразования для описания большинства из рассмотренных экспериментальных данных. Однако доверительные интервалы величины ТС50, характеризующие влияние меди на клетки ВНК-21 и железа на обе клеточные культуры, оказались аномально большими. Следует также подчеркнуть, что именно в этих случаях кривые, построенные с помощью пробит-преобразования экспериментальных данных, имеют явные отклонения от стандартной формы. Так, например, при увеличении концентрации ионов железа в питательной среде наблюдается монотонное изменение пролиферативной активности клеток ВНК-21(с.13). Отсутствие симметрии расположения экспериментальных точек на графиках, отражающих влияние добавок ионов меди на пролиферативную активность клеток ЛЭЧ и железа на обе клеточные культуры, позволяет сделать предположение об ином механизме действия данных элементов на клеточные культуры. Была предпринята попытка раздельного расчета кривых для каждой группы точек в рамках пробит-преобразования. Полученные таким образом суммарные кривые практически не меняют величины ТС50. В некоторых случаях наблюдалось сокращение величин доверительных интервалов по сравнению с представленными в таблице величинами, которые были рассчитаны для всей совокупности точек.Таким образом, значения величин ТС50, рассчитанные с помощью пробит — преобразования экспериментальных данных, очевидно, могут служить основой для сопоставления цитотоксической активности ионов металлов. Для изученных клеточных систем установлены следующие ряды цитотоксической активности ионов металлов:(ВНК-21) медь ³ цинк ³ кобальт > никель > железо(ЛЭЧ) цинк > кобальт » медь > никель > железоОбращает на себя внимание полная тождественность этих рядов для менее токсичных ионов (никель и железо), а также неопределенность и отсутствие подобия для более токсичных ионов (медь, цинк и кобальт). Для количественного сопоставления величин, характеризующих цитотоксическую активность элементов, была предпринята попытка обнаружения корреляционной связи между ТС50ЛЭЧ и ТС50ВНК-21  в рамках линейного уравнения ТС50ЛЭЧ = В * ТС50ВНК-21 (1).Результаты исследования свидетельствуют о наличии корреляционной зависимости между ТС50ЛЭЧ и ТС50ВНК-21 в рамках уравнения (1), за исключением значений ТС50ЛЭЧ и ТС50ВНК-21, характеризующих цитотоксическую активность ионов железа.Средняя величина коэффициента В = 1,42, характеризующая угол наклона прямой, количественно отражает более высокую чувствительность клеток ВНК-21 (с.13) к ионам металлов по сравнению с клетками ЛЭЧ. По-видимому, указанную величину можно рассматривать в качестве критерия относительной чувствительности клеточных культур к ионам металлов, механизм действия которых на клеточные системы аналогичен.Однако не следует забывать, что исходные (посевные) концентрации клеток ВНК-21 и ЛЭЧ различались в 1,5 раза (100 тыс. клеток/мл и 150 тыс. клеток/мл соответственно). Это обстоятельство может в определенной степени отразиться на величине коэффициента В  уравнении (1).Для окончательного решения вопроса о возможности использования коэффициента в качестве критерия чувствительности клеточных культур к ионам металлов необходимо провести дополнительные исследования с одинаковыми посадочными концентрациями клеток.Тем не менее, полученные нами экспериментальные данные в сочетании со статистической обработкой результатов и литературными данными позволяют провести оценку минимально и максимально допустимых концентраций ионов (табл. 2).Таблица 2. Оценочные значения минимально и максимально допустимых концентраций некоторых двухвалентных ионов металлов в косметических препаратах и питательных средах

Микро —  и Допустимые концентрации (мг/л)
Ультра — микроэлементы Минимальные Максимальные
Медь 0,055 20,2
Цинк 0,06 10,8
Железо 0,055 68,4
Кобальт 0,0006 17,5
Никель 0,0011 42,8

Если рассматривать отличия клеток ВНК-21 и ЛЭЧ, то следует подчеркнуть, что клетки легких эмбриона человека оказываются менее чувствительными к перекисному окислению липидов, чем клетки почек сирийского хомячка (ВНК-21) [13]. Это можно понять, учитывая то обстоятельство, что именно клетки легкого первыми контактируют с кислородом вдыхаемого воздуха. Очевидно, такая клеточная система должна иметь специфические усиленные механизмы защиты против перекисного окисления липидов и продуктов, образующихся в ходе этого процесса.Необходимо подчеркнуть, что клетки эпидермиса, также как и клетки легкого, находятся в постоянном контакте с кислородом воздуха. Поэтому с определенной степенью достоверности можно было  полагать, что максимальные концентрации микро —  и ультра — микроэлементов находятся вблизи значений ТС50, рассчитанных именно для клеток ЛЭЧ. При этом мы учитываем, что в эксперименте использовалась сыворотка крови крупного рогатого скота в количестве 10%, содержащая определенное количество ионов металлов (см. табл. 3).Все вышеизложенное позволяет предположить, что допустимые концентрации изученных микро — и ультра — микроэлементов лежат внутри интервалов между минимальными и максимальными концентрациями, представленными в табл. 3.ПРИЛОЖЕНИЕ 15. Деликатный выход из профилактических и лечебных процедур — «эффект ускорения» клеточного деления [6]Есть ещё одно обстоятельство, связанное с выходом из профилактической, а тем более из лечебной процедуры. В сою бытность работы в ГНЦ ВБ «Вектор», наблюдая за поведением клеточных культур, мы обратили внимание на следующее обстоятельство. Если выдерживать клетки на обеднённой по какому либо параметру (например, с недостатком глюкозы) питательной среде, то при их пересеве на питательную среду обычного состава, клетки существенным образом (в 3-5 раз) по сравнению с установленной ранее нормой увеличивали скорость деления. Этот параметр постепенно приближался к нормальному значению при проведении последующих пересевов.  Такой «эффект ускорения» клеточного деления в принципе можно было изучать применительно к задачам клеточной биотехнологии, ну, например, для снижения количества стадий (пассажей) — пересевов клеток для их производства в нужном количестве. Проверка воспроизведения «эффекта ускорения» и изучения его влияния на увеличение  наработки нужного количества целевой продукции, может быть интересной для некоторых биотехнологов. А нам с вами нужно подумать над процедурой выхода из «лечебного торможения» роста клеток. Действительно, избытком витаминов мы создаём условия, неблагоприятные для клеточного деления, а если затем организм резко  привести в норму? Не будет ли проявляться пресловутый «эффект ускорения» клеточного роста? К сожалению, мы ещё далеко не всё знаем о человеческом организме, а вот о поведении клеточных систем в условиях культивирования знаем гораздо больше, но, конечно, ещё не всё. Поэтому, на всякий случай, рекомендуем постепенный переход от «лечебного торможения» к норме. Например, можно плавно заменять трёхразовый приём витаминов на двух разовый, а затем отменить и одноразовый. При этом, при каждой отмене заменять удаляемую порцию витаминов на трёхкратную суточную дозировку — одно драже витамина С и одна капсула витамина Е. Таким образом, к окончанию курса лечения мы будем вместе с пищей принимать три обычные нормы витаминов. Аналогичным образом, отменяя последовательно два лишних приёма, оставляем только один и переходим к профилактическим дозам (одно драже витамина С в сутки и одна капсула витамина Е в 3-4 дня), ниже рекомендуемых фармакологами дозировки (см. выше).Подозреваю, что аналогичная плавная отмена необходима при назначении врачом лечебных доз различных лекарств, проявляющих цитотоксическое действие. Но кто с этим будет возиться? Тем более, с недостаточно доказанным «эффектом ускорения» клеточного деления, можно сказать, почти «придуманного» автором на основе отдельных наблюдений за поведением клеточных культур.С подобным эффектом, о котором знают некоторые врачи, и догадываются священнослужители практически всех религий, назначая регулярные посты, а также многие простые люди, мы с вами ещё встретимся, рассматривая второй способ профилактики онкологических заболеваний.И, тем не менее, не кажется ли вам, уважаемые читатели, что регистрируемое повсеместно увеличение онкологических заболеваний наряду с неблагоприятной экологической обстановкой в стране зависит в значительной мере и от «эффекта ускорения» клеточного деления при приёме и резкой отмене лечебных цитотоксических препаратов (например, антибиотиков)?  Как вы думаете? Пишите.Автор в возрасте 74 лет с целью обычной профилактики ежедневно принимает рассчитанные дозы витаминов один раз в три месяца в виде недельного курса усиленной  лечебной дозировки (три рассчитанных выше дозы витаминов С и Е в сутки), а затем выходит на профилактические дозы. В течение года отрицательных последствий не наблюдалось. Понятно, что предлагаемая методика лечения новообразований на данный момент носит ориентировочный характер, поэтому требует экспериментального контроля и подтверждения. Так, например, попытка увеличить дозу витаминов более чем в 10 раз по сравнению с рассчитанными лечебными дозами с изменением способа их введения в организм (бальнеологический вариант) и добавками других ингредиентов привела к явному отклонению организма испытателя от нормы (существенное снижение артериального давления, напоминающее развитие инфаркта). Самостоятельно и бесконтрольно рисковать не следует ни в коем случае! А тут ещё рассмотренный выше «эффект ускорения» клеточного деления от резкой отмены лечебной дозировки! Поэтому рассмотрим ещё одно весьма важное обстоятельство. Мы говорим сейчас об очень аккуратном введении профилактических доз  витаминов в организм человека в быту, минуя используемые в медицине приёмы прямого их введения (внутривенно или внутримышечно). При этом, не нагружая желудочно-кишечный тракт избыточным количеством витаминов в течение достаточно длительного времени — бальнеологический вариант, в процессе реализации которого дополнительно осуществляется детоксикация организма человека — удаление чуждых нашему организму веществ (ксенобиотиков).ПРИЛОЖЕНИЕ 16.  Содержание гормонов и гормоноподобных веществ в продуктах животного происхождения [4]Несмотря на кажущееся обилие экспериментальных данных по определению содержания гормонов и гормоноподобных веществ в различных системах, следует признать, что данный раздел работы может служить только некоторой основой (отправной точкой) для проведения будущих исследований. Это связано, в первую очередь, с тем, что наиболее интересными источниками гормонсодержащего сырья для косметической промышленности являются ткани и биологические жидкости животных, далеко отстоящих от человека по эволюционной лестнице. Основное их преимущество заключается в отсутствии вероятности передачи человеку перекрестных (например, вирусных) болезней.

Следует также иметь в виду, что содержание гормонов в организме животного не является величиной постоянной и зависит от очень многих обстоятельств. Кроме этого нам пришлось столкнуться с тем, что точность измерений и, в этой связи, их интерпретация оказываются в зависимости от использованной методики измерений. 8.1.1. Содержание гормонов в гонадах животныхМужские гонады (сперма) животных отличаются относительной стабильностью содержания гормонов вне зависимости от вида животного, так как концентрация каждого гормона в большинстве случаев имеет один и тот же порядок величин у разных видов животных. Видовые отличия наблюдаются только для простагландинов (см.табл.8.2).

Общее содержание стероидных гормонов в сперме быка составляет [8] в среднем:

— для андрогенов — 1,15 нг/мл;

— для эстрогенов — 0,89 нг/мл.

Среднее содержание тестостерона в сперме человека составляет 0,72 нг/мл [9] [10] [11]и колеблется в пределах 0,72±0,52 нг/мл [10]. Однако некоторые авторы приводят более низкие цифры: 0,19 нг/мл [13] и 0,097 нг/мл с разбросом от 0,085 до 0,111 нг/мл [13].

Средний уровень дегидроэпиандростерона в сперме человека составляет 4,2 нг/мл [14]. В работе [15] приводится разброс значений от 2,7 до 9,3 нг/мл, характерный для содержания этого гормона в сперме человека, барана, быка, кролика и собаки. Тем не менее, некоторые авторы приводят несколько более низкие цифры для спермы человека — 1,46 нг/мл с разбросом значений от 1,05 до 2,02 нг/мл [16].

Среднее содержание в сперме человека андростендиона по одним данным [12] составляет 0,47 нг/мл, а по другим [16] — 0,24 нг/мл при разбросе от 0,18 до 0,32 нг/мл.

Для дигидротестостерона также наблюдаются различные концентрации в сперме человека — по одним данным 0,95 нг/мл [12], по другим — 0,31 нг/мл при разбросе от 0,23 до 0,41 [16].

Аналогично для прогестерона: по одним данным — 0,26 нг/мл [12], по другим — 0,48 нг/мл при разбросе от 0,41 до 0,56 нг/мл [16].

Среднее содержание оксипрогестерона и 17β-эстрадиола в сперме человека равняется 0,32 нг/мл и 0,036 нг/мл, соответственно [12].

Следует заметить, что если бы не данные по прогестерону, то можно было бы полагать, что между значениями содержания гормонов в сперме, приводимых в работах [12] и [16], существует систематическая ошибка. Так для тестостерона, андростендиона и дигидротестостерона значения, приводимые в работе [12], примерно в 2 — 3 раза являются более высокими по сравнению с данными, приводимыми в работе [16]. Однако для прогестерона наблюдается обратный вариант. Именно поэтому мы не можем объяснить наблюдаемые различия в содержании гормонов в сперме животных наличием определенной систематической ошибки.

Имеются сведения о том, что в сперме человека средний уровень тестостерона глюкоронида составляет 15,5 нг/мл, тестостерон сульфата — 0,55 нг/мл, дегидроэпиандростерон сульфата — 1,6 нг/мл, прегненолон сульфата — 11,9 нг/мл, эстрон сульфата — 0,76 нг/мл и эстрадиол сульфата — 0,43 нг/мл [12]. В целом, приведенные данные для так называемых коньюгированных гормонов соответствуют содержанию в сперме их неконьюгированных аналогов (тестостерон — 0,72 нг/мл, а тестостерон глюкуронид — 15,5 нг/мл и тестостерон сульфат — 0,55 нг/мл и т.д.). Единственным аномальным среди указанных значений является содержание в сперме человека дегидроэпиандростерон сульфата — 381,7 нг/мл, в то время как содержание его неконьюгированного аналога — дегидроэпиандростерона — составляет всего 4,2 нг/мл. Не очень ясно, как относиться к этому факту. Совершенно очевидно, что необходима тщательная проверка указанных величин.

Кроме этого, на наш взгляд, представляется целесообразным оперировать суммарными концентрациями коньюгированных гормонов и их неконьюгированных аналогов, а также учитывать метаболические пути превращений гормонов в организме.

Содержание гонадотропных гормонов в сперме человека варьирует в пределах от 0,4 до 38 нг/мл. Так, содержание фолликулостимулирующего гормона (эстрона) составляет в среднем по одним данным [11] 0,44 нг/мл, а по другим [17] — 1,1±0,5 нг/мл. Лютеинизирующий гормон обнаруживается в сперме человека в количестве 5,5±2,3 нг/мл, хориональный гонадотропин — 5,3±2,5 нг/мл [17], пролактин по данным разных авторов — 18,0 нг/мл [17], 20,6 нг/мл [18], с колебаниями от 8,5 до 38 нг/мл [12]. В работе [19] сообщается о сходных уровнях содержания пролактина в сперме человека и быка.

В сперме различных животных содержатся простагландины Е1, Е2, F1α и F2α. Кроме того, у приматов обнаруживают еще и 19-оксипростагландины Е1, Е2, F1α и F2α, которые отсутствуют у домашних и лабораторных животных и у крупного рогатого скота [20]. Суммарное содержание простагландинов Е в сперме человека составляет в среднем по данным разных авторов около 70 мкг/мл (67.1 [21], 68.0 [22], 69.4 [23], 72.9 [24], 73.0 [25]; в работе [20] приведено более высокое значение — 85.0 мкг/мл. Диапазон разброса значений по данным разных авторов отличается: от 33 — 145 мкг/мл [26] до 2 — 272 мкг/мл [25]. Более низкие значения обнаружены в сперме быка (0.6 мкг/мл [27] и барана (7.46 мкг/мл при разбросе 1.1 — 23.3 мкг/мл [28]).

Сведения о раздельном содержании простагландинов группы Е приведены в литературе для спермы барана. По данным одних авторов, соотношение Е1:Е2:Е3 составляет 8:4:1 [28], по другим данным, среднее содержание простагландинов Е1 и Е2 составляет 28,0 и 2,0 мкг/мл, соответственно.

Общее количество простагландинов F в сперме человека составляет в среднем, по данным разных авторов, 2.1 мкг/мл [25], 3.2 мкг/мл [21], 5.0 мкг/мл [20], 6.0 мкг/мл при разбросе 2.7 — 13.4 мкг/мл [26], в сперме кролика — 5.9 мкг/мл [29]. В сперме быка обнаружены более низкие значения — 0.2 мкг/мл [27].

Раздельное содержание простагландинов группы F, по данным литературы, следующее: среднее содержание в сперме барана простагландина F1α составляет 5.0 мкг/мл, простагландина F2α — 2.3 мкг/мл [30]. Содержание последнего в сперме человека — 3.65 мкг/мл [24], в сперме быка — 0.17 нг/мл [31]. Метаболиты простагландинов группы F содержатся в сперме быка в пределах 9.5 — 46.0 нг/мл [32].

В сперме содержится инсулин. Его концентрация у человека составляет 45.8±15.1 мкЕД/мл [33].

Исследование тиреотропинрилизинг гормона показало неопределимый уровень этого гормона в сперме человека [34].

Активность ангиотензинпревращающего фермента в сперме человека составляет 335 ед./г белка [35]. 8.1.2. Сопоставление содержания гормонов и гормоноподобных веществ в сперме животных и крови человекаСписок регенерирующих добавок к косметическим препаратам постоянно пополняется. Поэтому, на наш взгляд, пора ответить на ключевые вопросы, возникающие при рассмотрении косметических композиций нового поколения, обладающих не только питательным, витаминизирующим и антиоксидантным, но и, соответственно, регенерирующим действием.

Так, например, необходимо понять — не окажется ли вредным воздействие гормонов и гормоноподобных веществ на организм? Какие дозы кремовых композиций потребуются для существенного изменения гормонального пула в крови человека?

Среди перечисленных выше регенерирующих добавок к косметическим препаратам наиболее изученной является сперма животных, в составе которой содержатся разнообразные гормоны и гормоноподобные вещества.

Проведем детальное сопоставление содержания такого рода веществ в сперме животных и в крови человека, а также рассчитаем дозу косметического препарата (количество непрерывных обработок), необходимую для увеличения концентрации биологически активного вещества в крови человека на 50%. При этом были приняты во внимание следующие соображения:

— варьирование значений концентраций веществ для одной группы испытуемых (мужчин или женщин) часто превышало принятое нами существенное отклонение (50%) в 5 раз и более;

— количество крови в организме человека принято равным 6000 мл (первая ступень разбавления препарата);

— в качестве максимальной принимаем концентрацию спермы в кремах, равную 5%, в то время как количество спермы в косметических композициях усиленного действия (для возраста 40-45 лет и старше) может составлять 3%, в обычных профилактических кремах (для возраста 30-35 лет и старше) — менее 1%;

— максимальное количество наносимого за один прием крема не превышает величину 5 г (обычно 0,5 — 1 г);

— допускаем, что биологически активные вещества, содержащиеся в косметической композиции, преодолевают трансдермальный барьер и полностью попадают в кровь (хотя это абсолютно не очевидно).

В представленной таблице 8.2 приведены литературные данные по максимальному содержанию гормонов и гормоноподобных веществ в сперме животных (усредненные данные, так как состав гормонов в сперме различных видов животных сходен, а концентрация каждого гормона имеет один и тот же порядок величин [8]) и в крови человека [9]. Приводятся также результаты расчетов количества последовательных обработок кожи (N50), необходимых для увеличения содержания гормонов в крови человека на 50% по отношению к среднему значению, по формулам:

где ΔСK — увеличение концентрации гормонов в крови после одной обработки кожи кремом в количестве 5 мл, содержащим 5% спермы животных (доля — 0,05). Таблица 8.2 Сопоставление содержания гормонов и гормоноподобных веществ в сперме животных, в крови человека и оценка возможного влияния на кровь кремовых композиций, содержащих сперму животных
*) Средние значения.

**) При расчете N50 использовали величину, уменьшенную в два раза.

Представленные в таблице данные свидетельствуют о том, что только концентрация свободного тестостерона в сыворотке крови женщин требует ограничения использования косметических препаратов, содержащих 5% спермы животных, до 196 непрерывных нанесений. При этом следует учитывать то обстоятельство, что содержание общего тестостерона в сыворотке крови женщин более чем в 200 раз выше содержания свободного гормона. Это дает основание полагать, что концентрация свободного тестостерона вряд ли может служить лимитирующим фактором для определения продолжительности непрерывного применения косметических композиций, приготовленных с добавлением спермы животных.

Другое значение последовательных непрерывных нанесений крема, содержащего 5% спермы животных, которое могло бы служить ориентиром для ограничений, относится к общему содержанию эстрогенов в сыворотке крови женщин в период менопаузы (оценочно N50≈270). Эта величина может повысить уровень эстрогенов на 50%. Однако, если учитывать содержание гормонов в детородный период и, тем более, в состоянии беременности, то для достижения 50%-ных изменений требуется увеличить этот расчетный параметр в десятки и даже в тысячи раз. Более того, в соответствии с практикой гормональной заместительной терапии (см., например, [14]), можно полагать, что достигаемое за счет использования крема в период менопаузы увеличение концентрации эстрогенов в крови будет иметь положительный эффект не только на кожу, но и на внутренние органы женщин.

Во всех остальных случаях проведённое нами сопоставление содержания ряда гормонов и гормоноподобных веществ в сперме животных и в сыворотке крови человека свидетельствует о возможности использования такого рода препаратов в течение года и более, включая и периоды беременности женщин. У нас нет сомнений и в том, что регенерирующие косметические композиции, включающие сперму животных, будут оказывать благоприятное воздействие на один из самых важных процессов, отражающийся на состоянии человеческой кожи — равновесный процесс формирования эпидермиса (см. выше).

Естественно, следует помнить о том, что гормональный пул сыворотки крови человека и в сперме животных не ограничивается представленными в таблице соединениями. Однако, к сожалению, мы не обнаружили в литературе данных по содержанию других гормонов, присутствующих и в сыворотке крови человека, и в сперме животных для попарного сопоставления.

Как уже отмечалось выше, кроме женских и мужских гонад (сперма, молоки и икра) животных в качестве биологически активной составляющей косметических препаратов используются сыворотка крови и гемолимфа насекомых, гомогенаты развивающихся эмбрионов и «кондиционированные» питательные среды. Если принимать во внимание способность подобных добавок к регенерации клеточных систем кожи, то, с определенной долей вероятности, к ним следует отнести и экстракты различных органов животных. Кроме этого у нас есть основания считать, что любой продукт животного происхождения в той или иной степени содержит вещества, стимулирующие клеточное деление (регенерацию кожи).

Учитывая предложенную классификацию (см. табл.8.1), рассмотрим имеющиеся в литературе данные об использовании других продуктов животного происхождения в косметологии. 8.1.3. Гонады гидробионтов в качестве биологически активных добавок к косметическим препаратамКак уже отмечалось ранее, незаменимым средством для увеличения скорости деления базальных клеток, необходимого для восстановления (регенерации) равновесного процесса формирования эпидермиса, являются биологически активные добавки животного происхождения, содержащие гормоны и гормоноподобные вещества (факторы роста). К таким добавкам относятся гонады морских животных (гидробионтов), например, гонады морских беспозвоночных и рыб.

Для оценки целесообразности применения гонад гидробионтов в качестве биологически активных добавок к регенерирующим косметическим композициям был проведен спектрофотометрический анализ содержания гормонов в гонадах мидий (Mytilus trossullus), серых морских ежей (Strongylocentrotus intermedius), чёрных морских ежей (Strongylocentrotus nudus), морского гребешка (Pationopecten yessoenis), букцинум баяна (Buccinum bayani), дальневосточной нептунеи (Neptunea conctricta), икре кальмара Бартрама, краба камчатского (Paralithodes camstchatica), минтая и лосося, молоках минтая и лосося (см.табл.8.3)*). Таблица 8.3 Сопоставление содержания эстрогенов и андрогенов в гонадах некоторых гдиробионтов с их содержанием в крови человека

Для того, чтобы оценить возможное влияние гормонов, вводимых с гонадами гидробионтов в организм человека предлагается использовать расчетную величину N50 (см. формулы 1 и 2 и п.8.1), соответствующую количеству непрерывных последовательных обработок кожи косметическим средством, содержащим гормоны, необходимых для увеличения содержания соответствующих гормонов в крови человека на 50% по отношению к среднему значению .

При этом были приняты во внимание следующие соображения:

— варьирование значений концентраций гормонов для мужчин и женщин сопоставимо с принятым нами существенным отклонением (50%);

— количество крови в организме принято равным 6000 мл;

— в качестве рабочей принимаем концентрацию гонад в кремовой композиции, равную 1%;

— максимальное количество наносимого крема за один приём не превышает 2 мл;

— допускается, что биологически активные вещества (гормоны), содержащиеся в косметическом препарате, преодолевают трансэпидермальный барьер и полностью попадают в кровь. Причем, ΔСK- величина, характеризующая повышение концентрации гормонов в крови после одной обработки кожи, рассчитывается для концентрации гонад в препарате (Cгон) равной 1% и при количестве наносимого крема — 2 мл.

Результаты расчётов , приведённые в табл. 8.4, характеризуют относительную безопасность кремовых композиций, содержащих гонады гидробионтов в количестве 1%. Так, для того, чтобы на 50% увеличить содержание андрогенов в крови мужчин необходимо непрерывно от 16053 до 381250 раз наносить на кожу кремовые композиции, содержащие гонады гидробионтов. Таблица 8.4 Оценка возможного влияния на содержание гормонов в крови человека кремовых композиций, содержащих гонады гидробионтов В отличие от этого для эстрогенов величины , относящиеся к женщинам, варьируют всего от 24 до 217 и поэтому именно содержание эстрогенов в гонадах гидробионтов может ограничивать их применение в качестве биологически активных добавок к косметическим композициям.

На наш взгляд, определённый интерес представляет сопоставление концентраций эстрогенов и андрогенов в предлагаемом сырьевом материале (гонады гидробионтов) с концентрациями гормонов, которые используются в косметической практике.

Известно несколько случаев прямого введения эстрогенов и андрогенов в составы косметических композиций. Так, в кремовых композициях, предназначенных «для предотвращения вялости кожи», «против морщин» и «для восстановления блеска старой кожи», используется натриевая соль дегидро-эпи-андростеронсульфата в концентрации от 300 до 1000 мкг/г. В соответствии с приведёнными выше рассуждениями, указанные концентрации гормона являются аномально высокими, так как, подставляя их в формулу (1) вместо произведения (Сгон·0.01) и используя полученные значения ΔСK для оценки величины N50 по формуле (2), получаем, что для повышения на 50% содержания андрогенов в крови мужчин требуется от 0,9 до 3 последовательных обработок кожи, в то время как у женщин для этого требуется значительно менее одной обработки (N50=0.01-0.05). В свою очередь, в композиции «для восстановления блеска старой кожи» [38], а также в косметическом составе [39] используется эстрадиол в концентрации от 10 до 50 мкг/г. Аналогичные расчёты свидетельствуют о том, что величина N50 для мужчин составляет от 0,03 до 0,16, а для женщин — от 0,01 до 0,07.

Таким образом, приведённые данные позволяют предположить, что используемые в работах [38] и [39] концентрации эстрогенов и андрогенов превышают допустимый уровень более чем в 100 раз. Следует также подчеркнуть, что используемые в косметических средствах концентрации гормонов превышают более чем в десять тысяч раз их суточные лечебные дозы (в пересчёте на 1 мл лимфы и плазмы крови).

Можно полагать, что именно первоначальное и последующее применение аномально высоких (пиковых) концентраций гормонов послужило основанием для запрета на использование эстрогенов, андрогенов и прогестогенов в качестве биологически активных ингредиентов косметических композиций.

В соответствии с теорией мягких косметологических воздействий с учётом проведённых исследований содержания эстрогенов и андрогенов в гонадах гидробионтов можно рекомендовать использование в качестве новых сырьевых ресурсов для косметологии мужские и женские гонады мидий (например, Mytilus trossulus), серых морских ежей (Strongylocentrotus intermedius), черных морских ежей (Strongylocentrotus nudus), морского гребешка (Pationopecten yessoenis), букцинум баяна (Buccinum bayani), дальневосточной нептунеи (Neptunea conctricta), икру кальмара Бартрама, краба камчатского (Paralithodes camstchatica), минтая и лососевых, молоки минтая и лососевых в количествах до 1-2% для повседневного использования в возрасте старше 30-35 лет и до 8-10% для профессиональных косметических препаратов (применение с частотой один раз в 7-15 дней).

Следует подчеркнуть важное обстоятельство, связанное с опасностью переноса некоторых заболеваний от донора спермы на потребителя косметики через поврежденные кожные покровы. Сперма животных не может быть очищена, например, от вирусных частиц, без существенной потери ее качества. Поэтому производители косметических средств обязаны проводить аттестацию спермы на отсутствие многочисленных вирусов и бактерий или брать в качестве доноров спермы заведомо здоровых животных с учетом возможных инкубационных периодов развития инфекций. Это накладывает также определенные требования на содержание животных-доноров. С учетом вышеизложенного привлекательным выглядит способ снижения вероятности перекрестных заболеваний (животное — человек) за счет использования животных-доноров спермы, далеко отстоящих от человека по эволюционной лестнице. Действительно, серые морские ежи (Strongylocentrotus intermedius), гонады которых (женские и мужские) используются в качестве пищевого продукта, не имеют в среде обитания возбудителей болезней, опасных для человека. Поэтому с высокой долей вероятности можно полагать, что сперма (гонады) морских беспозвоночных является оптимальной добавкой к регенерирующим кремовым композициям.

Естественно, следует помнить о механизме действия регенерирующих косметических препаратов (см. выше), способствующих увеличению скорости деления клеточных систем кожи. Поэтому чрезвычайно важным является обязательное возрастное ограничение их применения. Нецелесообразно, например, использование рассмотренных регенерирующих косметических средств лицами до 30-35 лет для повседневной профилактической обработки кожи. Однако, опытный косметолог может преодолеть это ограничение, ориентируясь на состояние кожи и наблюдая за результатами обработки, используя эти средства в качестве кратковременных масок. На наш взгляд, абсолютно нецелесообразным (или даже вредным) является использование регенерирующих косметических препаратов для лиц моложе 20-25 лет, так как у этого возраста совершенно иные (противоположные) проблемы с кожей (см. гл. 6).

Таким образом, косметология сделала определенный шаг по расширению сырьевой базы, включающий использование биологически активных добавок типа спермы животных к косметическим препаратам. Особенно важным является применение подобных средств после 30-35 лет, когда старение кожи ускоряет свое незаметное (на более ранних этапах) течение

Вместе с тем, на наш взгляд, абсолютно нереальным является бытующее мнение о возможности реализации процесса омоложения. Вряд ли можно повернуть биологические процессы вспять. Философский камень не найден и найден не будет. Единственно реальной и, по-видимому, достижимой задачей косметологии является сохранение состояния кожи человека на достигнутом уровне развития (старения) как можно более длительное время. Этот вывод относится и к рассмотренным в данной работе препаратам, включающим сперму животных. Мы полагаем, что для возраста «после 30-35 лет» справиться с этой задачей, проводя только очистку, используя витаминизирующие добавки, подпитку и повышая антиоксидантную защиту, практически невозможно.

Другим вариантом реализации процесса регенерации кожи является стимуляция деятельности клеток Лангерганса. Эти иммунокомпетентные клеточные образования, которые обычно находятся в состоянии покоя, в определенных условиях под влиянием некоторых веществ активируют свою деятельность, выбрасывая в межклеточное пространство соединения, способные ускорять клеточное деление (простагландины, факторы роста и т.п.)

Мы в дальнейшем еще будем касаться вопросов местных иммунных проявлений. 8.2. Другие биологические жидкостиЭтот «блок» биологически активных добавок, обладающих регенерирующим действием, мы специально отделили от гонад животных. Хотя, несомненно, понимаем явную условность такого деления.

Сыворотка крови животных, так же как сыворотка крови человека (см. табл.8.2), является источником гормонов и гормоноподобных веществ, обладающих способностью стимулировать клеточный рост. В этом смысле, использование сыворотки крови в составах регенерирующих кремовых композиций вполне оправдано.

В отношении молока и молочных продуктов (кроме молока в качестве добавок к косметическим препаратам используются сливки, простокваша, творог, йогурты, молочная сыворотка и молозиво) со всей очевидностью можно утверждать, что в их составах содержатся кортикостероиды (дексаметазон, бетаметазон, флуметазон, триамцинолон, преднизотон, преднизолон, метилпреднизолон, флюдрокортизон, беклометазон) [40], прогестерон [41], паратироидные гормоны [42], эстрадиол-17-бета [43], соматостатин [44]. Что касается молозива, то отмечается способность молока, полученного через 8 часов после рождения теленка, эффективно поддерживать пролиферацию эпителиальных клеток в культуре [45].

Маточное молочко пчел (апилак) служит для питания личинок пчел, которые в течение нескольких дней увеличиваются (по весу) в тысячи раз. Вне всякого сомнения, в молочке пчелиной матки содержится все необходимое для стимуляции клеточного роста. 8.3. Развивающиеся эмбрионы животных, экстракты из эмбрионов и клеточные системыИз клеточной биотехнологии известно, что любая клеточная система, помещенная в питательную среду, содержащую факторы роста, развивается в соответствии с закономерностью, которая описывается в S-образной кривой А (см. рис.8.1)

Кривая А характеризуется тремя фазами роста. Начальная лаг-фаза соответствует состоянию «переживания» — подработки свежей питательной среды. Обычно ее продолжительность составляет около 20-30 часов. Рисунок 8.1 Схема развития клеточной культуры в зависимости от времени

где N — количество клеток в 1 мл питательной среды.

Следующий участок кривой, называемый лог-фазой, характеризуется быстрым делением клеток и приводит к увеличению клеточной массы. Лог-фаза — это фаза логарифмического деления клеток. Последний участок кривой — фаза стационарного состояния. Ее можно рассматривать как состояние, в котором питательная среда исчерпала свои ресурсы (хотя бы по одному из питательных компонентов). Это состояние можно также описать следующим образом — на каждую вновь образовавшуюся клетку приходится одна клетка, прекратившая свое существование.

Оказывается, если отделить питательную среду от клеток в фазе логарифмического роста и поместить в нее новые клетки, то их развитие будет описываться кривой Б, характеризующейся практически полным отсутствием лаг-фазы — клетки сразу после посева входят в логарифмическую фазу роста. Такие питательные среды называются «кондиционированными». Практически они используется при культивировании очень «деликатных» клеточных линий и в процессе создания клеточных клонов. Более того, известно также, что существует обратная зависимость между величиной посадочной концентрации клеток и продолжительностью лаг-фазы. Причем, чем ниже посадочная концентрация клеток, тем выше продолжительность лаг-фазы.

Эти данные легко объясняются тем, что клетки, помещенные в свежую питательную среду, как бы «подрабатывают» ее состав для реализации интенсивного клеточного роста. Когда клеток мало (низкая посадочная концентрация), процесс «подработки» идет медленно, и наоборот. Фактически речь идет о выделении в питательную среду специальных веществ, называемых факторами роста, а также гормонов и гормоноподобных соединений. В стадии логарифмического роста идет интенсивный выброс в питательную среду подобных веществ. Клетки, как бы, «подстегивают» друг друга, ускоряя деление. Именно потому, что кондиционированная питательная среда содержит высокую концентрацию факторов роста, клетки, посеянные в нее, не подрабатывают среду, а сразу начинают интенсивное деление.

Показано также [46], что эндотелиальные клетки секретируют в питательную среду полипептидные митогены, которые могут стимулировать деление не только эндотелиальных клеток, но и клеток мышц, а также клеток фибробластов.

Учитывая то обстоятельство, что в большинстве случаев факторы роста (и тем более гормоны) не проявляют строгой тканевой и видовой специфичности, кондиционированные клетками питательные среды могут использоваться для стимулирования деления многих клеточных культур, и именно этим объясняется возможность их использования в косметологии.

Развивающиеся эмбрионы любых животных являются клеточными системами, находящимися в стадии логарифмического роста. Поэтому использование их гомогенатов или экстрактов из эмбрионов целесообразно при разработке регенерирующих косметических композиций. Эти источники сырья для косметических средств идеологически (по смыслу) приближаются к «нашумевшим» в последнее время стволовым клеткам. 8.4. Экстракты иных тканейВо всех представленных в табл. 8.1 случаях использования в косметологии экстрактов тканей животного происхождения речь может также идти о наличии гормонов, гормоноподобных веществ и факторов роста.

Обращают на себя внимание попытки разработчиков декларативно заявлять об отсутствии гормонов в такого рода препаратах.

Фирма «Gernetic» (Франция), специализирующаяся на выпуске профессиональной косметики, использует экстракты из эмбриональных тканей и определенных тканей молодых животных, находящихся в фазе интенсивного роста. В рекламном буклете фирмы пишется о том, что залогом эффективности их продукции служит воздействие на патогенез косметологических проблем, а также гомологичность биохимического состава тканей млекопитающих и человека при полном отсутствии гормональной активности! Здесь использовано новое понятие «патогенез косметологических проблем» вместо «механизмы старения кожи», говорится также о гомологичности биохимических составов тканей животных и человека, но при полном отсутствии гормонов. Значит ли это, что, с одной стороны, в экстрактах присутствуют все биохимические компоненты тканей (для соблюдения гомологичности), кроме гормонов. А если, действительно, разработчикам этих препаратов удалось в процессе экстракции избавиться от гормонов и гормоноподобных веществ, содержащихся в обязательном порядке в эмбрионах и в тканях развивающихся животных, то каким образом удается воздействовать (словами авторов буклета) на патогенез одной из важнейших косметологических проблем — снижение скорости деления клеток базального слоя эпидермиса? Возникают вопросы к «округлённому» наукообразному тексту. К сожалению, ответа на них мы получить не смогли и вряд ли сможем. Скорее всего этот наукообразный «туман» является блефом в угоду сертифицирующим органам. Но бывают и иные случаи, когда разработчики вольно или невольно проговариваются.

Так, например, утверждается, что в эмульсии плаценты человека, используемой для серии препаратов «Плацентоль» также отсутствуют гормоны. Однако из описания технологии получения эмульсии, предусматривающей сверхвысокие давления, микрогидроудары ультразвуковых частот и ультраскоростную сепарацию, это утверждение выглядит неубедительно. Вряд ли такого рода обработка приведет к разрушению или отделению большинства гормонов при сохранении белков, пептидов, витаминов, аминокислот, нуклеиновых кислот. Тем более, что в описании химического состава эмульсии плаценты приводится содержание такого гормона как прогестерон в количестве 0,016%. Следует заметить, что отмеченное авторами присутствие прогестерона явно противоречит их предыдущему утверждению об отсутствии гормонов в эмульсии плаценты.

Причины такого «дистанционирования» от гормонов и гормоноподобных веществ лежат в правовой области, связанной с процедурой сертификации косметических средств, на которой мы остановимся в дальнейшем.

Что же касается приведенного абсолютного значения содержания прогестерона в эмульсии плаценты (0,016%), то оно превышает более чем в 10000 раз его содержание в сыворотке крови человека (см. табл.8.2). Поэтому использование такого препарата в косметических композициях в количестве 40% (определено авторами) может приводить к существенному изменению уровня прогестерона в крови.

Для оценки этого эффекта воспользуемся разработанным нами определением величины N50 (см. выше), характеризующей количество непрерывно наносимых порций косметического средства (5 мл), необходимых для повышения уровня прогестерона в крови на 50%. Тогда, принимая количество крови в организме человека за 6000 мл, находим величину ΔСK, соответствующую увеличению концентрации прогестерона после единичного нанесения крема, в котором присутствует эмульсия плаценты в 40% концентрации: где величина 1,6·105нг/мл соответствует концентрации прогестерона в эмульсии плаценты (0,016%). Из этого следует, что количество последовательных обработок кожи (N50), необходимых для увеличения содержания прогестерона в крови на 50%, оказывается значительно меньшим единицы. Приведенные расчетные цифры означают, что при наличии полной проницаемости кожи для прогестерона, присутствующего в косметическом средстве, содержащем «Плацентоль» в количестве 40%, для мужчин достаточно нанести на кожу 0,004 мл (4 мкл) крема, чтобы повысить уровень гормона в крови на 50%. Для женщин с максимальным содержанием прогестерона в крови для достижения подобного результата достаточно нанести 0,6 мл крема. Однако, в зависимости от состояния организма женщины, эта величина может снижаться до 0,4 мкл — количество мало осязаемое.

Таким образом, с одной стороны, «Плацентоль» вроде бы не содержит гормонов, а с другой стороны, содержит прогестерон в огромных, по сравнению с биологическими жидкостями, количествах. По-видимому, мы имеем дело с очередным парадоксом, который, однако, вряд ли имеет какое-нибудь отношение непосредственно к теории мягких косметологических воздействий.

Тем не менее, приведенные данные и результаты расчетов наводят на мысль о необходимости установления предельно допустимых концентраций гормонов и гормоноподобных веществ в косметологической практике. 8.5. Другие продукты животного происхожденияИз приведенного в табл.8.1 перечня (VI) других продуктов животного происхождения, применяемых в производстве косметических средств, можно безошибочно выделить первичные продукты (без существенной переработки) в составах которых могут находиться регенерирующие компоненты. К таким продуктам относятся мед пчелиный, яичные желтки и белки и птичьи яйца. Нельзя исключить того, что животные жиры также могут содержать примеси веществ, ускоряющих клеточное деление. Однако, несмотря на широкое использование таких жиров в народной медицине, информация о наличии в их составах регенерирующих компонентов отсутствует.

Разумно также предположить, что желатин и белковые гидролизаты могут содержать низкомолекулярные пептиды, способные регулировать клеточный рост (см.п.7.2.1).

К сожалению, наши знания о составах белковых гидролизатов на предмет содержания пептидов — регуляторов клеточного роста в значительной степени ограничены. 8.6. Возможный подход к определению предельно-допустимых концентраций гормонов и гормоноподобных веществ в косметических композицияхКак уже отмечалось выше, некоторые фирмы, использующие в косметических композициях вещества животного происхождения, стараются откреститься от возможного присутствия гормонов.

Это связано с тем, что в Европейских странах в соответствии с Основной инструкцией №76/768/ЕЭС от 27.07.76 (Приложение II) и Инструкцией №93/768/ЕЭС от 14.06.93 имеется список веществ, запрещенных к использованию в косметических средствах. В этом списке, состоящем из 412 наименований, присутствуют: «Вещества с андрогенным эффектом», «Прогестогены» и «Эстрогены». В Российской Федерации Постановлением Главного государственного врача №26 от 20.11.97 утверждены «Гигиенические требования к производству и безопасности парфюмерно-косметической продукции» — Санитарные правила и нормы (СанПин 1.2.681-97), в которых в виде приложения №5 приводится «Список веществ, которые не должны входить в состав косметических продуктов», аналогичный Списку, принятому в ЕЭС. Что же тут удивительного? Повторим список — и повторили! Однако парадокс заключается в том, что «вещества» с андрогенным эффектом, прогестогены и эстрогены, циркулирующие в определенных концентрациях в крови человека и широко распространенные в животном мире, поставлены в один ряд (список) с трихлоруксусной кислотой (в природе отсутствует), бензидином (канцероген, в природе отсутствует), трихлорнитрометаном (хлорпикрин), нитрозоаминами (сильнейшие мутагены) и т.д., и т.п. Мы полагаем, что можем обозначить этот парадокс как парадокс бездумного копирования.

Попробуем разобраться в этом вопросе.

На наш взгляд, совершенно очевидным является утверждение о том, что влияние любой биологической субстанции на организм и любую клеточную систему в зависимости от концентрации должно описываться «куполообразной» кривой. Ранее мы это отчетливо продемонстрировали на примере влияния аминокислот, солей, глюкозы, витаминов на клетки ЛЭЧ. Следует заметить, что такого рода зависимость является фундаментальным законом, который подтверждался тысячи и тысячи раз на различных веществах, клеточных системах и организмах. Из этого следует, что превышение предельно допустимых концентраций биологически активных веществ в обязательном порядке будет приводить к ухудшению состояния или даже к гибели клеточной системы. Поэтому очень важным является использование безопасных интервалов концентраций. А для этого они должны быть известны.

В случае с гормонами и гормоноподобными веществами ситуация осложняется тем обстоятельством, что между воздействиями отдельных веществ на уровне организма имеются дополнительные связи. Так андрогены могут контролировать проявления, связанные с изменением концентрации эстрогенов и наоборот. То есть в организме концентрации гормонов «взаимосвязаны», и любое увеличение концентрации одного из гормонов может отрицательно отразиться на функционировании клеточных систем организма.

Все это так, но человечество и животный мир существуют, клетки организма и кожи в том числе, омываются межклеточной жидкостью, состоящей из лимфы и плазмы крови, в которой в определенных концентрациях и в определенных соотношениях содержатся гормоны и гормоноподобные вещества. Из этого следует, что все возможные отклонения от нормы будут наблюдаться только при изменении их биологических концентраций и, возможно, соотношений.

Вспомним, например, приводимые ранее данные о том, что суммарное количество эстрогенов в крови женщин в период менопаузы снижается по сравнению с нормой примерно в 13 раз, 17β-эстрадиола — в 8 раз, а дегидроэпиандростерона — ориентировочно в 5 раз. В то же время, содержание лютеинизирующего гормона практически не меняется, а количество фолликулостимулирующего гормона даже несколько повышается. Таким образом, переход к менопаузе сопровождается как изменением концентраций индивидуальных гормонов, так и нарушением их соотношений. Это не может не отразиться на состоянии организма в целом и, естественно, на состоянии кожи. Так, в работе [47] были описаны эксперименты, в которых участвовало около четырех тысяч женщин в возрасте старше 40 лет. Результаты свидетельствовали о том, что «кожа женщин, которые регулярно принимают эстрогены, оказалась менее сухой и имела примерно на 25-30% меньше морщин по сравнению с кожей тех, кто никогда не принимал эстрогены». Утверждается, что снижение уровня эстрогенов вызывает снижение синтеза коллагена, приводит к истончению и уменьшению эластичности кожи*).

Большинство косметологов это прекрасно понимают. Однако наши люди (и косметологи, и некоторые эксперты, и официальные лица в Минздраве РФ в том числе) настолько напуганы гормонами, что предлагают использовать фитогормоны, выделяемые из растений, но только не вещества животного происхождения.

На чем основывается это точка зрения? Во-первых, она базируется на целом ряде наблюдений, свидетельствующих о наличии побочных эффектов в случаях использования синтетических эстрогенных препаратов, которые, тем не менее, никогда не проявлялись при накожном применении. Так, утверждается [48], что эстрогены хорошо проникают через кожу, но в отличие от гормонов, введенных орально, не вызывают побочных реакций. Однако, несмотря на существование гормонсодержащих препаратов, безопасность которых подтверждена многочисленными исследованиями, а также, несмотря на наличие «омолаживающего» эффекта, многие женщины не готовы пользоваться гормональными кремами. Но самое интересное, что наличие запрета на использование андрогенов, эстрогенов, прогестогенов в косметических средствах (СанПиН 1.2.681-97, Приложение 5), по-видимому, продиктовано аналогичными (скорее «бытовыми», чем научными) причинами. Во-вторых, в косметологии широкое распространение получила точка зрения о практической безопасности так называемых фитогормонов — гормонов растительного происхождения. В последующих разделах мы обязательно рассмотрим доводы «за» и «против» растительных добавок к косметическим препаратам. А сейчас остановимся только на обсуждении особенностей действия фитогормонов в сравнении с гормонами животного происхождения. В настоящее время известно более 20 соединений, выделяемых из растений, которые в организме человека и животных действуют подобно эндогенным гормонам. Часто их объединяют в одну группу под названием «фитоэстрогены», хотя это не совсем оправдано. К фитоэстрогенам относят флавоны, флавононы, изофлавоны (флавоноиды), куместаны, лигнаны и халконы. Далее хочется процитировать авторов работы [48], которые формулируют следующую точку зрения: «единственное, что их объединяет — это способность активировать специфические рецепторы на мембранах клеток. Лиганд и рецептор подходят друг к другу как ключ к замку, поэтому никакая другая молекула не может активировать рецептор. И все же фитоэстрогены как-то обманывают рецептор и заставляют клетку реагировать так же, как если бы они были настоящими эстрогенами». Ну, что же этому удивляться — существуют же различные «отмычки» к замкам, имеющие мало общего с исходным ключом. Цитируем далее: «Многие фитоэстрогены отличаются от натуральных гормонов только временем взаимодействия, которого может быть недостаточно для достижения результата. И все же при многократном взаимодействии рецептор сможет прочитать послание и ответить на него. Очевидно, поэтому активность фитоэстрогенов в сотни и тысячи раз может быть ниже, чем активность эндогенных гормонов, но их концентрация в плазме крови человека может в 5000 раз превышать содержание натуральных гормонов».

Таким образом, речь идет о том, что основные различия между эндогенными гормонами животных и человека и фитогормонами заключается в меньшей активности последних и в возможности повышения их концентрации в крови для компенсации этого недостатка (или, наоборот, достоинства). А в целом они повышают активность фибробластов и стимулируют деление клеток базального слоя эпидермиса. В этой связи следует подчеркнуть, что в литературе отсутствуют какие-либо сведения, свидетельствующие об особом, уникальном действии фитогормонов на организм животных и человека. Если не принимать во внимание, что почти все они обладают антиоксидантной активностью, а некоторые проявляют бактерицидные и фунгицидные свойства (с этим следует тщательно разбираться, а иначе как быть с повышением скорости клеточного деления), то их пониженная гормональная активность и, по-видимому, связанная с этим обстоятельством возможность достижения повышенных концентраций в крови является единственным отличием и возможным преимуществом фитогормонов по сравнению с эндогенными гормонами, содержащимися в крови животных.

Из вышеизложенного следует, что напуганные побочными эффектами синтетических гормонов, вводимых в организм человека в высоких дозах и одновременным существенным изменением соотношений индивидуальных соединений в гормональном пуле организма, косметологи, эксперты и официальные лица формулируют запреты, на наш взгляд, блокирующие развитие существенного раздела косметологии, основанной на использовании биологически активных субстанций животного происхождения. Более того, если строго соблюдать эти запреты, то мы должны будем отказаться от использования в косметических препаратах молока и молочных продуктов, гонад морских животных (икра и молоки), используемых испокон веков человечеством в качестве пищевых продуктов, от маточного молочка пчел и т.п. Это действительно парадокс бездумного копирования (или «как бы чего не вышло»), доведенный до абсурда. Ведь осталось сделать последний шаг — запретить функционирование человеческого организма из-за того, что в крови содержатся и вещества с андрогенным эффектом, и прогестероны, и эстрогены.

К абсолютно курьезному обстоятельству следует отнести результаты простого расчета, основанного на различии эффективности действия фитоэстрогенов (растительных гормонов) по сравнению с эндогенными гормонами животного происхождения. Рассмотрим ситуацию, когда мы скушали одну ложку красной или черной икры (примерно 20 г), содержащей определенное количество гормонов и гормоноподобных веществ. Допустим даже, что концентрация фитогормонов в растениях сопоставима с концентрацией гормонов в икре (обычно всегда значительно ниже). Тогда, учитывая только более низкую активность фитогормонов (примерно в 5000 раз), чтобы достичь эффекта, аналогичного действию на организм всего 20 г продукта животного происхождения, необходимо будет проглотить 100 кг растительного сырья или даже больше. Это же целый стог сена! Здесь есть над чем подумать, в том числе и приверженцам вегетарианского питания.

Теперь вернемся к регенерирующим добавкам и косметическим препаратам, содержащим гормоны и гормоноподобные вещества животного происхождения, и сформулируем условия их безопасного использования. 8.7. Условия безопасного использования регенерирующих добавок к косметическим препаратамВ соответствии с теорией мягких косметологических воздействий, основной задачей которой является поддержание состояния кожи человека максимально длительное время без существенных изменений, связанных с протеканием процессов старения, одним из главных объектов воздействия компонентов косметических средств является базальный слой клеток эпидермиса. Скорость деления этих клеток, определяющая параметры динамического равновесия формирования эпидермиса, зависит в первую очередь от состава межклеточной жидкости и ее способности поставлять клеткам базального слоя питательные компоненты, включая гормоны и гормоноподобные вещества, и уносить в лимфатическую и кровеносную системы организма продукты клеточного метаболизма. В соответствии с этим, для косметологов было бы абсолютно безрассудным ставить перед собой задачи введения в организм через кожу веществ, например, способствующих омоложению организма, повышению работоспособности и потенции. Это такой же безрассудный шаг, как и витаминизация организма, посредством нанесения на кожу косметологических препаратов (см. п.7.1)

Для нас чрезвычайно важным является то обстоятельство, как реагируют клеточные системы кожи на присутствие гормонов и гормоноподобных веществ. В табл.8.3 приведены данные о концентрациях гормонов и гормоноподобных веществ, способствующих делению разнообразных клеточных систем. К сожалению, информация о влиянии гормонов и гормоноподобных веществ на клеточные системы кожи явно недостаточна. Однако, даже на основании приведенных данных, можно сделать вывод о том, что концентрации инсулина, трансферина, дексаметазона, глюкагона, требуемые для реализации клеточного деления, не превышают 10 мкг/мл, для гидрокортизона (альдостерона) эта концентрация соответствует 10,7-35,7 мкг/мл, а для фактора роста эпидермиса она не превышает 0,1 мкг/мл. Аномально высокую концентрацию эндотелиального фактора роста можно объяснить недостаточной чистотой продукта. В отличие от этого лечебная суточная доза инсулина (при лечении диабета) варьирует от 0,4 до 1,2 мг/сутки, гидрокортизона — до 16,7 мг/сутки, гонадотропина — до 75 мг/сутки или (в пересчёте на 1 мл крови) от 66,6 до 200 мкг/мл, — до 2,78·103 мкг/мл и до 12,5·103 мкг/мл, соответственно. Таблица 8.5 Перечень гормонов и гормоноподобных веществ, используемых для поддержания роста клеточных систем Таким образом, различия между дозой, стимулирующей клеточный рост, и лечебными дозами могут превышать величину 103 раз. С другой стороны, приведенные в табл. 8.5 данные оказываются более близкими к содержанию гормонов и гормоноподобных веществ в крови человека.(ср. с табл.8.2) Несомненный интерес представляют данные о величинах концентраций гормонов и их аналогов, включаемых в косметические композиции. Из данных, приведённых в табл.8.6, следует, что косметологи используют концентрации гормонов, в десятки и тысячи раз превышающие концентрации, необходимые для поддержания роста клеточных систем и, конечно, они абсолютно не заботятся о возможном изменении соотношений гормонов при введении в косметические препараты одного или нескольких представителей этого класса биологически активных веществ. Таблица 8.6 Содержание гормонов и гормоноподобных веществ в косметических препаратах

*) При расчетах  N50 использовалось среднее содержание гормонов в крови человека:- для дегидроэпиандростеронсульфата натрия — суммарная концентрация андрогенов (0,61 мкг/мл — для мужчин и 2,41·10-3 мкг/мл — для женщин); — для эстрона, эстрадиола и этинилэстрадиола — суммрная концентрация эстрогенов (1,05·10-3 мкг/мл — для мужчин и 0,435·10-3 мкг/мл — для женщин);- для ацетата прегненолона и ацетомепрегенола — концентрация прогестерона (0,21·10-3 мкг/мл — для мужчин и 0,46·10-3 мкг/мл — для женщин в фолликулярной фазе цикла). **) Превышение концентрации гормона в кремах, предназначенных для повседневного использования (365 дней в году), рассчитывалось по следующей формуле: При этом во внимание принималась максимальная величина N50 (подчеркнутые значения), независимо от ее принадлежности — мужчины или женщины.

Используемые косметологами концентрации гормонов приближаются по величине к суточным лечебным дозам этих веществ (см. выше).

Из этого следует, что эксперты и официальные лица основывают свою позицию (если вообще основывают) на физиологических экспериментах, в которых концентрация добавляемых индивидуальных гормонов в миллионы раз превышает концентрации этих же гормонов, требуемых для усиления клеточного роста в условиях «in vitro» (ср. с табл.8.5). А если учесть, что и в экспериментах на клеточных системах использовались все-таки повышенные концентрации гормонов и гормоноподобных веществ по сравнению с их содержанием в крови человека, то обсуждаемую разницу следует дополнительно увеличить. Например, концентрации инсулина, используемые для усиления клеточного роста (0,6-10 мкг/мл), превышают его содержание в крови (0,24-2,4·10-3 мкг/мл) почти в 1000 раз.

Следует учитывать также то обстоятельство, что содержание индивидуальных гормонов и гормоноподобных веществ в продуктах животного происхождения, например, в сперме животных, в целом если и отличается от их содержания в крови человека, то в значительно меньшей степени по сравнению с обсуждаемыми выше различиями (ср. табл.8.2).Естественно, речь не идет о таких препаратах, как «Плацентоль» (см. выше), в которых, по-видимому, в процессе переработки происходит накопление некоторых гормонов. Из всего вышеизложенного можно сделать вывод о том, что первым условием безопасного использования гормонсодержащего сырья в качестве регенерирующих добавок к косметическим препаратам является ограничение по содержанию индивидуальных гормонов и гормоноподобных веществ. Концентрация гормонов и гормоноподобных веществ в такого рода добавках должна быть сопоставима с их содержанием в крови человека. Именно в этом случае можно надеяться на то, что снижение концентрации гормонов в косметических препаратах в 106-109 раз по сравнению с лечебными дозами не будет приводить к каким-либо серьезным отклонениям от нормы. Это относится как их уровню в организме, так и по отношению к клеточным системам кожи. В то же время, такие микродобавки гормонов к косметическим препаратам необходимы для поддержания кожи в хорошем состоянии в возхрасте после 30-35 лет.

В соответствии с теорией мягких косметологических воздействий  нет никакой необходимости создавать концентрацию гормонов и гормоноподобных веществ в косметических препаратах выше их содержания в крови человека. Биотехнологи знают, что стимуляция клеточного роста достигается введением в питательную среду всего 5-10% сыворотки крови животных. Поэтому нанесение на поверхность кожи таких «сбалансированных» по содержанию гормонов и гормоноподобных веществ косметических композиций сможет компенсировать снижающееся с возрастом обеспечение питательными и ростостимулирующими веществами клеток базального слоя эпидермиса.Можно также полагать, что вторым условием безопасного использования гормонсодержащего сырья в качестве регенерирующих добавок к косметическим препаратам является соблюдение соотношений индивидуальных гормонов и групповых соотношений, близких к аналогичным соотношениям в крови человека. Это условие является, несомненно, менее обоснованным и, по-видимому, менее значимым, чем первое. Так, например, из данных, приведенных в табл. 8.5 следует, что стимуляция клеточного роста может достигаться введением в питательную среду 2 — 5 гормонов и гормоноподобных веществ. Более того, на отдельных клеточных системах показано, что такие вещества, как прогестерон, эстроген, тестостерон, кальцитонин, релаксин, церулоплазмин, простагландины, тироксин (для клеток He La) и фибронектин, инсулин, дексаметазон (для первичной культуры гепатоцитов угря) являются своего рода балластом и практически не влияют на ростовые характеристики клеток. Тем не менее, имеется ряд свидетельств, подтверждающих, что на уровне организма соотношение андрогенных и эстрогенных гормонов может играть определяющую роль, и существенное изменение этого соотношения обычно приводит к нарушениям в функционировании некоторых систем организма. Можно полагать, что при изучении ростовых характеристик клеток в питательных средах (см. табл.8.5) в присутствии гормонов, стимулирующих клеточный рост, и так называемых балластных гормонов и гормоноподобных веществ, просто отсутствуют более детальные критерии «комфортного» состояния клеточной системы. Однако нельзя исключить и того, что для достижения «комфортного» состояния клеткам достаточно наличия всего 2 — 5 гормонов.

Тем не менее, на наш взгляд, для предотвращения возможного изменения соотношений гормонов на уровне организма целесообразно соблюдать второе условие безопасности использования гормонсодержащего сырья при конструировании косметических композиций, обладающих регенерирующим действием.

Для решения поставленной задачи необходимо иметь надёжные данные по содержанию гормонов и гормоноподобных веществ в  продуктах животного происхождения. ПРИЛОЖЕНИЕ 17. Суммарный перечень результатов цитологических исследований сырьевых ресурсовРезультаты ранних определений цитотоксичности и противовирусной активности образцов сырья. Образцы сырья были получены из разных источников. Подавляющее количество растительных экстрактов, которые были получены самостоятельно из растений, собранных на территории Новосибирского и Искитимского районов Новосибирской области и хранились при низких температурах. При сборе растений мы пользовались услугами некоторых сотрудников ЦСБС СО РАН и пособием «Определитель растений Новосибирской области» под ред. проф. И.М.Красноборова (коллектив авторов) Новосибирск , «Наука», СП РАН, 2000 г.

Код Название препарата С,% ТС 10 ТС 50 ЕС 20
 D1-1/0,25 Чай китайский — Чан Луо 4.79 0,2933 1,6207
 D1-1/0,5 Чай китайский -Чан Луо 9.57 0,1646 0,4332
 D1-10/0,1 Чай китайский — Гао шань ча (чёрн. дракон) 1.6 0,1108 0,7375
 D1-10/025 Чай китайский — Гао шань ча (чёрн. дракон) 4.1 0,1706 0,2335
 D1-11/0,1 Чай китайский -Жэнь шень у лун 1.64 0,1593 0,9180
 D1-11/0,5 Чай китайский -Жэнь шень у лун 8.2 0,0499 0,1362
 D1-11/10 Чай китайский -Жэнь шень у лун 16.35 0,0302 0,0782
 D1-12/0,25 Зелёный чай особого сорта 6.2 0,1474 0,1964
 D1-12/0,5 Зелёный чай особого сорта 12.4 0,0240 0,1039
 D1-12/10 Зелёный чай особого сорта 24.8 0,0352 0,0462 0.01
 D1-13/10 Грибы  — Син Бао Гу 40 4,7232 Нет значения! 4,6390
 D1-14/10 Грибы — Ча Ши Гу 40 0,5928 Нет значения! 1,1353
 D1-15/10 Грибы — Цзинь Чжень Гу 40.9 4,7587 Нет значения!
 D1-16/10 Китайские грибы (вешенки) 40 1,2970 Нет значения! 4,4326
 D1-18/0,5 Китайский чай особ. (Д1-12) + куриный эмбрион. 12.4 0,0307 0,1231 0.049
 D1-19/10 Грибы сухие из провинции Шань Си 26.3 1,1110 3,3764
 D1-2/0,25 Китайский чай -Си Хуан Цао 4.15 0,1265 0,3211
 D1-2/0,5 Китайский чай -Си Хуан Цао 8.3 0,0394 0,1293
 D1-2/10 Китайский чай -Си Хуан Цао 16.6 0,0430 0,1867 0.045
 D1-20/10 Грибы опята 40.6 1,6721 Больше 5 1,0110
 D1-29/a Гель поли этиленоксида 23.9 1,0977 Нет значения!
 D1-3/0,25 Китайский красный чай 4.15 0,1455 0,6910
 D1-3/0,5 Китайский красный чай 8.3 0,0321 0,2981
 D1-3/10 Китайский красный чай 16.6 0,0494 0,3856
 D1-30 Биогель из моркой капусты «Ламиналь» 2,7201 11,1554
 D1-4/0,25 Китайский чай — Тео Гуан Инь 4.1 0,1864 0,2144
 D1-4/0,5 Китайский чай — Тео Гуан Инь 8.2 0,0471 0,1474
 D1-4/10 Китайский чай — Тео Гуан Инь 16.2 0,0574 0,1222
 D1-5/0,5 Китайский чай — Цзяо Гу Лань 8.0 0,3079 1,2131 0,0675
 D1-5/10 Китайский чай — Тео Гуан Инь 15.93 0,3056 1,7456
D1-54/1 Черника — экстракт 39.9 0,4244 1,9096
 D1-6/0,5 Китайские цветы (тип клевера) 5.6 0,1861 0,8726
 D1-6/10 Китайские цветы (тип клевера) 11.3 0,8439 Нет значения! 1.06
D1-64 Брусника — экстракт 39.1 0,4863 2,3545
 D1-7/0,5 Китайский чай — Тэ Гуань Инь 8.3 0,0471 0,1662
 D1-7/1 Китайский чай — Тэ Гуань Инь 16.53 0,0353 0,0899 0.05
 D1-8/0,5 Китайский чай — хризантема белая 3.55 0,7240 2,5085
 D1-8/10 Китайский чай — хризантема белая 7.1 1,3012 3,3585 0.23
 D1-9/0,5 Китайский зелёный чай из Хай Наня 8.19 0,0330 0,1259
 D1-9/1 Китайский зелёный чай из Хай Наня 16.38 0,0094 0,0580 0.02
 D3 1/1 Фасоль стручковая 40 0,8857 Нет значения!
D3-14 СО2 — экстракт пихты сибирск. 1.03 0,0141 0,0470 0,0641
D3-14/0,57C СО2 — экстракт пихты сибирск. 0.57 0,1892 0,2492 0,7827
D3-15/0,50C Водная фракцияСО2 — экстракта пихты сибирск. 0.50 0,9397 Нет значения! 0,0000
D3-16 Полипренолы из пихты сибир. 8.08 0,2666 2,4738
D3-16/0,45C Полипренолы из пихты сибир. 0.45 1,0641 1,7833
D3-18/0,33C Масло сандалового дерева 0.33 0,1740 0,2219 2,3245
D3-18/9,79 Масло сандалового дерева 9.79 0,0075 0,0102
D3-19/0,51C Масло австралийской розалины 0.51 0,8578 1,0817 0,0000
D3-19/9,31 Масло австралийской розалины 9.31 0,0409 0,1910 0,0000
D3-20/0,54C Lemon scented tea tree oil 0.54 0,4196 0,9688
D3-20/11,45 Lemon scented tea tree oil 11,45 0,0080 0,0101 0,0310
D3-36 Зелёный чай в 70% спирте 16.0 0,0333 0,0477 0,0836
D3-40 Куриные эмбрионы 40.0 1,0946 Нет значения!
D3-41/E Огурец зелёный 40.0 1,4056 Нет значения!
D3-42/E Капуста белокачанная 40.0 1,9188 10,1904
D3-43/E Куриное яйцо пищевое 40.0 1,4875 6,8482 1,9503
D3-44/E Лимона экстракт 40.0 0,7619 2,6047 4,7604
D3-45/E Клюквы зкстракт 39.2 1,3968 6,1259
D3-48 Серые морские ежи —  мужские гонады 39.3 0,3507 2,2807
D3-51 Трутневый расплод 39.3 1,1236 3,2345 4,3408
D3-54/C Гель восстановител. «Пантоник — 2» 25.0 0,6099 2,4004
D3-55 Пищевая добавка «Пантолекс» ??? 0,6998 8,4988
D3-6 Масло листьев смородины 8.95 0,1400 1,7775
D3-6/0,436 Масло листьев смородины 0.44 1,0627 2,1753
D3-7/0,51C Масло мандариновое 0.51 0,1958 0,3142 0,8584
D3-7/9,95 Масло мандариновое 9.95 0,0159 0,0348 0,0336
D3-8/0,43C Масло чайного дерева 0.43 0,4550 1,2295 0,0112
D3-8/1,56 Масло чайного дерева 1.56 0,4089 4,8478
D3-8/10,42 Масло чайного дерева 10.42 0,0239 0,0982 0,5629
D3-9/0,59C Масло лимонное  — LEMON MIRTLE OIL 0.59 0,1266 0,2645 0,7664
D3-9/10,47 Масло лимонное  — LEMON MIRTLE OIL 10.47 0,0075 0,0080 0,0176
D4-1/0,078 Масло пальморозовое 0.078 1,0401 1,5485
D4-1/1,96 Масло пальморозовое 1.96 0,0138 0,0448
D4-10/0,078 Масло лавандовое 0.078 1,1416 1,7294 4,8665
D4-10/1,96 Масло лавандовое 1.96 0,1726 0,2317 0,4218
D4-11/0,078 Масло сандалового дерева 0.078 0,0581 Нет значения!
D4-11/1,96 Масло сандалового дерева 1.96 0,0075 0,0102 0,0189
D4-12/0,078 Масло горького апельсина 0.078 0,6063 0,8375 0,7497
D4-12/1,96 Масло горького апельсина 1.96 0,0358 0,0614 0,1410
D4-13/0,078 Масло сладкого апельсина 0.078 0,3277 0,5997 0,3411
D4-13/1,96 Масло сладкого апельсина 1.96 0,0443 0,0640 0,0940
D4-14/0,078 Масло нероливое 0.078 1,4954 3,5494 0,6816
D4-14/1,96 Масло нероливое 1.96 0,0435 0,1307 0,5970
D4-15/0,078 Масло грейпфрутовое 0.078 0,4184 0,8560 0,0195
D4-15/1,96 Масло грейпфрутовое 1.96 0,0419 0,0535 0,1130
D4-16/0,078 Масло пачулиевое 0.078 0,5975 0,6124
D4-16/1,96 Масло пачулиевое 1.96 0,0077 0,0102 0,0158
D4-17/0,078 Масло гвоздичное 0.078 0,8313 1,1715
D4-17/1,96 Масло гвоздичное 1.96 0,0170 0,0407
D4-18/0,078 Масло лаймовое 0.078 0,7639 1,1685 0,0104
D4-18/1,96 Масло лаймовое 1.96 0,1296 0,1753 0,8448
D4-2/0,078 Масло бергамотовое 0.078 0,7916 1,0941 ?
D4-2/1,96 Масло бергамотовое 1.96 0,1092 0,1467 0,1017
D4-3/0,078 Масло чайного дерева 0.078 1,0187 1,3095 1,1946
D4-3/1,96 Масло чайного дерева 1.96 0,0329 0,1019 0,1688
D4-4/0,078 Масло мятное — 56% 0.078 4,5195 5,1392 3,1807
D4-4/1,96 Масло мятное — 56% 1.96 0,1482 0,2670 0,3659
D4-5/0,078 Масло лимонное 0.078 0,7470 0,8930 0,0002
D4-5/1,96 Масло лимонное 1.96 0,0430 0,0557 0,0419
D4-6/0,078 Масло шалфея мускатного 0.078 0,9805 3,1276 1,0578
D4-6/1,96 Масло шалфея мускатного 1.96 0,1383 0,2320 0,5921
D4-7/0,078 Масло эвкалиптовое 0.078 2,2766 4,2410 0,0609
D4-7/1,96 Масло эвкалиптовое 1.96 0,2149 0,2736 0,3811
D4-8/0,078 Масло иланг — иланговое 0.078 1,4506 1,9570 0,0275
D4-8/1,96 Масло иланг — иланговое 1.96 0,0456 0,1659 0,4086
D4-9/1,96 Масло чабреца 1.96 0,0090 0,0178 0,0330
 G-1-1 Тополь почки (набухание всех почек, немного раскрытых) 40 0,0060 0,0083
 G1-10 Рябина сибирская почки (бутоны соцветий) 40 0,2261 0,4157 0,0003
 G1-11 Фасоль одноцветковая (надземная часть) 0,2327 0,3885
 G1-12 Гусинолук дернистый (всё цветущ. растение) 40 0,9466 1,5181
 G1-13 Берёза бородавчатая (клейкие листья) 40 0,0278 0,0393
 G1-14 Калужница болотная (начало цветения,  надземная часть) 40 0,5795 0,6734 0,0175
 G1-15 Осока дернистая (масс. цветение — цветы и листья) 28.6 0,3399 0,4337
 G1-16 Ива пепельная, мужская (массов. цветение — серёж. и листья) 33 0,4155 1,8126
 G1-17 Ива пепельная, женская (массов. цветение — серёж. и листья) 33 0,1927 0,2618
 G1-18 Мать и мачеха (массов. цветение — надземная часть) 40 0,9868 1,4368
 G1-19 Медуница мягкая (массов. цветение — надземная часть) 40 1,0600 1,4745
 G1-2 Черёмуха обыкновенная (нач. раскрытия почек) 33 0,1626 0,2795 0,1448
 G1-20 Фиалка волосистая (массов. цветение — надземная часть) 40 0,4346 0,7863 0,0423
 G1-21 Тополь почки 34.3 0,0038 0,0062
 G1-22 Тополь, кора 25 0,0286 0,4048
 G1-23 Чина весенняя (цветение 1/3) 40 1,2220 1,7608 0,0000
 G1-24 Чина Гмелина (цветение 1/3) 4,3387 4,9983
 G1-25 Купена душистая (бутоны) 40 4,3002 4,7301
 G1-26 Ветреница вильчатая 40 0,0414 0,0524 0,1518
 G1-27 Реброплодник уральский 40 0,0328 0,0403 0,0391
 G1-28 Осина (слегка клейкий лист) 40 0,1808 0,4830
 G1-29 Орляк обыкновенный  (не развёрнутый лист) 40 1,0939 Нет значения!
 G1-3 Грибы на берёзе (трубчатые) 14.3 0,0541 0,1035
 G1-30 Купальница азиатская (цветы и бутоны) 40 1,2057 3,4219
 G1-31 Карагана древовидная (цветы и листья) 40 1,2783 1,8853
 G1-32 Рябина сибирская (бутоны с двумя листьями) 40 0,6169 1,7680
 G1-33 Чага с берёзовым спилом 20 0,1799 0,2245
 G1-34 Сныть обыкновенная (ранний блестящий лист) 40 0,9037 2,3659
 G1-35 Одуванчик обыкновенный (цветы со стеблями) 40 0,9016 2,9801
 G1-36 Малина обыкновенная (бутоны и листья) 25 0,6389 2,2668
 G1-37 Ива трёхтычинковая, мужская 40 0,8381 1,0316
 G1-38 Ива трёхтычинковая, женская 33 0,2033 1,1235
 G1-39 Гравилат речной 40 0,1143 0,2733
 G1-4 Ветреница алтайская 40 0,0033 0,0051 0,0059
 G1-40 Купырь лесной (зотик с листьями) 40 0,019 0,0206
 G1-41 Вероника дубравная (начало цветения) 40 0,7497 0,9022
 G1-42 Фиапка собачья 40 0,8581 3,5621
 G1-43 Хвощ лесной (песты) 40 0,0259 0,6488
 G1-44 Страусник чернокоренный, страусопёр 40 0,9483 1,7889
 G1-45 Спирея, таволга средняя 40 0,8449 1,0860
 G1-46 Ива корзиночная прутовидная, женская (плодоношение) 28.6 1,2859 3,4738
 G1-47 Ива трёхтычинковая, женская (пестики на ножке) 40 0,1673 0,2034 0,0503
 G1-48 Ива пепельная, мужская (пистья с выпуклым рисунком, отцвенла) 33.3 0,1828 0,9768
 G1-49 Ива грушанколистная, женская (соцветия и листья) 40 0,1789 0,9324
 G1-5 Осина (соцветия) 33.3 0,0847 0,3889
 G1-50 Яблоня ягодная (соцветия) 40 0,3166 1,3921
 G1-51 Манжетка обыкновенная верх.часть побегов (массовое цветение) 40 0,9935 1,2608
 G1-52 Лютик едкий верхняя часть побегов (массовое цветение) 33.3 0,0052 0,0092 0,0267
 G1-53 Земляника лесная, цветы и пистья (надземная часть) 33.3 0,0231 0,2926
 G1-54 Герань лесная, 1/3 часть верхн. побеги) 40 0,0205 0,3652
 G1-55 Гравилат алепский, вершины побегов (начало цветения) 40 0,1660 0,2339
 G1-56 Проломник северный, нитевидный (весь стебель) 33.3 0,1813 0,2351 0,2380
 G1-57 Лютик ползучий (надземная часть с широкими листьями) 40 0,2728 0,4819
 G1-58 Вероника тимьянолистная с белыми цветами (надземная часть) 40 1,0257 3,1514
 G1-59 Калина обыкновенная (соцветия) 40 0,5066 1,0585
 G1-6 Лютик однолистный (надземная часть) 40 0,0098 0,0152 0,0236
 G1-60 Истод гибридный с цветами (надземная часть) 33.3 1,1431 4,5455
 G1-61 Нонея чёрнобурая (надземная часть) 40 1,1507 2,0501
 G1-62 Борщевик рассеченный (бутоны) 40 1,2681 3,7746
 G1-63 Синюха голубая  , цветы и побеги 1/3 часть (начало цветения) 40 0,1775 0,2031 0,0317
 G1-64 Пион, марьин корень (соцветия и бутоны) 40 0,0094 0,0261
 G1-65 Незабудка подражающая душистая (надземная часть, начало цветения) 33.3 1,0143 2,0278
 G1-66 Ветренница лесная (надземная часть) 40
 G1-67 Ирис русский, массрвое цветение (надземная часть) 0,7457 0,9718 0,8652
 G1-7 Ива пепельная женская (серёжки и почки листьев) 3,3588 4,3064
 G1-8 Ива пепельная мужская (серёжки и почки листьев) 28.6 3,0019 4,2699
 G1-9 Ветреница голубая (надземная  часть) 0,0161 0,0265 0,0982
 G-2 ??? 0,1052 0,6514
 G-21 ??? 0,0023 0,0042
 G-22 ??? 0,0156 0,0553
 G2-66 Ветренница лесная 40 0,1809 0,8034
 G2-68 Горошек заборный 33 0,2999 0,9141
 G2-69 Вороний глаз (четырёх листный) 40 0,1819 0,1987 0,4386
 G2-70 Тополь — молодой клейкий лист 40 0,0215 0,0572
 G2-71 Берёза бородавчатая — молодой лист 40 0,0396 0,0506
 PE 1-27/4 Дудник лесной (Ангелика) 40 0,0789 0,3031
PE 1-27/A1 Дудник лесной (Ангелика) 0.54 0,1352 0,3257
PE 1-27/A2 Дудник лесной (Ангелика) 11.6 0,1629 0,4015
PE 1-28/1 Какалия копьевидная 34.3 1.0
 PE 1-29/2 Черёмуха — листья Настойка ??? 0,2519 0,5820.42 0.38 0.033?
PE 1-29/A2 Черёмуха — листья 7.9 0,1768 0,630.55 0.44
 PE 1-30/4 Смородина листья + Н2О2 Настойка ??? 0,1289 0,5253 0,2142
 PE 1-31/4 Душица — листья с цветами+Н2О2 Настойка ??? 0,1871 0,6903
 PE 1-32/4 Калина обыкновенная — густой экстракт Густая масса 0,0933 0,5780
 PE 1-33/4 Пихтовит — водн. Фракция С)2 экстракта 9.0 0,9169 1,3707
 PE 1-34/4 Пихтовит — водн. Фракция С)2 экстракта 9.0 0,0446 0,0567 0,0005
 PE 1-35/4 Бадан толстолисный + Н2О2 < 10 0,0521 0,789 0.47 0.14
 PE 1-36/4 Берёза листья — СО2- экстракт 0,405 0,11 0,0008
 PE 1-36/4 Берёза листья — СО2- экстракт + Н2О2 0,0404 0,1109 0,3453
 PE 1-37/4 Смородина листья — СО2 экстракт 5 0,0379 0,0508
 PE 1-38/1 Эвкалипт австралийский — эфирное масло 100% 2.9 0,3909 0,4560 0,1328
 PE 1-39/1 Апельсин сладкий — эфирное масло 100% 2.44 0,0075 0,0091 0,0000
 PE 1-40/1 Розовое дерево — эфирное масло 100% 1.48 0,0096 0,1270 0,0107
 PE 1-41/1 Розмарин испанский — эфирное масло 100% 2.4 0,0076 0,0298
 PE 1-41/1 ??? 0,1346 0,2164
 PE 1-42/1 Розмарин — эфирное масло 100% (Германия) 2.4 0,0184 0,2538
 PE 1-43/1 Лаванда — эфирное масло 100% (Мон Блан) 3 0,0117 Нет значения!
 PE 1-43/1 Лаванда — эфирное масло 100% (Мон Блан) 3 0,0065 0,0094 0,0187
 PE1 -44/1 Кедровый стланик — эфирное масло 2.2 0,0034 0,0219 0,0427
 PE 1-45/1 Шалфей мускатный — эфирное масло 100% 3.5 0,0049 0,0276 0,0173
 PE 1-45/1 Шалфей мускатный — эфирное масло 100% ??? 0,0198 0,2496
 PE 1-46/1 Гвоздика — эфирное масло 100% 2.4 0,0020 0,0031
 PE 1-47/1 Герань — эфирное масло 100% 7.2 0,00420,0005 0,00650,0292
 PE 1-49/1 Пачули — эфирное масло 100% 1.7 0,00750,0071 0,01020,0188  0,075
 PE 1-50/1 Консервант — Suttjcide A ??? 0,00170,0015 0,00440,0094 0.0003
РЕ 1-51/1 Консервант Liquapar PE ??? ~0.01
 PE 1-52/1 Консервант Germaben II-E 0,0024 0,0042~0.01
 PE 1-53/1 Консервант Liquid Germall Plus 0,0076 0,0091 ~0.02
 PE1 — 54/B Люцевит Б пенооьразование в воде 7.9 0,3140 3,9100около 5.0 1.54
 PE1- 54/A Люцевит Б пенооьразование в воде 7.5 0,5349 1,7049 0.34
 PE1-10/2 Почки тополя — экстракт 1-10 0,0092 0,0820
 PE1-11/2 Лопух листья — экстракт 1-10 0,4077 2,2628 3,9295
 PE1-12/2 Омежник водяной — экстракт 1-10 0,0001 0,3379~0.9  0.023
 PE1-13/2 Берёза лист — экстракт 1-10 0,0412 0,0475
 PE1-14/2 Черёмуха — цветы с листьями 1-10 0,2976 1,6071 5,0838
 PE1-15/2 Крапива 1-10 0,4271 1,5517
 PE1-16/2 Рябина красная — лист с цветами 1-10 0,5834 2,9616 14,5309
 PE1-17/2 Тимьян лесной с цветами 1-10 0,8188 2,9728
 PE1-18/2 Калина -цвет без листьев 1-10 0,7215 2,8600
 PE1-19/2 Черемица Лобеля — экстракт 1-10 0,2631 1,5321
 PE1-20/2 Жимолость — цветы с листьями 1-10 0,4441 2,7449
 PE1-21/2 Володушка золотистая 1-10 0,1582 0,7036 5,2729
 PE1-22/2 Синюха голуьая с цветами ? — экстракт 1-10 0,1153 0,2292
 PE1-23/2 Борщевик рассечённый, бутоны — экстракт 1-10 0,4364 2,4678 5,2847
 PE1-24/2 Подорожник — экстракт 1-10 0,3756 2,7798 2,8400
 PE1-25/2 Трава с цветами незабудки и корнями 1-10 0,6709 4,7474
 PE1-26/2 Гравилат цветы и семяна 1-10 0,1607 1,0871
 PE1-27/2 Дудник лесной, цветы со стеблями 1-10 0,0727 0,2843
 PE1-28/2 Какалия копьевидная, листья 1-10 0,0137 0,8801
 PE1-28/4 Какалия копьевидная, листья с глицерином 1-10 0,0333 1,2257
 PE1-29/2 Черёмуха, пистья 1-10 0,2381 0,7272
 PE1-3/2 Одуванчик с цветами без листьев 1-10 1,0942 1,7395
 PE1-30/2 Смородина, листья — экстракт 1-10 0,3674 1,6445
 PE1-31/2 Душица, листья и цветы — экстракт 1-10 0,0927 1,0328 0.26
 PE1-32/2 Калина обыкновенная густой водный экстракт 1-10 0,1525 0,2177
 PE1-33/2 Пихтовит — водная фрак. СО2-экстракт, пихты 10 1,1577 1,7017 0,0336
 PE1-34/2 Пихта, СО2-экстракт 1-10 0,0264 0,0479 0,1920
 PE1-35/2 Бадан толстолистн. (чёрн. листья), экстр. водный густой 1-10 0,1056 0,5620
 PE1-36/2 Берёза-лист, СО2 экстракт 1-10 0,0184 0,0463 0,0976
 PE1-37/2 Смородина- листья, СО2-экстракт 1-10 0,0346 0,0477
 PE1-4/2 Смородина с цветами 1-10 0,2535 0,9557
 PE1-5/2 Ива козья — листья, экстр. 1-10 0,2898 1,6005 0,5671
 PE1-57/2 Кедровый — спил оболочки семян, экстр. 17.3 0,2984 0,7030
 PE1-6/2 Сморчки, экстракт 1-10 0,4501 6,9784 4,9661
 PE1-7/2 Папоротник орляк, экстр. 1-10 0,8552 2,3695
 PE1-8/2 Лопух — корень — экстракт 1-10 0,0384 0,5632
 PE1-9/2 Верба — цветы 1-10 0,2080 2,1987
 PE-55/1 Артемия — гонады влажные 39.4 1,1163 1.8 ???
 PE-56/1 Артемия — гонады сухие 16.8 1,1784 28,4090 0.0012
 PE-57/1 Кедр — спил скорлупы 17.3 0,3351 0,6728
T1-47/A Корова, молозиво 40 Нет значения! Нет значения! 1,2858
 TE 1-26/4 Кукумария — женские гонады 50.5 0,0961 0.057 0,0992
 TE 1-27/4 Лосось — молоки 40 0,1067 0,5504
 TE 1-28/4 Морской гребешок — гонады 49.6 0,2773 0,9923
 TE 1-29/4 Кукумария — мужские гонады 51.2 0,8803 3,0591
 TE 44/1 Серый морской ёж —  гонады 75 0,7714 3,7291
 TE 45/1 Минтай — молоки 75 2,0985 10,3860
 TE 47/A Корова  — молозиво 40 4.801 4,1413 5,7054
 TE 48/A Серый морской ёж — гонады 40 0,7919 2,9313 0,8128
 TE 49/B Минтай — икра  с солями, глицерином и очищ. спиртом 40 0,5429 1,3867 1,1881
 TE 50/A Минтай — молоки с солями и глицерином +очищ. спирт 40 1,5181 3,5506 3,1400
 TE 50/B Минтай — молоки с солями и глицерином +обычн.  спирт 1,5646 3,4793 1,0679
 TE 51/B Кальмар Бертрана — икра 40 0,2048 0,2326
 TE 52/B Куриные эмбрионы 39.9 4,6106 Нет значения!
 TE-41/1 Серые морские ежи — мужские гонады 80 ??? 2,9720 6,7105
 TE-42/1 Серые морские ежи — женские гонады 78.6 1,1132 12,007
 TE-43/1 Кальмар Бертрана — икра 75 1,2058 ≥ 5

Следует заметить, что некоторые данные из приведенной таблицы быои удалены по разным причинам..ПРИЛОЖЕНИЕ 18. «Забытые» —  нереализованные проекты.Проект «Персональная косметика»Аннотация: Частная инновационная компания разработала косметические препараты, позволяющие каждому потребителю приготовить индивидуальный набор кремовых композиций. Компания предлагает передачу технологии, а также подготовку  специалистов в области терапевтической косметологии, способных оказывать консультационные услуги населению в рамках частной предпринимательской деятельности. Организовано производство некоторых косметических препаратов. Имеется возможность расширения номенклатуры выпускаемой продукции.Описание: Необходимость проекта обуславливается отсутствием достоверной информации о качестве косметических препаратов и механизмов их действия на клеточные системы кожи. Разработанные в соответствии с современной теорией мягких косметологических воздействий препараты, названные  ИПСО-Системами, являются композициями четвертого поколения. Использование препаратов предусматривает смешивание в определенных количествах кремовой основы и концентрата,  отсчитываемых по каплям. Составы концентратов разработаны  таким образом, что при их разбавлении кремовой основой дости­гается питательная ценность, близкая идеальной, для конкретного возраста. В процессе их использования потребитель получает возможность приготовить целую гамму кремовых композиций. Из одного набора можно получить: крем для век, низкоосмолярный дневной и вьюокоосмолярный вечерний кремы (с одновременной реализацией ежедневного цикла открытого нами нового вида косметического массажа — осмомассажа), а также вечернюю маску, соответствующие возрасту и состоянию кожи потреби­теля, Кроме этого, указанные препараты могут использоваться профессиональными косметологами для приготовления высоко эффективных масок. ИПСО-Системы позволяют осуществлять уход за комбинированной кожей: нет необходимости приобретать отдельные кремовые композиции для жирных, сухих или нормаль­ных участков, так как необходимые препараты можно получить путем последовательного целенаправленного приготовления в соответствии с инструкцией из содержимого двух исходных флаконов — кремовой основы и концентрата.Инновационные аспекты предложения: Составы пред­лагаемых концентратов разработаны таким образом, что при их разбавлении кремовой основой впервые (по мнению авторов) появляется возможность получить препараты для индивидуального пользования.Главные преимущества предложения:• возможность получения препаратов для индивидуального пользования;• возможность получения из одного концентрата нескольких композиций;• возможность использования, как рядовыми потребителями, так и профессиональными косметологами;• возможность хранения при комнатной температуре без вклю­чения в рецептуры консервирующих биоцидных добавок.Тип требующегося сотрудничества: Коммерческое соглашение с техническим содействием, соглашение о совместном предпри­ятии, лицензионное соглашение, финансовые ресурсы.Текущая стадия развития: Уже на рынке. Права интеллектуальной собственности: сохранениу информации в виде «ноу-хау».Февраль 2006 г. Проект «Разработка рецептур, защищающих клеточные системы организма человека от токсического действия этилового спирта»(краткое описание)Целесообразность разработки препаратов и приемов, направленных на снижение последствий алкогольной интоксикации (постпохмельный синдролм), не вызывает сомнений.Предпринятое в 2004 г. инициативное исследование продуктов растительного и животного происхождения  с ипользованием модельной клеточной тест-системы Vero (клетки почки зеленой мартышки) позволило обнаружить около 15 препаратов, способных эффективно защищать клетки от повреждающего действия этилового спирта (алкогольные антидоты). Отдельные представители этой группы обладают также отчетливо выраженной способностью  предотвращать репликацию вирусов в клетках (противовирусное действие). Эти  обстоятельства подтверждаются экспериментальными данными,  приведенными  ниже в графическом виде (рис. 1-3).
Рис. 1. Данные для 70%-ного этилового спирта.
Рис. 2. Данные для препарата Т1-47/А в ~65%-ном этиловом спирте (антидотное действие).
Рис. 3. Данные для препарата на основе ягод черноплодной рябины в ~70%-ном этиловом спирте (антидотное и противовирусное действие). Представленный на рис. 1, верхний набор точек, отражающий воздействие добавок  этилового спирта (70%) на клетки, характеризуется обычной для биологических систем S-образной кривой. При постепенном увеличении содержания спирта в системе количество живых клеток снижается и 50%-ное уничтожение клеток достигается при концентрации добавки, равной 5%.Нижний набор точек, полученный путем внесения в клеточную систему постепенно нарастающих добавок спирта и определенного количества вирусных частиц, свидетельствует об отсутствии какой-либо защиты клеток от воздействия вирусов.Рис. 2 свидетельствует о том, что добавление спиртового раствора испытуемого образца животного происхождения (Т1-47/А) к клеточной тест-системе нивелирует токсическое действие спирта – количество живых клеток не снижается даже при добавлении спиртовой аликвоты в количестве 10% (верхний набор точек).Нижний набор точек, как и на первом рисунке, демонстрирует отсутствие противовирусного действия  спиртового раствора препарата – клетки погибают при внесении в питательную среду вирусных частиц, вне зависимости от крнцентрации испытуемого образца.В отличие от предыдущих рисунков, представленные на рис. 3 данные указывают на то, что спиртовый раствор препарата растительного происхождения (Д4-61),  наряду с эффектом детоксикации (верхний набор точек), проявляет отчетливое противовирусное действие, в концентрации от 0.2% и выше защищая клетки от повреждающего действия вируса (~ 90%). Это обстоятельство делает его перспективным (индивидуально или в смеси с другими препаратами) в качестве исходного сырья для производства пищевых добавок — алкогольных антидотов, дополнительно обладающих противовирусным действием. Причем, наблюдаемое нами противовирусное действие имеет природу, не связанную с воздействием на внутреннюю иммунную систему организма — это альтернативная вакцинированию защита организма от вирусной инфекции на клеточном уровне. Естественно, оптимальной является комбинация различных подходов.Проведение ряда дополнительных экспериментов позволит определить являются ли наблюдаемые детоксикационные эффекты специфическими только в отношении этилового спирта или распространяются и на токсические эффекты других ксенобиотиков (например, широко распространенных антибиотпков), что существенным образом может расширить сферу их применения. Аналогичным образом следует проверить — распространяется ли противовирусная активность рассмотренных растительных экстрактов на другие виды вирусов.  ЦЕЛЬ ПРОЕКТАРазработка рецептур, выбор формы выпуска, разработка технологии и организация производства пищевых добавок на основе воспроизводимого сырья животного и растительного происхождения.Основные стадии реализации проекта:Патентование разработки на предмет «применения некоторых видов препаратов растительного и животного происхождения в качестве алкогольных антидотов и противовирусных профилактических средств» следует заменить на временное сохранение в виде «ноу-хау». Разработка детального бизнес-плана — ожидаемые затраты ~ 3000 USD.Разработка рецептур, методов контроля качества и стандартности продукции обоснование формы выпуска и наработка опытных партий препаратов – ожидаемые затраты ~25-30 тыс. USD. Изучение физиологического действия и оценка предельно допустимых концентраций препаратов на стадии, предшествующей сертификационным испытаниям – ожидаемые затраты — не определены.Сертификация продукции в качестве пищевых или биологически активных добавок (БАД) — ожидаемые затраты — не определены.Организация производства — ожидаемые затраты — не определены.Организация системы сбыта продукции — ожидаемые затраты — не определены.7 апреля 2006 г. e-mail: scicosmetsoc@online.nsk.su ПРИМЕЧАНИЕ — в таблицах учебного пособия имеются указания на другие виды сырья, обладающие подобными свойствами.Проект. «Организация производства продуктов на основе растительных биоцидов».1. ОБОСНОВАНИЕ     Сибирский регион имеет богатые ресурсы различных видов дикорастущих растений, многие из которых по данным официальной и народной медицины обладают биоцидным действием. Составлен исходный список около 200 подобных растений, произрастающих в Сибири.     По результатам геоботанического обследования земель двух сельскохозяйственных предприятий Новосибирского района Новосибирской области, расположенных вблизи Наукограда «Кольцово», из произрастающих здесь 54 видов луговых растений 36 видов входят в упоминаемый выше список растений, обладающих биоцидным действием. Выращивание некоторых видов этих растений освоено Центральным Сибирским Ботаническим садом СО РАН.      Биоцидная активность растений и получаемых из них продуктов может характеризоваться антибактериальным, противовирусным и цитопатическим действием.     Антибактериальные и противовирусные свойства растений могут быть использованы для разработки  композиций, обладающих противомикробным действием для широкого спектра микроорганизмов. Следует отметить, что по данным Минздрава РФ в  стране ежегодно фиксируется 35-37 миллионов случаев инфекционных заболеваний, а с 1976 года врачи столкнулись с 36 новыми неизвестными ранее инфекциями, включая 9 новых вирусов. Кроме этого необходимо учитывать возможность и разрабатывать средства защиты против предотвращения последствий актов биотерроризма.                                       Учитывая нарастающую в последние десятилетия резистентность инфекционных агентов по отношению к антибиотикам и способность микроорганизмов адаптироваться к конкретным индивидуальным биоцидным соединениям, на наш взгляд, наиболее перспективным в качестве альтернативы антибиотикам является использование таких многокомпонентных систем, какими являются продукты растительного происхождения (например, эфирные масла растений и растительные экстракты). Учет химического строения ингредиентов этих сложных продуктов и их активности в отношении индивидуальных микроорганизмов позволяет надеяться на создание композиций, обладающих широким спектром биоцидного действия, препятствующих развитию резистентности микроорганизмов.      Цитопатическая активность продуктов растительного происхождения может быть использована для поиска веществ, обладающих противораковой активностью. Это направление работы представляет особую важность, так как ежегодно в стране регистрируется около 450 тысяч онкологических заболеваний (рак легкого, гинекология, опухоли молочной железы и т.д.)    2.  ОСНОВНЫЕ ЗАДАЧИ ПЕРВОГО ЭТАПА.      На начальном этапе реализации проекта целесообразно сосредоточиться на решении следующих задач:комплексное исследование продуктов растительного происхождения в отношении противовирусного, антибактериального и цитопатического действия, обращая особое внимание на растения, произрастающие в Новосибирской области и имеющие перспективы интенсивной интродукции;разработка рецептур и организация  производства профилактических препаратов с целью их бытового использования (освежители воздуха, обладающие противовирусной и антибактериальной активностью) – снижение риска заболеваний в периоды, неблагоприятные в эпидемиологическом отношении, а также для снижения риска заболеваний типа туберкулеза;разработка рецептур и организация производства  препаратов с целью использования для дезинфекции сельскохозяйственных помещений, предназначенных для содержания животных;разработка рецептур, предназначенных для санации специальных помещений, имеющих ограничения на наличие микрофлоры (перевязочные, боксовые и т.д.) и профилактики вентиляционных систем;разработка и организация производства рецептур для замены химически синтезированных веществ, используемых в качестве консервирующих добавок в косметологии, с целью повышения безопасности косметических средств; разработка рецептур и организация производства  жидкостей для пропитки салфеток, обладающих антисептическим действием, а также для использования профессиональными косметологами (замена перекиси водорода), для предприятий общепита и бытовых нужд (антисептическая обработка рук);разработка рецептур и организация производства бесспиртовых ополаскивателей для полости рта.      3.ПЕРСПЕКТИВНЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ РАЗВИТИЯ ПРОЕКТА      Второй этап реализации проекта предусматривает организацию дальнейшего планомерного комплексного скрининга биоцидного действия флоры Сибирского региона с поиском перспективных об,ектов, изучение возможности их интродукции и переход к медицинским исследованиям с целью разработок  рецептур и методик с использованием продуктов растительного происхождения, например для лечения рака легких, туберкулеза и других заболеваний бактериальной и вирусной природы. Возможна разработка, сертификация и производство продуктов медицинского назначения – не прилипающие салфетки (повязки, бинты ) для лечения ожоговых поражений кожи и т.д..Предполагаемые исполнители первого этапа проекта: Общество с ограниченной ответственностью «Живая косметика Сибири»;Некоммерческое партнерство «Научное косметологическое общество»;Центральный Сибирский Ботанический сад  СО РАН;Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»; Научно-исследовательский центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН.Дата — ориентировочно … Проект «Современная бальнеология для космоса и повышение жизненных функций человека» (аннотация).В рамках подготовки проекта разработаны составы и лабораторная технология получения ванн изоосмотических очистительных детоксикационных – усиленных, с противовирусным эффектом. Цели проекта включают изучение гомеостатических показателей крови, гемодинамики и функции почек у волонтеров в процессе проведения бальнеологических процедур с использованием новых продуктов – изоосмотических ванн, доказательство их повышенной детоксикационной активности и оценку возможности применения новых бальнеологических препаратов в длительных космических полетах.Проводится обсуждение влияния осмотической активности водных бальнеологических систем на проницаемость кожи, а также необходимости соблюдения  физиологической сбалансированности концентраций и соотношений макроэлементов, которые являются ключевыми параметрами безопасности бальнеологических процедур. Предлагается теоретическое обоснование и подход к оценке возможности использования бальнеологических систем в длительных космических полетах с целью поддерживания высокую работоспособность и повышение защитных функций организма в отношении ионизирующих излучений.Проведены предварительные исследования влияния новых бальнеологических средств на организм человека. Показано многообразие проявлений их положительного действия. Есть основание полагать, что наблюдаемые многофункциональные проявления могут быть связаны с детоксикационной активностью новых бальнеологических средств. Теоретически обосновывается перечень возможных направлений использования указанных препаратов, связанных с детоксикационной активностью: — для устранения различного рода аллергических проявлений;- при профессиональных и бытовых отравлениях;- для снижения концентрации поступающих в организм человека из окружающей среды экологически опасных веществ;- для уменьшения содержания в организме этилового спирта и его опасного метаболита (продукта окисления спирта) — уксусного альдегида;- для снятия похмельного синдрома;- для выведения организма из состояния алкогольного психоза;- для выведения из организма наркотических веществ и их метаболитов;- для ускорения выведения из организма антибиотиков, а также иных лечебных средств и их метаболитов после завершения процесса лечения;- для корректировки величины осмолярности крови, лимфы и межклеточной жидкости при некоторых видах заболеваний;- для снятия стрессовых состояний организма (успокаивающий эффект);- при диабете для очистки крови от альдегидов и кетонов (продукты перекисного окисления липидов) и для снижения уровня глюкозы;- для коррекции артериального давления (ванны для гипо- и гипертоников);- имеются предпосылки для использования изоосмотических ванн для коррекции состава крови при почечной недостаточности в дополнение к процедуре гемодиализа. Проведенные экспериментальные проверки по некоторым из перечисленных направлений воздействия (похмельный синдром, алкогольный психоз, наркотическая интоксикация) подтверждают высказанное предположение.Детоксикационную активность бальнеологических средств удается усиливать благодаря введению в их составы экстрактов растительного и животного происхождения. Введение в составы некоторых растительных добавок придает новым препаратам противовирусные свойства. Все ванны серии НКО-ВИД проявляют антистрессовое действие – улучшение сна, расслабление.Разработаны составы 19 наименований бальнеологических средств (ванны и СПА – процедуры). Проведено сопоставление составов бальнеологических препаратов, присутствующих на российском рынке с предлагаемой  новой продукцией.В рамках проекта предлагается организовать производство бальнеологических препаратов в количестве 14 тыс. упаковок в месяц с доходом (реализация по оптовым ценам) около 2 млн. руб./месяц.Дата — …Проект «Интенсивный маркетинг современных косметических средств в Приморском крае»Цель проекта — организация производства и наращивание объёмов продаж современных наукоемких  косметических препаратов в Приморье.Суть проекта — реализация плана внедрения на рынок  Приморского края косметических средств нового поколения (бинарной косметики) с более высокими потребительскими свойствами.Косметические системы нового поколения, реализованы в двух вариантах.1 вариант —  представляет собой концентраты композиций (косметические сыворотки). В процессе употребления определенная часть концентрата смешивается с основой, в качестве которой могут выступать: вода, заварка чая, молоко, вино, гелевые системы и т.д. (вторая компонента). Это упрощенный вариант «бинарной косметики». 2 вариант – представляет собой сухие концентраты для косметических масок. В процессе применения данных препаратов также используется прием, условно представляющий упрощенный аналог варианта «бинарной косметики».Отделение содержащей воду основы от концентрата позволяет достигнуть нового качества — предотвращать развитие микрофлоры и в основе и в концентрате при хранении в обычных бытовых условиях. Объединение основы и концентрата осуществляется непосредственно перед применением препарата. Технология запатентована в РФПри классификации косметических средств (по качеству — потребительским свойствам и безопасности), ключевым параметром является отсутствие (или наличие) в составе препаратов антимикробных (биоцидных) добавок (консервантов), замедляющих скорость размножения колоний бактерий, грибков и т. д.  Но, если консерванты предназначены для уничтожения микробов, то они  уничтожают и менее защищённые клетки организма и клеточные системы кожи. К настоящему времени накопилось большое количество фактов, свидетельствующих о неблагоприятном воздействии биоцидных добавок на организм человека.Подавляющее большинство производителей косметических средств, получая прибыль за счёт высоких объёмов продаж, не стремится к снижению неблагоприятного влияния химически синтезированных биоцидных добавок на организм и кожу человека (препараты второго и третьего поколений). Однако, основная масса потребителей старается при выборе, отдавать предпочтение более натуральным косметическим средствам.Основателю бизнеса, в рамках которого разработан настоящий проект, канд. хим. наук  Децина Анатолию Николаевичу  удалось решить теоретические и практические проблемы, отделяющие нынешнюю массовую промышленную косметологию от составов, которые могут быть отнесены к четвёртому поколению препаратов.Во-первых, был разработан алгоритм расчёта питательной ценности косметических средств, необходимый для оценки минимального количества вносимых антимикробных (биоцидных) добавок, в зависимости от питательной ценности препаратов. Это позволило оптимизировать состав косметических рецептур по питательности и присутствию биоцидных включений, в зависимости от возраста и типа кожи будущих потребителей. Разработанные в соответствии с указанным алгоритмом  составы лидируют в мировом рейтинге по натуральности и питательной активности косметических средств (см. сборник «Путеводитель по косметике», 3 изд., 2005 г.).Во-вторых, для оценки качества косметических средств, был введён такой критерий, как осмолярность и установлено наличие связи между осмолярностью косметического препарата, его питательной ценностью и способностью бытовой (производственной) микрофлоры к размножению в нём.В-третьих, при разработке новых рецептур предусмотрена стадия оценки безопасности  готовых косметических препаратов на клеточных культурах.Составы косметических средств включают только натуральные ингредиенты, включая и препараты, полученные из флоры и фауны Дальнего Востока.МаркетингВ рамках предлагаемого бизнес-плана предполагается отработка системы продаж новых препаратов на рынке городов — Владивостока, Артема, Находки, Арсеньева и других населенных пунктов Приморского края.На данный момент российский парфюмерно-косметический рынок — один из самых динамично развивающихся в мире. Доля расходов на покупку такой продукции у российских женщин составляет 12% в общей структуре расходов, что в полтора — два раза больше, чем в Америке и Западной Европе. По данным маркетологов западных компаний ежегодный темп роста российского рынка парфюмерии и косметики составляет около 20%, в то время как в Европе  темп роста лишь приближается к 2%. В  2001 году (по данным Российской парфюмерно-косметической ассоциации) объем продаж парфюмерии и косметики в стране составил более 4 млрд. долларов. В 2002 году он увеличился еще на 600 млн. долларов.Сегодня Российский рынок парфюмерно-косметической продукции занимает шестое место в Европе. Его объём в 2003 г. вырос ещё на 16% и составил, включая продукцию «черного» рынка, 5,204 млрд. долл. При этом доля западных компаний в настоящее время составляет 53%, а отечественных – 47%, причем 30% рынка делят между собой восемь крупнейших корпораций: P&G Co, L’Oreal Group, Beiersdorf AD, Colgate-Palmolive Co, Unilever Group, Henkel KGaA, Oriflame International SA, Gillette Co.От 30 до 50% российского рынка парфюмерии и косметики занимает контрафактная продукция и контрабанда, а также «лжебрэнды».Опросы потребителей косметики в России и усиление на Западе движения «зеленых» свидетельствуют об устойчивой тенденции повышения спроса на натуральные косметические средства, к которым и относятся препараты четвертого поколения.Таким образом, предлагаемая продукция достаточно перспективна для реализации на территории Приморского края, а в дальнейшем – в других регионах России и за рубежом. Намечаемое вовлечение других стран в процесс внедрения современных рецептур, технологии их производства и методики продаж открывает огромные перспективы для увеличения прибыльности предприятия.Технология и кооперация производстваТехнология производства косметических средств четвертого поколения легко вписывается в существующую технологию производства косметических средств ООО «Живая косметика Сибири», производственные мощности которой являются загруженными в недостаточной степени. На первой стадии реализации проекта предполагается наработка продукции на их площадях по договору возмездных услуг.По мере развития проекта в дальнейшем потребуется аренда производственных площадей и, в перспективе, приобретение или строительство специальных производственных и лабораторных помещений. С целью приближения производства к рынку необходимо рассмотреть возможность организации производства на территории Приморского края.Отдельные фрагменты технологии, в частности производство некоторых полупродуктов, планируется реализовать в кооперации с ГНЦ ВБ «Вектор»,  Институтом катализа СО РАН, ТИНРО Центром (г. Владивосток) и другими организациями. Исследования и разработкиИсследования и разработки планируются в двух взаимосвязанных направлениях:Совершенствование рецептур и расширение номенклатуры косметических средств четвертого поколения с использованием приморской флоры и фауны в качестве источников сырья.Отработка новой системы продаж косметических средств на рынке городов Находка и Владивосток.На первом этапе реализации проекта особое внимание будет уделяться отработке новой системы продаж, а также изучению свойств растений, произрастающих в Приморском крае и имеющих перспективы интенсивной интродукции.При выполнении исследований и разработок планируется кооперация с подразделениями ГНЦ ВБ «Вектор», Институтом хроматографии «ЭкоНова», Центральным сибирским ботаническим садом СО РАН, Новосибирским институтом органической химии СО РАН и с Кафедрой ортопедии, травматологии и медицинских катастроф НГМА и др.Финансы Проведенные расчеты учитывают вложения инвестиций в объеме 456 тысяч рублей. Анализ движения денежных средств для принятого  сценария продаж в рамках этого варианта свидетельствует о том, что к концу года прибыль составит  около 476 тысяч рублей. При этом, к концу первого года предусматривается возврат 256 тысяч рублей инвестиций —  полное возвращение завершается в первом квартале второго года. Наряду с этим в течение второго года реализации проекта инвестору дополнительно выплачивается 1398 тыс. рублей, что составляет 300% на вложенные инвестиции. В результате, уже в первый год проект выходит на рентабельность, принося от 476 тыс. рублей прибыли в первый год и до 11,9 млн. рублей – суммарно за весь период реализации проекта (2 года).Чистая приведённая стоимость (NPV)  в первые два года, (при ставке дисконтирования 20%), в соответствии с описанным в проекте сценарием составит 2,2 млн. рублей.Внутренняя норма рентабельности проекта (IRR) 191%.Окупаемость проекта – 13 месяцев.Проект «Инновационные фирмы – новый долгосрочный источник доходов»Инновационные фирмы, основная деятельность которых связана с разработками новых препаратов и способов их производства, могут рассматривать несколько направлений развития (реализации) своей деятельности.Вариант А. Создание крупномасштабного производства, предназначенного для обеспечения потребности населения России в новых продуктах. К неотъемлемым особенностям реализации этого направления развития следует отнести:- необходимость привлечения значительных инвестиционных средств, предназначенных  для строительства производственных площадей и других затрат, связанных с организацией крупномасштабного производства; — решение проблем транспортной логистики для обеспечения доставки продукции по регионам. Например, для разработанных и продвигаемых на рынок концентратов изоосмотических ванн транспортная проблема приобретает особое значение. Масса одной порции концентрата (с упаковкой) для приготовления ванны составляет от 400 до 1500 г. Для профилактического курса очищения организма требуется принять до 10 бальнеологических процедур. Если в результате продвижения продукта потребуется ежемесячно обеспечивать комплексом процедур 100 тысяч человек, то масса перемещаемой по регионам страны продукции может достигать 1500 тонн в месяц.Вариант (Б) Предполагает использование существующего производства, организованного в бизнес — инкубаторе Кольцово, или создание опытно-промышленного производства для отработки регламентов производства солевых систем в соответствии с требованиями GMP. В предлагаемом варианте (Б) по сравнению с предыдущим вариантом (А) существенно снижаются затраты на строительство производственных площадей – отсутствует необходимость создавать новую фабрику «Свобода», а также транспортировать продукцию по всей стране и за её пределы.Наиболее приемлемой для инновационной фирмы является продажа неисключительных лицензий  на свои разработки. Стоимость лицензии повышается при участии инновационной фирмы в передаче технологического регламента производства и помощи в обосновании и использовании местных источников биологически активного сырья.Мы уже имеем некоторый опыт реализации разработок в области косметологии (Новосибирск – пять фирм; Астрахань – одна фирма) и планируем в ближайшие два года увеличить до 20 число договоров продажи неисключительных лицензий на разработку технологии производства и реализацию предлагаемой инновационной продукции. Главная проблема небольших инновационных фирм – реализация продукции. С этой целью мы разработали проект продвижения инновационной продукции на российский и зарубежные рынки. Для его реализации приглашаю к сотрудничеству индивидуальных предпринимателей и всех, желающих создать собственный долгосрочный источник доходов.Проект «Здоровье и продолжительность  жизни пожилых людей и ветеранов Великой Отечественной Войны»                                                               (фрагмент Национальной идеи – здоровье населения России)Нам всем нужно полноценно жить и по возможности плодотворно работать! Мы полагаем, что нам удалось найти подход для продления жизни.                                                                                   Искренне жалею, что значимые для всех  нас                                                                                                                                                                                                                                                                                                                        люди уходят в мир иной неоправданно рано.                                                                            Возможные варианты реализации проекта :1- повышение работоспособности и увеличение продолжительности жизни (требует подтверждения);2- освобождение организма человека от токсических веществ  (профилактическое и усиленное);3- защита от пребывания человека в неблагоприятных условиях (длительная задымлённость и других видов экологически неблагоприятных воздействий, например, проживание в городских условиях);4- благоприятное профилактическое воздействие на состояние суставов; 5- постепенное снижение избыточного веса и жировых отложений;Обратите особое внимание на реализацию вариантов №№1 и 2  применительно к сохранению здоровья окружающих нас пожилых людей. Например, в п.г.т. Кольцово (Новосибирская область) в настоящее время проживают 8 ветеранов Великой Отечественной Войны (ВОВ)  и 4 человека, приравненных к участникам ВОВ.  Их количество, к сожалению, со временем естественным образом постепенно уменьшается — потрачены силы, энергия и очевидно в организме накоплено существенное количество функциональных отклонений от нормального состояния. Мы могли бы попытаться улучшить их  здоровье и  увеличить естественную продолжительность  жизни с соблюдением постоянного врачебного контроля. Проект с ветеранами ВОВ может предусматривать ежеквартальные циклы профилактических бальнеологических процедур. В одном цикле для каждого ветерана предусматривается от 4-х до 6-ти бальнеологических процедур с ориентировочными интервалами между ваннами  в течение двух — трёх суток.Таким образом, затраты на приобретение концентратов с целью проведения процедур для одного ветерана составят до ~4800 руб./год. Если предположить, что затраты  на обслуживание одного человека будут соответствовать 4200 руб./год (сестринская помощь, врачебный контроль и пр.), то общие расходы на реализацию проекта для одного ветерана могут быть сопоставимыми  с 10 тыс. руб./год.  Таким образом общие затраты на реализацию проекта «Здоровье и продолжительность жизни ветеранов Великой Отечественной Войны», проживающих в посёлке Кольцово, будут составлять ~120 тыс. руб./год. Надеюсь, мы сможем коллективно собрать необходимые средства для улучшения состояния здоровья наших ветеранов. Вклад каждого жителя посёлка на ближайший период  не будет превышать 12-15 рублей в год.Октябрь 2014 гПРИЛОЖЕНИЕ 20. Некоторые полезные статьи, не включённые в учебное пособие.Статья. Полимерные гелеобразующие системы в качестве основы косметических препаратовА.Н. ДецинаСоставы косметических средств, наряду с небольшим количеством биологически активных ингредиентов, как правило, включают значительные концентрации веществ, определяющих внешний вид и консистенцию готовых препаратов – кремы, сыворотки, желе, гели и т. д. Отметим также, что при обсуждении свойств косметических средств основной упор делается на характеристики биологически активных добавок. Может возникнуть ощущение, что вещества, создающие основу продуктов, в которой растворены или равномерно распределены (диспергированы) биологически активные вещества, являются нейтральными (скорее, балластными) ингредиентами. Как в действительности обстоит дело?  Попробуем разобраться в этом вопросе на примере косметических гелей.Основой гелеобразных продуктов являются полимерные системы, обладающие высоким сродством к воде и поэтому образующие устойчивые гели с содержанием воды около 95-98%. Такую основу следует рассматривать в качестве “действительно увлажняющей”. Необходимо также заметить, что небольшое количество полимерных молекул, которое необходимо для создания устойчивой гелеобразной системы с водой, из-за высокой молекулярной массы полимера распределяется по поверхности кожи в виде своеобразной объемной сеточки (“вуали”) и не проникает вглубь кожи. Такая сеточка притягивает влагу из воздуха, создавая легкий гидратирующий эффект. Кроме этого, образующаяся многослойная сеточка является, в достаточной степени, проницаемой для кислорода, углекислого газа и продуктов клеточного метаболизма, типа мочевины, то есть она не препятствует обменным процессам кожи с окружающей средой. Следует подчеркнуть, что самым «уязвимым местом» полимерных гелеобразных систем на основе высокомолекулярных полимеров является обязательное наличие небольших количеств исходных мономеров и низкомолекулярных олигомеров (димеры, триммеры и т.д.). Эти вещества всегда сопровождают образование полимерных систем, и избавиться от такого рода низкомолекулярных добавок практически невозможно. Если сам полимер с молекулярной массой более 100 тысяч молекулярных единиц практически не проникает через верхний роговой слой кожи, то его моно-, ди-, тримеры (олигомеры) могут легко преодолевать трансэпидермальный барьер [1, 2]. Рассмотрим с этих позиций некоторые гелеобразующие полимерные системы.Химически синтезированные полимерыПолимеры на основе акриловой кислотыДля широко распространенных в косметике гелеобразующих систем типа сополимеров акриловой кислоты с бутадиеном и другими полимерными системами определенную опасность для человека может представлять акриловая кислота. В соответствии с Техническими условиями [3] в полимере САКАП допускается ее содержание в количестве до 0,1%. Если учесть, что сам полимер обычно составляет 1-2% от массы геля (остальное Н2О), то конечная концентрация акриловой кислоты в геле не превышает 0,002%. Представляет ли акриловая кислота опасность для организма человека и для клеточных систем кожи?Токсичность акриловой кислоты и ее производныхОтмечена токсичность при вдыхании крысами воздуха, содержащего от 40 до 450 миллионных долей акриловой кислоты (от 0.004 до 0.045%), а также ее производных [4. 5]. Имеются сведения о том, что акриловая кислота и ее бутиловый эфир обладают некоторым канцерогенным потенциалом при хроническом нанесении их на кожу мышей. Однако, в ряде публикаций это наблюдение оспаривается на основании результатов исследований на культуре клеток фибробластов эмбриона сирийских хомячков (SHE cells) [6]. И, тем не менее, следует каким-то образом объяснить выводы, сделанные, например, авторами работ [7] и [8] о токсичности и канцерогенности акриловой кислоты и ее производных — мономеров для производства полимерных систем. Позднее [9] на клеточной системе L 5178g (клетки лимфомы мыши) были получены данные, свидетельствующие о том, что мономерные акрилаты и эфиры метакриловой кислоты проявляют генотоксичность (мутагенность). Интересное свидетельство воздействия акрилатов на организм приведено в работе [10]. При нанесении метилового эфира акриловой кислоты на кожный покров кроликов менялось содержание белковых фракций сыворотки крови животных. Кроме этого известно [11], что обработка животных (мыши и крысы) изооктил-акрилатом (5% в ацетоне) приводила  к дерматитам, гиперкератозам, эпидермальной гиперплазии, диффузному меланозу. Однако, ни мономер, ни полимер, полученный на его основе, не проявляли канцерогенность в условиях эксперимента.На наш взгляд, несмотря на «разброс» мнений, возможно связанный с использованием разных модельных систем, с определенной долей вероятности можно полагать, что сама акриловая кислота и ее производные представляют опасность для организма человека и для клеточных систем кожи.Таким образом, потребитель косметических средств, обнаруживший в перечне ингредиентов «любимого» препарата вещества на основе акриловой кислоты, имеет все основания перевести это косметическое средство в разряд «нелюбимых» и, даже, опасных.Поливиниловый спиртПоливиниловый спирт оказывает общетоксическое действие на организм животных в дозе 1/25 LD50  (LD50 – летальная доза). При длительном введении в дозах 1/400 и 1/200 LD50 полимер способен вызвать хроническое отравление. Кроме этого, он оказывает эмбриотоксическое действие в дозе 1/400 LD50 [12].В условиях эксперимента «in vitro» на мышиных фибробластах показано [13], что поливиниловый спирт влияет на клеточную систему более неблагоприятно по сравнению с полиметилметакрилатом, поливинилацетатом и другими полимерами.Как уже отмечалось выше, эти данные не могут быть отнесены непосредственно к высокомолекулярному поливиниловому спирту. Скорее они характеризуют свойства молекул мономера (и олигомеров), которые всегда присутствуют в полимерных системах. Мономерным фрагментом поливинилового спирта является виниловый спирт, который в нормальных условиях существует в виде уксусного альдегида.Токсическое действие уксусного альдегида хорошо изучено. В этом отношении он мало чем отличается от формальдегида, глутарового альдегида и других веществ этого класса, обычно проявляющих токсичность, канцерогенность и мутагенность.Таким образом, для потребителя косметических средств наличие в составе препарата  поливинилового спирта и его производных является сигналом особой опасности, какие бы при этом не представлялись сертификаты соответствия и прочие документы, подтверждающие безопасность. Полиэтиленоксиды и полиэтиленгликолиПолиэтиленоксиды и полиэтиленгликоли имеют близкое химическое строение. Различия заключаются в том, что полиэтиленоксиды получаются в результате полимеризации окиси этилена, а полиэтиленгликоли в процессе поликонденсации молекул этиленгликоля. Учитывая то обстоятельство, что окись этилена в воде легко раскрывает эпоксидный цикл, превращаясь в этиленгликоль, можно сделать заключение о тождественности этих полимерных систем.По данным, приведенным в работе [14], содержащийся в полиэтиленоксидах (полиэтиленгликолях) мономерный этиленгликоль при нанесении на кожу может проникнуть в кровь в концентрациях, которые в 30-110 раз ниже его сиюминутного содержания в организме человека. Этиленгликоль, также как глицерин, постоянно присутствует в организме человека, то есть является «эндогенным» веществом. А это значит, что данное вещество в концентрациях, сопоставимых с его постоянной концентрацией в организме, является нетоксичным, то есть, в организме существуют пути его безопасной утилизации.Существует технология дополнительной «сшивки» геля, содержащего от 1 до 4% полиэтиленоксида [15] (см. также [16]), включающая обработку растворов полиэтиленоксида 1500 ускоренными электронами. Получаемый при этом гель, кроме того, что он наиболее безопасен, обладает некоторыми уникальными свойствами. Под действием ускоренных электронов в результате образования межмолекулярных сшивок получается сетчатый многослойный полимер (в виде геля с водой), имеющий ячеистую структуру – ячейки типа А (определяют гидрофильность системы — сродство к воде) и Б (определяют сродство к жирам – липофильность). Наличие таких фрагментов в структуре геля определяет свойства системы в целом, которая, наряду с возможностью введения растворимых в воде добавок (соли, спирт, глицерин и т.п.), неплохо удерживает значительное количество липофильных систем (масла оливковое, кукурузное, абрикосовое и т.п.) [17] без добавления эмульгаторов.              С другой стороны, гель полиэтиленоксида, представляющий смесь воды и больших молекул сшитого или сетчатого полиэтиленоксида в достаточно низкой концентрации, при его использовании в качестве основы мазей и косметических препаратов не образует плотной пленки, которая могла бы препятствовать процессам дыхания и выделению продуктов клеточного метаболизма. Наличие в структуре геля свободной и связанной воды позволяет отнести гель полиэтиленоксида к «истинно увлажняющим кремовым основам».            Имеется, однако, одно обстоятельство, которое требует от разработчиков особого внимания.  Полимерные системы типа полиэтиленгликолей и полиэтиленоксидов, вне зависимости от способа получения и величины молекулярной массы, могут иметь заметное количество концевых альдегидных групп. Действительно, в геле полиэтиленоксида с помощью реакции с динитрофенилгидразином обнаружены карбонильные группы.На наш взгляд, наличие концевых альдегидных групп в высокополимерных системах, не способных к преодолению трансдермального барьера, не представляет опасности. Наоборот, альдегидные фрагменты, в силу высоких биоцидных свойств, могут оказывать  благоприятное воздействие, например, при лечении ожоговых ран и других видов нарушений кожного покрова, сопровождающихся развитием микрофлоры. В косметических препаратах альдегиды, связанные с высокополимерными молекулами, также не представляют особой опасности, так как единственным объектом их воздействия являются кератиновые чешуйки наружного слоя эпидермиса.            Однако сам гликолевый альдегид и его олигомеры, обладающие низкой молекулярной массой и, соответственно, высокой проникающей способностью, могут воздействовать на глубинные клеточные системы кожи. В этом случае, учитывая высокую реакционную способность альдегидов по отношению к биологическим полимерам, в косметологическом отношении ничего хорошего ждать не приходится.            Удивительно, что некоторые разработчики косметических препаратов продолжают упорно использовать параформ (источник формальдегида) и другие альдегиды в качестве консервантов [18].            Для решения вопроса о том, насколько безопасным является гель полиэтиленоксида в качестве основы косметических (медицинских) композиций, была проведена серия клинических испытаний на добровольцах.Из представленных на испытания 98 кремовых композиций, изготовленных на основе геля полиэтиленоксида (содержание геля от 31,7 до 87,8%), только для 5 препаратов наблюдалась легкая гиперемия опытных участков кожи. Причем, через 4 часа видимая реакция полностью исчезала. Через 24 часа никакой видимой реакции не наблюдалось: кожные покровы не изменили цвет; расчесов, мацерации и отека кожи не отмечалось. Через 48 часов у всех волонтеров картина не изменилась. Препараты продолжали наносить в течение 30 дней с выдержкой 4 часа. После завершения этого этапа на другую (нейтральную) руку наносили разрешающую дозу этой же композиции с контролем через 4 часа и через сутки. Каких-либо видимых реакций на коже волонтеров не наблюдалось. Следует подчеркнуть, что составы 5 препаратов, для которых отмечено проявление легкой гиперемии специально разрабатывались для усиленного воздействия на капиллярные сосуды, расположенные в дерме кожи, с целью обеспечения притока плазмы к базальным клеткам эпидермиса — гиперосмотические композиции.Приведенные данные указывают на то, что гель полиэтиленоксида (основа всех изученных препаратов), очевидно, является нейтральным для кожи.Дополнительные исследования исходного геля полиэтиленоксида, проведенные на добровольцах, подтверждают этот вывод. в свое время гелю полиэтиленоксида присвоена временная фармакопейная статья [19]. Его производство в соответствии с ТУ (технические условия) в течении нескольких лет осуществлялось в Новосибирске на территории Новосибирского завода химконцентратов. Насколько нам стало  известно, единственная в мире действующая установка по производству наиболее приемлемого для косметических средств — безопасного для человека геля законсервирована по требованию Роспотребнадзора. Если её не возродить, то производство экологически безопасной косметической продукции  будет остановлено. Полисилоксаны, органо-модифицированные силиконовые полимерыПрименение органо-модифицированных силиконовых полимеров (ОМСП) в косметике имеет свою историю, отражаемую в ряде обзорных работ и монографий (см., например, [20]). Полагают, что силиконовые полимеры абсолютно нетоксичны, не вызывают раздражения и безопасны для применения во всех средствах личной гигиены и являются косметическими ингредиентами, включенными в список безопасных к использованию веществ, утвержденный комиссией по контролю косметических ингредиентов [21].Мономерными фрагментами ОМСП могут являться следующие структуры: (СН3)3SiOH;  (CH3)2Si(OH)2;      (CH3)2SiCl(OH)      и т.д.       I                               II                             III В работе [22] были проверены шесть органосиликоновых соединений для оценки предполагаемой кластогенной активности на крысах. Оказалось, что триметилсиланол (I) при высоких дозах заметно увеличивает хромосомные абберации по сравнению с контролем. Наряду с этим,  отмечается [23]  отсутствие надежных данных, подтверждающих, что жидкий диметилполисилоксан является подходящим материалом для пластических хирургических операций в области головы и шеи.Несмотря на бурное развитие химии ОМСП и их использование в косметической промышленности, необходимо подчеркнуть их слабую изученность на предмет безопасности как на уровне организма животных, так и на уровне клеточных ntcn-систем, моделирующих клеточные системы кожи.В свое время нам пришлось столкнуться с проблемой выбора гелевой основы из нескольких образцов кремнийорганических полимеров. Результаты проведенных экспериментов с использованием клеточной тест-системы и модельного вирусного штамма представлены в протокольном вариантеПРОТОКОЛоб испытаниях образцов кремнийорганических полимеровИспытания проводились с использованием клеточной тест-системы Vero (перевиваемая культура клеток почки зеленой мартышки) и вируса осповакцины мыши в планшетном варианте.Образцы, полученные от фирмы  ООО «НПК Пента», смешивались с этиловым спиртом (96%) в объемном соотношении 1:9 (~10%). Полученные образцы для оценки биологического действия вводились в питательную среду над сформированным монослоем клеток (в присутствии и без присутствия вирусных частиц). В качестве параметров биологического действия использовались величины:- TC50 — цитопатическая активность, характеризующая концентрацию испытуемого образца в питательной среде, которая приводит к уничтожению клеточной популяции на 50%;-  IC50 — противовирусная активность, характеризующая концентрацию испытуемого образца, при которой осуществляется защита клеток от вируса на 50%. Результаты исследования представлены в следующей таблице.

Шифры образцов №образцов TC50 R^2 IC50 TC50/ IC50
Д4-55/А 1 0.30 1.00 не активен
Д4-55/Б 2 0.28 0.999 заметная активность от 0.05 до 0.2 (защита на 33%) 1.4
Д4-55/В 3 ~5 0.996 заметная активность от 0.1 до 1.0 (защита на 35%) ~5

Приведенные результаты свидетельствуют о том, что:- образцы №1 и №2 обладают высокой цитотоксичностью, так как в пересчете на чистые препараты их концентрации, которые приводят к 50%-ному уничтожению клеточной системы, не превышают 0.03% (TC50 / 10), поэтому целесообразность их использования в косметических средствах можно поставить под сомнение;- образцы №2 и №3 обладают некоторой противовирусной активностью, защищая клетки от повреждающего действия вируса примерно на 33-35% — судя по величине соотношения TC50/IC50  это обстоятельство может иметь некоторое практическое значение  в случае образца №3; можно полагать, что препарат весьма перспективен как для применения в производстве косметической продукции, так и медицинских средств специального назначения. Имеются соображения о возможных причинах наблюдаемой цитотоксичности образцов №№ 1,2. Их проверка требует  проведения дополнительных экспериментов.В заключение следует отметить, что мы воспользовались полученной информацией для разработки составов защитных кремовых композиций (для рук) и массажного крема. «Молочный-Si2» Представители фирмы — поставщика не проявили интереса к полученным результатам – отклик отсутствует. ПоливинилпирролидонМономерным фрагментом этого полимера является N-алкил-2-пирролидон, который легко раскрывает цикл, превращаясь в N-алкил производное гамма-аминомасляной кислоты. Эти вещества на системе ТА104 (сальмонелла/микросомный тест) проявляют мутагенный эффект, не зависимый от дозы [24]. Известно также, что токсичность N-алкил-2-пирролидонов зависит от алкильной группы [25].Природные гелеобразующие системыПрактически все известные природные полимеры, способные набухать в воде, образуя геле- и желеподобные системы, представлены полисахаридами или их производными. Рассмотрим биологическую активность такого рода соединений. К сожалению, сведения о биологической активности их мономерных фрагментов (сахара, аминосахара и т.д.) чрезвычайно бедны.Следует также помнить о том, что в природных гелеобразующих системах могут присутствовать также и биологически активные низкомолекулярные вещества, не являющиеся мелкими фрагментами (олигомерами) основной полимерной системы.Алоэ вера гельОсновным углеводным фрагментом Алоэ вера геля является ацеманнан, для которого известна активация мышиных макрофагов и усиление синтеза интерлейкинов [26], антивирусная активность, связанная с иммунным механизмом действия [27]. Эти обстоятельства позволяют полагать, что Алоэ вера гель и/или его мономерная углеводная фракция (ацеманнан) будут способствовать делению клеток кожи, провоцируя воспалительный процесс. Это подтверждается рядом работ (см., например, [28]). Весь вопрос в том, хорошо это или плохо? А, если хорошо, то в каких случаях?КаррагинаныИзвестно, что фрагменты молекулы каррагинана при введении их крысам в течение 24 месяцев в качестве добавок к пище способствуют образованию карцином, аденокарцином, аденом. У некоторых животных наблюдались метастазы в региональных лимфатических узлах [29]. Аналогичные данные по гидролизату каррагинана были получены в более поздней работе [30] на монослое эпителиальных клеток. Отмечается также [31] потенциальная опасность каррагинанов. Авторы работы [32] показали, что существенную роль в биологической активности каррагинанов может играть температура. Так, если растворение полимера проводить при температуре 400С, то такой раствор оказывается токсичным для клеток ретикулоэндотелиальной системы с одновременным усилением работы макрофагов. Если же растворение проводить при 20С, то наблюдается снижение токсичности. Имеются сведения о том, что каррагинаны индуцируют воспалительные процессы и влияют на митотическую активность и кератинизацию эпителиальных клеток [33]. Таким образом, наряду с обнаруженной токсичностью, в случае каррагинанов вопросы, связанные с проявлением (польза или вред?) воспалительных процессов в косметологии, сохраняются.ХитозаныМономерным фрагментом хитозанов являются 2-ацетамидо-2-дезокси-Д-глюкоза (N-ацетилглюкозоамин). Очевидно, именно такого рода низкомолекулярные вещества определяют биологическую активность хитозанов, наносимых на здоровую кожу. В специальных исследованиях, проведенных в Научно-исследовательском конструкторском технологическом институте биологически активных веществ – НИКТИ БАВ (ГНЦ ВБ «Вектор»), показана способность образцов хитозана, полученных из панцирей крабов и нанесенных на поверхность здоровой кожи, провоцировать подкожный воспалительный процесс. Таким образом, можно полагать, что и в этом случае низкомолекулярные фрагменты хитозана способны проникать вглубь кожи, активировать работу макрофагов, которые, в свою очередь, выбрасывая в окружающую среду интерлейкины и разнообразные факторы роста, могут стимулировать деление клеток кожи. Такая стимуляция всегда сопровождает воспалительные процессы. И, конечно, её нужно разумно использовать при разработке косметических средств.Гиалуроновая кислотаЯвляясь природным мукополисахаридом, молекула гиалуроновой кислоты состоит из чередующихся фрагментов D-глюкуроновой кислоты и N-ацетил-D-глюкозамина. Такая полимерная система образует устойчивый гель с водой. Это обстоятельство в первую очередь определяет влажность кожи животных, так как гель гиалуроновой кислоты пронизывает все слои кожи, заполняя межклеточное пространство. Возможно, гиалуроновая кислота входит в состав рогового слоя эпидермиса (см., например, [35]) и, очевидно, поэтому следует предположить ее присутствие в блестящем слое. Имеются сведения о том, что гиалуроновая кислота, как и ее аналоги — природные гелеобразующие системы, при введении в составы косметических средств стимулирует деление и дифференцировку клеток кожи [36]. Можно с уверенностью полагать, что причиной ускорения клеточного деления, как и во всех предыдущих случаях, является присутствие в препарате гиалуроновой кислоты в качестве примесей низкомолекулярных веществ, способных преодолевать трансэпидермальный барьер. К сожалению, в литературе отсутствуют сведения о строении этих примесей. Учитывая, что сырьем для производства  гиалуроновой кислоты могут быть различные продукты животного происхождения, а производители могут применять отличающиеся системы очистки целевого продукта, то и состав примесей может отличаться от одной партии к другой. Значит, и ожидаемые эффекты могут варьировать в значительной степени.Таким образом, все перечисленные выше природные гелеобразующие полимерные системы обладают способностью стимулировать клеточное деление, которым обычно сопровождается любой воспалительный процесс. В соответствии с представлениями о формировании эпидермиса, в зависимости от возраста можно полагать, что наиболее приемлемым использованием такого рода систем является введение их в составы косметических средств для лиц старше 30-35 лет. Это связано, в первую очередь, с тем обстоятельством, что именно в таком возрасте начинается постепенное снижение уровня гормонов в крови человека, вызывающее снижение скорости деления базальных клеток эпидермиса (гормональная недостаточность с наложением гемодинамической недостаточности), и, в качестве следствия, увеличивается  толщина рогового слоя эпидермиса с одновременным увеличением вероятности фиксирования мелких морщин и т.д. Низкомолекулярные компоненты природных гелеобразующих систем в определенной степени могут  компенсировать этот неблагоприятный процесс.С другой стороны, на наш взгляд, представляется нецелесообразным и, даже, опасным использование природных гелеобразующих систем в косметических средствах, предназначенных для молодежи, так как проблемы кожи в этом возрасте, наоборот, связаны с увеличением концентрации гормонов (гормональный взрыв), вызывающим ускоренное деление клеток и, тем самым, нарушающим равновесные процессы формирования эпидермиса. Включение природных полимеров в составы косметических средств для молодежи может только усилить скорость клеточного деления и обострить проблемы кожи, наблюдаемые в возрасте 10-15¸20-25 лет.К сожалению, ни одна из фирм – производителей косметических средств, использующих перечисленные выше  природные полимеры в качестве гелеобразующих ингредиентов, не подчеркивает возрастные ограничения в использовании такого рода препаратов. Возможно, разработчики не подозревают о существовании  ограничений подобного рода.  Об этом, действительно, можно только сожалеть. А молодым потребителям косметических средств (до 20-25 лет) необходимо исключать из своего арсенала препараты, содержащие алоэ вера гель, каррагинаны, хитозан и гиалуроновую кислоту. Лучше отдать их своим родителям или старшим подругам (кому уже за 30-35 лет). Также для любого возраста потребителей можно ставить под сомнение использование гелей на основе полиакрилатов и поливинилового спирта, мономеры которых представляют определённую опасность для клеточных систем кожи и организма человека. Надеюсь, что приведенные в статье данные позволят потребителям осознано подходить к выбору косметических средств.Л И Т Е Р А Т У Р А1. . Децина А.Н. Тнория мягких косметологических воздействий. Современная косметология», Новосибирск, 2001, с.505);2. Potts R.O., Guy R.H., Pharmaceutical Res., 1995, 2 P. 1628-1633;        3. ТУ 6-02-1118-88, САКАП;Klimisch H.J., Hellwiy J. «The prenatal inhalation toxicity of acrylic acid in rats». Fundament. Appl. Toxikol., 1991, 16 (4), 656-666;Vodicka P., Gut J., Frantik E. «Effekt inhaled acrylic acid derivatives in rats». Toxicology, 1990, 65 (1-2) 209-221;Wiegand H.J., Schiffman D., Henschler D., «Non-genotoxicity of acrylic acid and n-butyl akrylate in a mammalian cell system (SHE cells)». Arch. Toxicol. 1989, 63 (3) 250-251;Segal A., Fedyk J., Melchionne S., Seidman I. «The isolation and characterization of 2-carboxyethyl adducts following in vitro reaction of acrylic acid with calf thymus DNA and bioassay of acrylic acid in famale Hsd: (JCR) Br mice» Chem. Biol. Juteract. 1987 61 (2), 189-97;Autian J. «Structure-toxicity relatiouships of acrylic monomers» Environ. Health. Perspect. 1979 11, 141-52;Moore M.M., Amtower A.Doerr C.L. et al. «Genotoxicity of acrylic acid, methyl acrylate, ethil acrylate, methy methacrylate and ethil methacrylate in L5178¡ mouse lymphoma cells». Environ. Mol. Mutagen. 1988, 11 (1), 49-63;Суворов А.П. «Изменение содержания белковых фракций сыворотки крови кроликов при нанесении им на кожный покров метилового эфира акриловой кислоты». Фармакол. — Токсикол., 1969, 32 (1) 105-7;Gordon S.C., Zimmerman D.D., Griffith F.D. «Acute toxicity, genotoxicity and dermal carcinogenicity asseessment of isooctylakrylate», J.Toxikol. Environ. Health, 1991, 34 (3) 297-308;Вишемирская Л.Д., Долошицкий С.Л. и др. «Изучение токсичности и отдаленных последствий действия поливинилового спирта марки 18/11» Гиг. Санит. 1988 (9) 83-4;Hisada T. «The adhesion of culture cells to some polymer (invitro)», Shira rirogaku zasshi, 1976, 17 (38) 91-101;         14. Filser J.G., Kreuzer P.E. et al., Arch. Toxicol., 1994, 68, №7, p. 401-405;       15. Децина А.Н. «Способ получения косметического средства для ухода за кожей на основе геля полиэтиленоксида» Пат. РФ №2072834(1995);16..Богданова Л.А., Гончар А.М. и др.»Гель для кожи рук» Пат.РФ №2061468 (1993);17. Децина А.Н. «Способ получения косметического средства в виде эмульсии» Пат. РФ №2126247 (1998);18. Flyvholm M.A., Andersen P., Amer. J. Iud Med., 1993, 24. №5, p. 533-552;19.»Гель полиэтиленоксида 1500″ ВФС 42-3017-97 от 31.03.98г., регистрационное удостоверение №98/95/9;20. Floyd D. «Cosmetic and Pharmaceutical Applications of Polymers», Gebelein G., Ed: 49 Plenum, New-York, 1991; Д.Флойд,  Дженни, Х.Лайдрайтер «Органо-модифицированные силиконовые полимеры в средствах личной гигиены», Косметика и медицина №6, 22-32(1998); Д.Флойд, А.Хоу «Алкилмодифицированные силиконы в косметических рецептурах», Косметика и медицина №2-3, 22-32(1999);21. Final report of the safety assessment for Dimethicone Copolyol, prepared by the Expert Panel of the Cosmetic Ingredient Review. April 1981;22. Isguitth A., Sesinski R., Matheson D., «Genotoxicity studies on seleckted orgsnosilicon courpounds: in vivo assays», Food.Chem.Toxicol. 1988, 26(3)263-6;23. Pitanguy J., Mayer B. et  ., «Uberlegungen zur Anwendung von flussigem Dimethilpolysiloxan in der plastischen Kopf-und Halschirurgie», Laryngol. Phinol. Otol. Stuttg., 1988, 67(2)72-5;24. Wells D.A., Thomas H.F., Digenis G.A. «Mutagenicity and cutoxicity of N-methyl-2-purrolidinone and 4-(methylamino)butanois acid in Salmonella (microsome assay», J. Appl. Toxicol., 1988, 8(2) 135-9;25. Ansell J.M., Fowler J.A., «The acute oral toxicity and primary ocular and dermal irritation of selected N-alkyl-2-pyrrolidones», Food. Chem. Toxicol., 1988, 24(5) 475-9;26.Zhang L., Tizard J.R., «Activation of a mouse macrophage cell line by acemannan: The major carbohydrate fraction from Aloe vera gel», Immunopharmacology, 1996, 35(2) 119-28;27. Womble D., Helderman J.N., «The impact of acemannan on the generation and function of cytotoxic T-lymphocy » Immunopharmacol. Immunotoxicol., 1992, 14(1-2) 63-77;28. Danhoff, Mc Analley «Stabilized Aloe Vera: effect on human skin gells». Drug Cosm. Jnd., 1983, 52(54) 105-106;29.Ashi K.W., Inagaki T.et al. «Induction by degraded carrageenan of colorectal tumors in rats», Cancer Zett. 1978, 4(3)171-6;30. Ling K.Y., Bhalla D., H llander D. «Mechanisms of carrageenan injuru of JEC18 small intestinal epithelial cell monolayers», Gastroenterology, 1988, 95(6)1487-95;31. Marcus R., Watt J. «Potential hazards of carrageenan»; Lancet., 1980, 1(8168 Pt1)602-3;32. Butts J.D., Rehm S.R. «The effect of heating on the functional of iota-carrageenan», J.Pharmacol. Methods, 1985, 13(1)53-7;33. «Carrageenan-induced inflamation and its effects on mitotic activity and keratinization of gingival epithelium. A histologic and autoradiographic  study.»;34. Ж.-М.Сеньоре «Гиалуроновая кислота в коже и косметике», Косметика и медицина №5, 11-17(1998);35. Костина Г., Радаева И. «Использование гиалуроновой кислоты в медицине и косметологии», Косметика и медицина №2-3, 53-57 (1999). Статья. Регенерирующие косметические композиции, включающие сперму животныхА.Н. Децина, На наш взгяд, существует явная неопределенность в использовании термина «регенерирующий» применительно к косметическим препаратам. Наиболее часто, это определение сопровождает кремы, содержащие, некоторые витамины (например, А  и\или Е ).  Действительно,  витамины такого типа необходимы для функционирования клеточных систем кожи. Их отсутствие или недостаток обязательно ведут к угнетению клеточного деления, увеличению перекисного окисления липидов, продуцирующего высокореакционноспособные частицы (малоновый диальдегид, перекиси, свободные радикалы), которые участвуют в модификации и инактивации биологически активных фрагментов клеток (белки, пептиды, нуклеиновые кислоты и т. д.) . Поэтому введение в кремовые композиции витаминов А и Е (в условиях их дефицита  в коже)  и обработка кожи такими препаратами ведет к нормализации функционирования клеточных систем. Однако аналогичное действие в условиях дефицита  могут проявлять и другие компоненты кремовых композиций. Известно, например, что неблагоприятное влияние на клеточные системы оказывает недостаток макро- и микроэлементов (К, Са, Mg, Fe, Cu, Zn и т.д.), углеводов типа глюкозы, липидов, аминокислот и т.п. Из многочисленных данных, полученных в результате становления клеточной биотехнологии, со всей очевидностью следует вывод о том, что перечисленные выше компоненты косметических композициий входят в составы питательных сред для культивирования клеток вне организма (в том числе и клеток человека). Однако, можно приготовить самую богатую в питательном отношении среду, содержащую весь набор аминокислот, витаминов  (включая А и Е), макро- и микроэлементов, глюкозу и другие подобные вещества, и не достичь нужного эффекта — клетки размножаться не будут. Только введение в составы питательных сред сыворотки крови животных, гемолимфы насекомых или индивидуальных гормоноподобных веществ (бессывороточные среды) позволяет «включить» механизм деления клеток.Таким образом, для деления клеток необходимо, но недостаточно, наличие питательных веществ и витаминов. А, вот, сыворотка крови животных и гемолимфа, используемая обычно для культивирования клеток насекомых, содержат гормоноподобные вещества (факторы роста), стимулирующие клеточное деление.Рассмотрим, зачем, собственно, применительно к задачам косметологии, ускорять процесс деления клеток?Напомним о том, как формируется верхний слой кожи — эпидермис, который отделен от дермы многослойной сетчатой мембраной, состоящей из переплетенных пучков коллагеновых нитей. Плазма крови из капиляров (концевых петелек), расположенных в дерме непосредственно под мембраной, легко проникает через нее и омывает нижние клетки эпидермиса — базальный слой, поставляя клеткам питательные субстраты, витамины, гормоны и гормоноподобные вещетсва, без которых невозможно размножение клеток. В результате деления клеток, составляющих плотно упакованный базальный слой, одна из вновь появившихся двух клеток вынужденно выталкивается во второй слой, затем в третий и т.д., постепенно уплощаясь и превращаясь в кератиновую чешуйку, которая примерно через четыре недели отшелушивается. Для полноты описания формирования эпидермиса следует заметить. что кератнизация — процесс превращения клетки в кератиновую (роговую) чешуйку, в первую очередь, зависит от внешних факторов (кислород воздуха, экологические нечистоты и т.д). Об этом свидетельствует тот факт, что кожа новорожденного ребенка имеет полностью сформированный эпидермис, в котором, однако, практически отсутствуют ороговевшие кератиновые чешуйки. И только через несколько месяцев кислород воздуха, ванны с отварами растений, обладающих дубящим действием, и с растворами «марганцовки» (сильное окислительное действие) завершают образование полноценного защитного рогового слоя эпидермиса.Таким образом, формирование эпидермиса осуществляется посредством реализации трех процессов, находящихся в равновесии:1) поставка клеток из базального слоя эпидермиса вверх;2) кератинизация измененных (уплощенных) клеток, осуществляемая, в основном, под действием внешних факторов и направленная сверху вглубь эпидермиса;3) отшелушивание роговых пластинок с поверхности кожи.В норме на поверхности кожи (за исключением подошвы и ладоней) находятся 5-6 тонких слоев кератиновых чешуек прочно сцепленных (склеенных) между собой посредством липидных фрагментов, окружающих кератиновую чешуйку и образующих тонкие извилистые каналы, способные пропускать низкомолекулярные вещества и защищать от проникновения вирусов, спор и бактерий внутрь кожи.С возрастом, обычно после 30-35 лет, начинается заметное снижение содержания некоторых гормонов в крови человека. Так, например (см [1]), суммарное количество эстрогенов в период менопаузы снижается по сравнению с усредненными значениями в норме (фолликулярная, лютеанизирующая фазы и середина цикла) примерно в 13 раз,                       17-экстрадиола — приблизительно в 8 раз и дегидроэпиандростерона — ориентировочно в 5 раз. В то же время, содержание лютеанизирующего гормона практически не меняется при переходе от нормы к менопаузе, а количество фолликулостимулирующего гормона возможо даже повышается. Более точные оценки затруднены из-за большого разброса и неопределенности отдельных результатов измерений.Существенное уменьшение содержания основных гормонов и гормоноподобных веществ в плазме, естественно, приводит к снижению скорости деления клеток базального слоя эпидермиса и, тем самым, к нарушению равновесия процессов, формирующих верхний слой кожи (см. выше). В результате увеличивается толщина рогового слоя. Вследствие этого, вместо 5-6 слоев кератиновых чешуек появляется 7-8 и более слоев, что ведет к снижению эластичности кожи и увеличивает вероятность фиксации морщин.Отметим, что наблюдаемые после 30-35 лет неблагоприятные изменения в состоянии кожного покрова являются следствием снижения концентрации гормонов в крови (причина 1-го порядка) и, связанного с этим, снижением скорости деления базальных клеток эпидермиса (причина 2-го порядка). Причинами 1-го порядка должна заниматься (и занимается) медицина используя подход, называемый гормональной заместительной терапией. Причина 2-го порядка является объектом воздействия косметологов. И, вот, здесь незаменимым средством для увеличения скорости деления базальных клеток, необходимого для восстановления (регенерации) равновесного процесса формирования эпидермиса, оказываются полезными биологические добавки животного происхождения, содержащие гормоны и гормоноподобные вещества (факторы роста).Кроме сыворотки крови животных и гемолимфы (гомогената) насекомых [2]  к добавкам, обладающим регенерирующим действием, следует отнести сперму (гонады) животных [3, 4], гомогенаты развивающихся эмбрионов [5], «кондиционированные» питательные среды [6] и т.п. Список регенерирующих добавок к косметическим препаратам постоянно пополняется. Поэтому, на наш взгляд, пора ответить на ключевые вопросы, возникающие при рассмотрении косметических композиций нового поколения, обладающих не только питательным, витаминизирующим и антиоксидантным, но и, соответственно, регенерирующим действием.Так, например, необходимо понять — не окажется ли вредным воздействие гормонов и гормоноподобных веществ на организм? Какие дозы кремовых композиций потребуются для существенного изменения гормонального пула в крови человека?Среди перечисленных выше регенерирующих добавок к косметическим препаратам наиболее изученной является сперма животных, в составе которой содержится разнообразные гормоны и гормоноподобные веществ.Проведем сопоставление содержания такого рода веществ в сперме животных и в крови человека и расчитаем дозу косметического препарата (количество непрерывных обработок), необходимую для увеличения концентрации биологически активного вещества в крови человека на 50%. При этом были приняты во внимание следующие соображения:- варьирование значений концентраций веществ для одной группы испытуемых (мужчин или женщин) часто превышало принятое нами существенное отклонение (50%) в 5 раз и более;- количество крови в организме человека принято равным 6000 мл;- в качестве максимальной принимаем концентрацию спермы в кремах, равную 5%, в то время как количество спермы в косметических композициях усиленного действия (для возраста 40-45 лет и старше) составляет 3%, в обычных профилактических кремах (для возраста 30-35 лет и старше) — менее 1%;- максимальное количество наносимого крема не превышает величину 5 г (обычно 0,5 — 1 г);- допускаем, что биологически активные вещества, содержащиеся в косметической  композиции, преодолевают трансдермальный барьер и полностью попадают в кровь (хотя это абсолютно не очевидно).В представленной таблице приведены литературные данные по максимальному содержанию гормонов и гормоноподобных веществ в сперме животных (усредненные данные, так как состав гормонов в сперме различных видов животных сходен, а концентрация каждого гормона имеет один и тот же порядок величин [7]) и в крови человека [1], а также результаты расчетов количества последовательных обработок кожи (N50), необходимых для увеличения содержания гормонов  в крови человека на 50% по отношению к среднему значению, по формулам:                  (Ссmax   0,05) 5 мл)Ск = ——————————- = Ссmax   4.16 10-5                         6000 мл                                         Cк  0,5(2)                    N50 = ——————- ,                                           Ск где Ск  — увеличение концентрации гормонов в крови после одной обработки кожи кремом в количестве 5 мл, содержащим 5% спермы животных (доля — 0,05). Таблица. Сопоставление содержания гормонов и гормоноподобных веществ в сперме животных, в крови человека и оценка возможного влияния на кровь кремовых композиций, содержащих сперму животных.

  Наименование Максимальное содержание в сперме животных,Ссmax(разброс значений) Среднее значение концентрации в крови человека,                   _   Cк(разброс значений) Количество последовательных обработок кожи кремом, необходимых для увеличения содержания БАВ в крови человека на 50%N50   Литература,[   ]
1 2 3 4 5
Эстроген 0,89 нг/мл* Мужчины0,075 нг/мл(0,04 — 0,11)  1013 1,8
ЖенщиныФолликулярная фаза0,0225 нг/мл(0,06 — 0,39)    3040
1 2 3 4 5
середина цикла0, 275 нг/мл(0,12 — 0,43)  3716
лютеиновая фаза0,255(0,16 — 0,35)  3445
Беременность
1-2 недели4,7 нг/мл(0,7 — 8,7)  63513
36-42 недели19,5 нг/мл(8 — 31)  263517
Менопауза< 0,04 нг/мл**  240
Тестостерон(свободный) 111 пг/мл(84,8 — 111) Мужчины79 пг/мл(56 — 102)  8554 1,9
Женщины3,1 пг/мл(2,4 — 3,8)  336
190 пг/мл* Мужчины79 пг/мл(56 — 102)  4997 1,10
Женщины3,1 пг/мл(2,4 — 3,8)  196
Тестостерон (общий) 1240 пг/мл(200 — 1240) Мужчины7500 пг/мл(3000 — 12000)  72697 12,11
Женщины750 пг/мл(300 — 1200)  7270
Дегидроэпиан-дростерон 9,3 нг/мл(2,7 — 9,3) 2,5 нг/мл(1 — 4) 3231 1,13
Андростендион 0,32 нг/мл(0,18 — 0,32) Мужчины 1,07 нг/мл(0,82 — 1,32)  40189 1,9
Женщины1,51 нг/мл(1,13 — 1,89)  56716
0,47 нг/мл* Мужчины1,07 нг/мл(0,82 — 1,31)  27363 1,10
Женщины1,51 нг/мл(1,13 — 1,89)  38615
Дегидро-тестостерон 0,41 нг/мл(0,23 — 0,41) Мужчины 0,575 нг/мл(0,3 — 0,85)  16856 1,9
Женщины0,13 нг/мл(0,04 — 0,22)  3810

 

1 2 3 4 5
 0,95 нг/мл  Мужчины0,575 нг/мл(0,3 — 0,85)   7275  1,10
Женщины0,13 нг/мл(0,04 — 0,22)  1645
Прогестерон 0,56 нг/мл(0,41 — 0,56) Мужчины0,21 нг/мл(0,12 — 0,3)  4507 1,9
Женщины
Фолликулярная фаза0,46 нг/мл(0,02 — 0,9)   9873
Лютеиновая фаза18,0 нг/мл(6,0 — 30,0)  386332
Менопауза1,515(0,03 — 3,0)  32516
17 — Эстрадиол 36,5 пг/мл* Мужчины22 пг/мл(8-36)  7244 1,10
Женщины
фолликулярная фаза50 пг/мл(10-90)  16465
середина цикла300 нг/мл(100-500)  98788
лютеиновая фаза145 пг/мл(50-240)  47748
менопауза20 пг/мл(10-30)  7242
Дегидро-эпиандростеронсульфат 1,04 мкмоль/л мужчины6,95 мкмоль/л(5,2 — 8,7)Женщиныдо менопаузы5,45 мкмоль/л(2,1 — 8,8)к моменту родов1,8 мкмоль/л(0,6 — 3,0)в период менопаузы0,95 мкмоль/л(0,3 — 1,6)  80321   62985  20802  10979 1,14

 

1 2 3 4 5
Фолликулости-мулирующий гормон 4,4 мЕД/мл* Мужчины14,5 мЕД/мл(4 — 25)Женщиныдо менопаузы17,0 мЕД/мл(4 — 30)середина цикла50 мЕД/мл(10-90)беременность -низкие неопределяемые значенияменопауза127 мЕД/мл(4 — 250)  39609   46438  136582      346919 1,15
Лютеинизи-рующий гормон 69 мЕД/мл(18-69) Мужчины14,5 мЕД/мл(6-23)  2526 1,16
Женщины
фолликулярная фаза17,5 мЕД/мл(5-30)  3048
середина цикла112,5 мЕД/мл(75-150)  19597
лютеиновая фаза21,5 мЕД/мл(3-40)  3745
менопауза46,5 мЕД/мл(13-80)  8100
Хорионический гонадотропин 7,8 нг/мл Мужчины< 0,6 нг/мл**  462 1,17
Женщины не беременные< 0,6 нг/мл**   462
беременность7-10 дней 0,6 нг/мл   924
30 дней510 нг/мл(20-1000)  785872
10 недель19000 нг/мл(10000-28000)  29277613
> 16 недель6000 нг/мл(2000 — 10000)  9245562

 

1 2 3 4 5
Пролактин 38 нг/мл(8,5 — 38) Мужчины5,1 нг/мл  1613 1,18
Женщины
фолликулярная фаза7,05 нг/мл(1,1 — 13)  2230
лютеиновая фаза22,5 нг/мл(5-40)  7117
беременность12 недель28,5 нг/мл(8 — 49)   9014
12 — 28 недель71 нг/мл(9 — 133)  22457
20 — 40 недель89,5 нг/мл(21 — 158)  28308
Проста-гландины Е(суммарно) Сперма быка0,6 мкг/мл 70 мкг/мл(2 — 272) 1402243 19,20
Сперма барана23,3 мкг/мл(11 — 23,3) 70 мкг/мл(2 — 272) 36109 19,21
Проста-гландины F(суммарно) Сперма кролика5,9 мкг/мл* 4,05 мкг/мл(2,1 — 6,0) 8250 19,22
Сперма быка0,2 мкг/мл* 4,05 мкг/мл(2,1 — 6,0) 243389 19,20
Инсулин 60,9 мкЕД/мл(30,7 — 60,9) 15,0 мкЕД/мл(6 — 24) 2960 23

*) Средние значения.**) При расчете N50 использовали величину, уменьшенную в два раза. Представленные в таблице данные свидетельствуют о том, что только концентрация свободного тестостерона в сыворотке крови женщин требует ограничения использования косметических препаратов, содержащих 5% спермы животных, до 196 непрерывных нанесений. При этом следует учитывать то обстоятельство, что содержание общего тестостерона в сыворотке крови женщин более, чем в 200 раз выше содержания свободного. Это дает основание полагать, что концентрация свободного тестостерона вряд ли может служить лимитирующим фактором для определения продолжительности непрерывного применения косметических композиций, приготовленных с добавлением спермы животных.Другое значение последовательных непрерывных нанесений крема, содержащего 5% спермы животных, которое могло бы служить ориентиром для ограничений, относится к общему содержанию эстрогенов в сыворотке крови женщин в период менопаузы (оценочно N50  270). Эта величина может повысить уровень эстрогенов на 50%. Однако, если учитывать содержание гормонов в детородный период и, тем более, в состоянии беременности, то для достижения 50%-ных изменений требуется увеличить этот расчетный параметр в десятки и, даже, в тысячи раз. Более того, в соответствии с практикой гормональной заместительной терапии (см., например, [13]), можно полагать, что достигаемое за счет использования крема в период менопаузы увеличение концентрации эстрогенов в крови будет иметь положительный эффект не только на кожу, но и на внутренние органы женщин.Во всех остальных случаях проведеное нами сопоставление содержания ряда гормонов и гормоноподобных веществ в сперме животных и в сыворотке крови человека свидетельствует о возможности использования такого рода препаратов в течение года и более, включая и периоды беременности женщин. У нас нет сомнений и в том, что регенерирующие косметические композиции, включающие сперму животных, будут оказывать благоприятное воздействие на один из самых важных процессов, отражающийся на состоянии человеческой кожи — равновесный процесс формирования эпидермиса (см. выше).Естественно, следует помнить о том, что гормональный пул сыворотки крови человека и спермы животных не ограничивается представленными в таблице соединениями. Однако, к сожалению, мы не обнаружили в литературе данных по содержанию других гормонов, присутствующих и в сыворотке крови человека, и в сперме животных для попарного сопоставления. К настоящему времени также отсутствуют данные о содержании гормонов в сперме петуха, в сперме серых морских ежей, гонадах морских гребешков, уже исполоьзуемых в косметических препаратах.Следует подчеркнуть еще одно важное обстоятельство, связанное с опасностью переноса некоторых заболеваний от донора спермы на потребителя косметики через поврежденные кожные покровы. Сперма животных не может быть очищена, например, от вирусных частиц, без существенной потери ее качества. Поэтому производители косметических средств обязаны проводить аттестацию спермы на отсутствие многочисленных вирусов и бактерий или брать в качестве доноров спермы заведомо здоровых животных с учетом возможных инкубационных периодов развития инфекций. Это накладывает также определенные требования на содержание животных-доноров. С учетом вышеизложенного привлекательным выглядит способ снижения вероятности перекрестных заболеваний (животное — человек) за счет использования животных-доноров спермы, далеко отстоящих от человека по эволюционной лестнице. Действительно, серые морские ежи  (Strongylocentrotus intermedius), гонады которых (женские и мужские) используются в качестве пищи, не имеют в среде обитания возбудителей болезней, опасных для человека. Поэтому с высокой долей вероятности можно полагать, что сперма (гонады) морских беспозвоночных является оптимальной добавкой к регенерирующим кремовым композициям. Естественно, следует помнить о механизме действия регенерирующих косметических преаратов (см. выше), способствующих увеличению скорости деления клеточных систем кожи. Поэтому чрезвычайно важным является обязательное возрастное ограничение их применения. Нецелесообразно, например,  использование рассмотренных регенерирующих косметических средств лицами до 30-35 лет для повседневной профилактической обработки кожи. Однако, опытный косметолог может преодолеть это ограничение, ориентируясь на состояние кожи и наблюдая за результатами обработки, используя эти средства в качестве кратковременных масок. На наш взгляд, абсолютно нецелесообразным (или даже вредным) является использование регенерирующих косметических препаратов для лиц моложе 20-25 лет, так как у этого возраста совершенно иные (противоположные) проблемы с кожей.Таким образом, косметология сделала определенный шаг по расширению сырьевой базы, включающий использование биологически активных добавок типа спермы животных к косметическим препаратам. Особенно важным является применение подобных средств после 30-35 лет, когда старение кожи ускоряет свое незаметное (на более ранних этапах) течение (см., например, [24,25]).Вместе с тем, на наш взгляд, абсолютно неральным является бытующее мнение о возможности реализации процесса омоложения. Вряд ли можно повернуть биологические процессы вспять. Философский камень не найден и найден не будет. Единственно реальной и, по-видимому, достижимой задачей косметологии является сохранение состояния кожи человека на достигнутом уровне развития (старения) как можно более длительное время. Этот вывод относится и к рассмотреннам в данной работе препаратам, включающим сперму животных. Мы полагаем, что для возраста «после 30-35 лет» справиться с этой задачей, проводя только очистку, используя витаминизирующие добавки, подпитку и повышая антиоксидантную защиту, практически невозможно.Поэтому косметологи должны взять в свой арсенал более эффективное оружие — окружающие нас биологически активные субстанции животного происхождения. Но, как и с любым оружием, нужно уметь им пользоваться, чтобы не принести вреда.  Статья. «Ванны изоосмотические детоксикационные»Изобретение относится к медицине, а именно к косметологии, бальнеологии и физиотерапии, и может быть использовано для профилактического и лечебного воздействия, как на кожный покров человека, так и посредством нормализации состава плазмы крови на внутренние системы  при устранении аномальных состояний организма.Человек испокон веков использует водные процедуры (купание, обтирание, влажные обертывания и примочки, орошение и пр.) для повышения жизненных функций организма. Становление бальнеологии, в качестве раздела медицины, призванной предсказывать результаты воздействия разнообразных по составу водных систем на человеческий организм, как и многих других научных дисциплин, начиналось с известного метода «проб и ошибок». Бальнеологические рецепты, передаваемые из поколения в поколение, до настоящего времени входят в арсенал народной медицины (см., например, [1]).Не вызывает сомнения, что современная бальнеология должна базироваться на сформированных представлениях о механизмах проницаемости  и факторах, влияющих на проницаемость кожи, а также учитывать наличие взаимосвязи используемых бальнеологических систем с составом лимфы и плазмы крови в организме человека. Следует заметить, что развитие такого рода представлений может происходить на стыке с другими научными дисциплинами. Рассмотрим соответствующие примеры, способствующие решению актуальных проблем бальнеологии.1. Проницаемость кожи и осмотическая активность водных бальнеологических системМерой выражения общей осмотической активности от гипо — до гиперосмотических ванн, содержащих воду, солевые комплексы, и недиссоциированные молекулы разнообразных веществ, служит осмоляльность. Величина осмоляльности, измеряется в миллиосмолях, отнесенных к 1 литру воды (мОсм/л).   В монографии [2], посвященной разработке теории мягких косметологических воздействий, были сформулированы и экспериментально обоснованы подходы к изменению проницаемости кожи при варьировании величины осмоляльности наносимых на кожу водных систем. Практически одновременно этот подход был положен в основу разработки нового вида массажа на клеточном уровне – осмомассажа, который может использоваться и в бальнеологии  [3].  Указанный способ включал проведение бальнеологических процедур поочередно — в гиперосмотической (выше 320 мОсм/л) и гипоосмотических (ниже 100 мОсм/л) ваннах. В результате, при низких значениях осмоляльности клетки зернистого и шиповидного слоев эпидермиса меняют морфологию —  увеличиваются в размерах. При этом они перекрывают межклеточное пространство, с одновременным снижением проницаемость кожи. В свою очередь, при гиперосмотических воздействиях клетки сжимаются, приобретая шаровидную форму. Соответственно, расширяется межклеточное пространство и повышается проницаемость кожи. По имеющимся данным длительное пребывание в гипо- и гиперосмотических водных системах является нежелательным из-за возможности модификации величины осмоляльности плазмы крови. Это несомненно должно отражаться на функционировании клеточных систем организма человека. Так, например, ранее на клеточной тест-системе ЛЭЧ (перевиваемая клеточная линия легких эмбриона человека) было показано [2], что клеточная популяция уничтожается полностью при выращивании или длительном выдерживании клеток (в течении 96 час) в питательной среде с величиной осмоляльности около 500 мОсм/л. Причем, результат воздействия на клетки не зависит от природы ингредиентов, участвующих в создании избыточных значений осмоляльности питательной среды — проверено с добавками солевой системы (натрий, калий, кальций, магний), глюкозы или этилового спирта. Можно полагать, что механизм действия спирта в концентрации до 30 г в 1 литре жидкости на клеточные системы вне организма человека определяется только осмотической составляющей.2. Физиологическая сбалансированность концентраций и соотношений макроэлементов в водно-солевых системах – ключевой параметр безопасности бальнеологических процедур.Существующая практика разработок бальнеологических ванн, препаратов для СПА обертываний (рапа и грязевые субстраты солёных озер), использование воды минеральных источников, разнообразных глин, иловых отложений и т. п. фактически игнорирует наличие проблемы такого рода. Однако, результаты исследований, которые ведутся в области физиологии (см., например, [4,5]), вне всякого сомнения, свидетельствуют о том, что существующую возможность модификации состава плазмы крови следует учитывать при создании современных  бальнеологических средств, рассчитанных на постоянное и/или длительное использование. В частности, в работе  [5] показано, что при калиевых нагрузках (50 мг / кг массы волонтера), вводимых перорально, понижается кожный артериальный кровоток и венозный мышечный отток, а при натриевых нагрузках (100 мг / кг) происходит снижение почти всех показателей периферического кровотока. Используемые авторами варианты модификации содержания ионов калия и натрия ориентировочно могут соответствовать повышению их концентрации в плазме крови на 4.7  и 12 ммоль/л, соответственно. При нормах содержания калия в плазме крови от 3.6 до 5.6 ммоль/л, а для натрия – от 134 до 169 ммоль/л  (см. [6])  используемая калиевая нагрузка  может сдвинуть плазму крови в состояние  гиперкалиемии, в то время как концентрация натрия может сохраняться в пределах нормы. Тот факт, что однократная натриевая нагрузка, меняющая содержание натрия в плазме крови в пределах установленной клиническими исследованиями нормы, существенным образом отражается на показателях периферического кровотока, свидетельствует о необходимости строгого соблюдения концентрации ионов и их соотношений в бальнеологической практике Опасность модификации концентрации и соотношения ионов в плазме крови регистрируется в процессе клинико-диагностических исследований. Так, например, сообщается [6], что при концентрации калия выше 5.6 ммоль/л (гиперкалиемия), исчезают сухожильные рефлексы, возможен паралич дыхательных мышц, а также развитие тахи- и брадикардии, часто возникают аритмии. Гипокалиемия (концентрация ниже 3.5 ммоль/л) вызывает слабость, возможен вялый паралич, ухудшается перистальтика кишечника и т.д. В свою очередь, увеличение концентрации ионов натрия выше 169 ммоль/л (гмпернаириемия) приводит к общему тяжелому состоянию больных, повышается температура и развивается тахикардия. Гипонатриемия (концентрация ниже 134 ммоль/л) сопровождается развитием апатии, тошнотой, рвотой, тахикардией, гипотензией с потерей сознания. На состояние организма также неблагоприятно влияют отклонения от нормального содержания в плазме крови ионов кальция и магния (гипо – и гиперкальцьемия, гипо – и гипермагниемия) [6]. 3. Длительные космические рейсы – использование бальнеологических систем При осуществлении длительных космических рейсов одной из проблем для космонавтов является проведение гигиенических процедур и, в частности, процедур, предназначенных для  поддержания состояния кожи в нормальном состоянии. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что в условиях микрогравитации активизируется деятельность потовых желез. Это приводит к выносу на поверхность тела повышенных количеств веществ, которые являются хорошей питательной средой для развития микроорганизмов.    Несмотря на предпринимаемые меры, направленные на предотвращение попадания микрофлоры в замкнутые пространства космических устройств, следует смириться с тем, что достижение их абсолютной стерильности практически невозможно – источником микроорганизмов являются не только грузы, доставляемые на борт космического корабля, но и сами космонавты. В замкнутых пространствах с практически идеальными условиями для развития микрофлоры (высокая влажность и оптимальная температура) происходит интенсивное ее накопление. Более того, многие факторы, отрицательно влияющие на организм космонавта (повышенный радиационный уровень, градиенты магнитных полей, перепады солнечной активности и т.д.), могут способствовать ускоренной генетической трансформации микроорганизмов. Это обстоятельство представляет определенный риск возникновения, развития на поверхности тел и попадания в организм  космонавтов патогенных, в том числе и ранее не изученных, штаммов. В принципе, проблемы, связанные с очисткой поверхности тела космонавтов, могут быть решены с помощью гигиенических водных процедур (душ, ванны). Водные процедуры могли бы позволить не только очищать поверхность кожи, но и  осуществлять комплексное воздействие на организм в целом. Например, с их помощью можно поддерживать высокую работоспособность, снимать усталость, повышать защитные функции организма в отношении ионизирующих излучений и т. д.Общеизвестно, что для замедления быстрых нейтронов и других видов ионизирующих излучений используют материалы, имеющие водородосодержащие вещества – в частности, воду. Поэтому можно рассматривать решение проблемы защиты космонавтов от ионизирующего излучения посредством длительного пребывания в физиологически выверенных по составу водных системах    При решении задачи длительного пребывания человека в водных системах мы обратили внимание на область значений осмолярности в пределах от 280 до 320 мОсм/л, сопоставимых с осмолярностью лимфы, амниотической жидкости и плазмы крови человека. Препараты, проявляющие осмотическую активность в указанном интервале называются изоосмотическими. Естественно ожидать, что при таких значениях осмолярности бальнеологические средства не будут изменять  морфологию клеточных систем эпидермиса, сохраняя проницаемость кожи (в отличии от гипоосмотических обработок) и не подвергая клетки организма неблагоприятным гиперосмотическим воздействиям.  4. Детоксикационные свойства изоосмотических бальнеологических водно-солевых систем.При погружении в изоосмотическую ванну живого организма клетки эпидермиса сохраняют свою морфологию (не увеличиваются в размерах), что способствует нормальному обмену внутренней межклеточной жидкости с окружающей жидкостью ванны – блокировка преодоления трансэпидермального барьера (это наблюдается в обычных гипоосмотических системах [2]) отсутствует. Скорость и направление обмена веществ, при этом, контролируется диффузионными процессами. Концентрации и соотношения макроэлементов (натрий, калий, кальций и магний) в ванне и в организме оказываются сопоставимыми, поэтому общая скорость диффузионного процесса, измеряемая по изменению концентрации этих компонентов, будет равна нулю. А движение других веществ, которые отсутствуют в ванне, будет определяться градиентом концентраций (общее направление — из организма в ванну). Препятствия для такого рода перемещений, присущие обычным бальнеологическим процедурам (трансэпидермальная блокировка),  устраняются  именно изоосмолярностью ванны.Это обстоятельство превращает бальнеологические процедуры с использованием изоосмотических очистительных ванн в весьма перспективный и деликатный инструмент для освобождения организма человека от разнообразных токсинов, например, от этилового спирта и продуктов его метаболизма — уксусного альдегида (ацетальдегида), который необратимо реагирует с биологически активными аминами, участвующими в каскаде биохимических превращений. Известно, что ацетальдегид, взаимодействуя с катехоламинами, дофамином, серотонином и др. аминами, может менять функции центральной нервной системы и отрицательно воздействовать на различные органы человека [7] Аналогично можно ожидать проявления освобождения организма человека от наркотических препаратов и их метаболитов.В этой связи, представляется также весьма вероятным использование изоосмотических детоксикационных ванн в качестве профилактических и в определенной степени дополняющих процедуру гемодиализа при  лечении пациентов в состояниях с развивающейся и явно выраженной почечной недостаточностью. Следует заметить, что низкомолекулярные токсичные вещества (например, этиловый спирт), попадающие в организм в значительных количествах, способны повышать осмолярность плазмы крови и лимфы (межклеточная жидкость). Так, например, этиловый спирт, введенный в организм в количестве 100 г (примерно 250 г водки) повышает осмолярность межклеточной жидкости более, чем на 200 единиц. Итоговое суммарное значение осмолярности жидкости (примерно 500-530 мОсм/кг), омывающей клеточные системы организма, меняет морфологию клеток (превращение в шарообразную форму) с ожидаемым повышением плотности клеточных мембран. Такое повышение плотности, вне всякого сомнения, будет препятствовать обмену клетки с ингредиентами окружающей среды (замедление поступления в клетку питательных веществ и вывода продуктов клеточного метаболизма). В пределе, при достаточно длительном поддержании приведенных выше значений осмолярности межклеточной жидкости, клеточная система погибает, что и наблюдалось в экспериментах на клеточных культурах (см. выше) Изоосмотические ванны  способствуют выравниванию осмолярности плазмы, лимфы  и межклеточной жидкости. Обычные (гипоосмотические) бальнеологические процедуры, несмотря на наличие градиента концентраций веществ между организмом и ванной, из-за блокировки процессов переноса веществ через кожу являются в этом отношении малоэффективными. В свою очередь, гиперосмотические водно-солевые системы могут повышать осмолярность плазмы крови и оказывать неблагоприятное воздействие на клеточные системы организма (см. выше).Таким образом, теоретические предпосылки и проведенные нами эксперименты позволяют полагать, что изоосмотические очищающие (детоксикационные) ванны могут проявлять многофункциональное действие на организм. На наш взгляд, их следует использовать:- для устранения различного рода аллергических проявлений;- при профессиональных и бытовых отравлениях;- для снижения концентрации поступающих в организм человека из окружающей среды экологически опасных веществ;- для уменьшения содержания в организме этилового спирта и его опасного метаболита (продукта окисления спирта) — уксусного альдегида;- для снятия похмельного синдрома;- для выведения из организма наркотических веществ и их метаболитов;- для ускорения выведения из организма антибиотиков, а также иных лечебных средств и их метаболитов после завершения процесса лечения;- для корректировки величины осмолярности крови, лимфы и межклеточной жидкости при некоторых видах заболеваний;- для снятия стрессовых состояний организма (успокаивающий эффект);- при диабете для очистки крови от альдегидов и кетонов (продукты перекисного окисления липидов) и для снижения уровня глюкозы;- для корректировки артериального давления.Нами разработаны составы сухих концентратов для изоосмотических ванн и SPA-обертываний включающие:очистительные ванны, позволяющие освобождать поверхность тела от выделяемых организмом через кожу веществ и за счет растительных добавок, обладающих широким спектром биоцидного действия, — от бактериальной, грибковой микрофлоры и вирусов;ванны, восстанавливающие на поверхности кожи полезную микрофлору пробиотического характера, предназначенные для предотвращения развития патогенной микрофлоры;питательные и регенерирующие составы для повышения и восстановления жизненных функций человека (работоспособность, снятие усталости, гормональная подпитка, повышение защитных функций в отношение  ионизирующих излучений)Техническим результатом предлагаемого изобретения является повышение детоксицирующих свойств состава для ванн за счет обеспечения нормализации функционирования клеточных систем и введения детоксицирующих растительных добавок.    Это достигается тем, что в составе ванн содержатся солевые добавки в количестве достаточном для обеспечения ваннам изоосмотической активности. В качестве солевых добавок они содержат смеси неорганических солей (Na+, K+, Ca2+, Mg2+), находящихся в таком же соотношении как и в плазме крови человека, и количественное их содержание находится в диапазоне, обеспечивающим изоосмотическую активность от 280 до 320 мОсм/л.В процессе приготовления изооосмотических водных систем ингредиенты, в определенном количестве воды, указанном в инструкции  при температуре 36-39oC.Продолжительность бальнеологических процедур составляет не менее 40 минут. Этого времени достаточно для начала эффективного осуществления переноса веществ из организма в водную систему и наоборот. В изоосмотических водных системах клетки эпидермиса находятся в оптимальном состоянии. Это ведет к  облегчению проникновения биологически активных веществ (комплексы N 1-6) в более глубокие слои кожи. После изоосмотической процедуры отсутствует ощущение сухости (стягивания) кожи, обычно наблюдаемое после проведения гипоосмотических водных обработок поверхности тела.  Промышленная применимость. Изобретение может быть использовано в медицине, включая космическую медицину, бальнеологии и косметологии. Ниже приведены примеры использования ванн в лечебных целях.Результаты испытаний ванны «Детоксикация – норма 1» на солевой основе №2Пример 1. Общие сведения о больном:ФИО: Петрова В.В.Год  рождения:1955 Образование: высшее Семейное положение: разведенаДиагноз: Артериальная гипертензия 2стадии риск 2. Неврастенический синдром. Хронический холецистит в стадии не полной ремиссии.  Артроз коленных суставов  вне обострения. Ожирение 1-2 стадии.Катамнез: больная  Петрова В. В. 54 года  служащая. Обратилась к лечащему врачу с проблемой лишнего веса, болями в правом подреберье связанными с погрешностью в пищевом режиме, утреней тошнотой и горечью  во рту. Отмечает в течении последних лет боли в коленных суставах связанные с нагрузкой . Отмечает в последнее время не мотивированную тревогу, беспокойство, напряжение неприятные ощущения в области сердца связанную с инволюционными процессами и менопаузой, психо-эмоциональными нагрузками. После осмотра врачом, изучения имеющейся медицинской документации  поставлен предварительный диагноз: Артериальная гипертензия 2стадии риск 2. Неврастенический синдром. Хронический холецистит в стадии не полной ремиссии.  Артроз коленных суставов  вне обострения. Ожирение1-2 стадии.                                                                                                                                                           На фоне проведенного лечения ваннами типа, тремя курсами(см. прил. 1), в период с мая  2008года по июнь 2008 года: снизилось артериальное давление до 110/95 после первой ванны и в течении года более не поднималось, не смотря на полную отмену гипотензивных препаратов. После двух ванн исчезли симптомы менопаузы ( приливы ), нормализовалось психо-эмоциональное состояние. Вес снизился со 108 кг. до  83 кг. при росте 182 см. В ноябре 2008 года проведена холецистэктомия, операция проведена лапораскопически.  Лечащим врачом- хирургом отмечено быстрое заживление постоперационных ран, и отсутствие спаечного процесса в течении года. Со стороны желудочно-кишечного трактажалобы у больной отсутствуют до сих пор. При появлении симптомов неврастении,  в связи с личными обстоятельствами, использует курсовую терапию ваннами.

Симптомы 15.05.2008 17.05.2008 23.05.2008 04.06.2008 05.06.2008 07.06.2008
До После До После До После До После До После До    После
Беспокойство + + + + +
Раздражительность + + +
Мышечные боли + + + +
Бессоница + + + + + +
Потоотделение + + + + + +
Приливы крови к лицу + + + + + + + + + + +
Тошнота
Повышение температуры
Повышение АД + + +
Дополнительные сведения Отмечает ровный, повышенный фон настроения

Пример 2. Общие сведения о больном:ФИО: Коротеева Л.Е.  Год  рождения:1956 Образование: средне — техническое Семейное положение: разведенаДиагноз: Сахарный диабет 2 типа. Неврастенический синдром.  Артроз коленных суставов  вне обострения. Фибромиома матки. Миопия 1ст. Ожирение 1-2 стадии.Катамнез: больная  Коротеева Л.  Е. 53 года  служащая. Обратилась к лечащему врачу с проблемой лишнего веса, которую связывает с заболеванием  сахарным диабетом, невозможностью  поддерживать гипокалорийную диету . Отмечает в течении последних лет боли в коленных суставах связанные с нагрузкой и в покое . Отмечает в последнее время беспокойство, чувство постоянной усталости ,напряжение и неприятные ощущения связанные с инволюционными процессами и менопаузой. После осмотра врачом, изучения имеющейся медицинской документации  поставлен предварительный диагноз:   Сахарный диабет 2 типа. Неврастенический синдром.  Артроз коленных суставов  вне обострения. Фибромиома матки. Миопия 1ст. Ожирение 1-2 стадии. Изменения сахара крови контролирует глюкометром ежедневно.         На фоне проведенного лечения ваннами ВИД в период с августа 2008года по сентябрь 2008 года: снизился  сахар крови  после первой ванны с 8,7 до 5,6 ммоль/л, и  удерживался на данном уровне весь период лечения. Сахароснижающие  препараты отменены. После двух ванн исчезли симптомы менопаузы (приливы), нормализовалось психоэмоциональное состояние. Вес снизился со 97кг до 88 кг при росте 168 см. Достоверных данных о влиянии ванн на остальную симптоматику нет, т.к. больная лечащих врачей специалистов не посещала.

Симптомы 12.08.2008 13.08.2008 23.08.2008 03.09.2008 05.09.2008
  До После   До После   До После   До После   До После
Беспокойство + + + +
Раздражительность + + +
Мышечные боли + +
Бессоница + + + +
Потоотделение + + + + + + + + + +
Приливы крови к лицу + + + + + + + + + + + + + +
Тошнота  —
Повышение температуры
Повышение АД 170/100 130/90 140/90 130/90 125/85 110/70 130/80 120/80 130/90 120/80
Дополнительные сведения Отмечает легкость при ходьбе, ровное настроение, повышение работоспособности, отменила гипотензивные препараты

Пример 3. Общие сведения о больном:ФИО: Цибульская Н. А. Год  рождения: 1972Образование: высшее  Семейное положение: разведенаДиагноз: Невроз. Срыв адаптации Астенический синдром. Ожирение 1-2 стадии.Катамнез: больная  Цибульская Н. А. 37 лет  служащая. Обратилась к лечащему врачу с проблемой тоскливого настроения, раздражительности, ослабления внимания, нарушения сна. Данное заболевание развилось после развода с мужем. Кроме того, предъявляла  жалобы на: «отвращение к умственной деятельности»,   нарушение в интимной сфере. После осмотра врачом, изучения имеющейся медицинской документации  поставлен предварительный диагноз:  Невроз. Срыв адаптации. Астенический синдром. Ожирение 1-2 стадии.На фоне проведенного лечения ваннами ВИД в период с июля 2008года по август 2008 года: после двух первых ванн нормализовался сон, исчезли беспокойство, чувство постоянной усталости, напряжение После первого курса ванн исчезли симптомы. нарушения в интимной сфере. Вес снизился со 75 кг до  69 кг при росте 174 см. Препараты психиатрической практики на данный момент не принимает.  При появлении симптомов неврастении,  в связи с личными обстоятельствами, использует  терапию ваннами.

Симптомы 15.07.2008 25.07.2008 27.07.2008 02.08.2008 05.08.2008
  До После   До После   До После   До После   До После
Беспокойство +
Раздражительность + + + +
Мышечные боли
Бессоница
Потоотделение
Приливы крови к лицу
Тошнота
Повышение температуры
Повышение АД
Дополнительные сведения После ванны – продолжитель-ный  15-ти час. сон Состояние без динамики

Пример 4. Общие сведения о больном:ФИО: Клюкина А. В.Год  рождения:1971 Образование: высшее  Семейное положение: разведенаДиагноз: Невротический синдром. Обессивно-фобическое  расстройство. Выраженные вегетативные нарушения  Ожирение 1-2 стадии.Катамнез: больная  Клюкина А.В. 38 лет  служащая. Обратилась к лечащему врачу с проблемой ночных страхов, боязни темноты и, вследствие этого нарушения сна. Данное заболевание развилось после развода с мужем. Отмечает в последнее время беспокойство, чувство постоянной усталости, напряжение .Кроме того, предъявляла  жалобы на выраженные вегетативные нарушения соответствующие данному заболеванию : чувство холода в конечностях, повышенную потливость. повышение АД, перебои в сердце, неврогенную диарею. После осмотра врачом, изучения имеющейся медицинской документации  поставлен предварительный диагноз:   Невротический синдром. Обессивно- фобическое  расстройство.  Выраженные вегетативные нарушения.На фоне проведенного лечения ваннами ВИД с 16.05.2008 по 4.06.2008 нормализовался сон,  исчезли беспокойство, чувство постоянной усталости,напряжение, исчезли симптомы вегетативных расстр